Некоторые вопросы экспертной идентификации при расследовании причин крупномасштабных катастроф

Д.Ю. Яковлев, Ю.В. Солодун, В.Н. Проскурин

Экспертная идентификация биологического материала занимает сегодня важное место при расследовании причин крупномасштабных катастроф. Такого рода исследования проводятся как в очаге катастрофы, так и на этапах сортировки биологического материала, а также при поступлении последнего в танатологическое отделение бюро судебно-медицинской экспертизы, дальнейших лабораторных исследованиях.

Это связано с тем, что решение идентификационных задач в рамках расследования событий предоставляет дополнительные возможности для реконструкции картины происшедшего, а, следовательно, и установления причин трагедии, позволяет разрешить и комплекс диагностических задач, что на первоначальном этапе расследования является основой версирования [1].

По понятным причинам такого рода медико-биологические исследования должны проводиться в максимально сжатые сроки, быть достаточно информативными и иметь высокую степень достоверности.

Однако, в иркутском областном бюро судебно-медицинской экспертизы (ОБСМЭ) экспертные исследования, связанные с опознанием трупного материала и идентификацией, после авиакатастрофы ТУ-154 (03.01.94) проводились в течении 62 дней, при этом окончательно не было идентифицировано 8 биологических объектов. Экспертизы проводимые после катастрофы АН-124 «Руслан (06.12.97) продолжались 48 дней, при этом до настоящего времени окончательно не закончены идентификационные исследования 4 объектов биологического происхождения.

Небходимо отметить, что проводимые в связи с оперативно-тактическими мотивами действия, в том числе способы тушения пожара с использованием воды и пенных растворов, разбор завалов, мероприятия по осмотру, изъятию, систематизации, упаковке и транспортировке останков людей ограничивали некоторые экспертные возможности, затрудняли ситуационную оценку картины катастрофы и реконструкцию имевшего место события. При таком подходе и в виду краткосрочности процесса травматизации и многофакторного влияния других видов воздействия на тела погибших установить механизм и специфику агональных реакций и танатогенез каждого участника авиарейсов, а также жильцов дома, пострадавших в катастрофе, не представилось возможным. Совершенно очевидно, что комплексное воздействие поражающих факторов на тела людей в момент гибели и в ходе операции по ликвидации последствий авиакатастроф делает подчас невозможным осуществление всего комплекса экспертных мероприятий как в очаге катастрофы, так и в лабораториях СМЭ. К таким факторам следует отнести резко выраженную фрагментацию тел от действия механических факторов, дополненную повреждениями при извлечении останков из завалов, повреждающее действие взрывной волны, действие высокой ( до 1200⁰ С) температуры в очагах возгорания топлива, действие низкой температуры до -26⁰ С как природного фактора, действие жидкости (воды и пенных смесей), применяемых при пожаротушении, действие токсических продуктов, образующихся при сгорании пластических масс , а также окиси углерода.

К дополнительным повреждающим факторам следует отнести всевозможные механические ( динамические) повреждения останков при их сортировке, транспортировке и хранении. Так в авиакатастрофе января 1994 года из 113 погибших грубая фрагментация тел имела место у 97 исследованых.

Криминалистическая идентификация останков проводилась преимущественно по опознанию частей одежды, обуви, носимых на теле предметов, украшений и морфологическим признакам.

В авиакатастрофе 1997 г. были исследованы останки 52 лиц, подверженных выраженному многофакторному воздействию, в том числе высокотемпературному. При этом останки частично или полностью утратили конституциональные внешние опознавательные и анатомические признаки.

Следует отметить, что опознание экипажа и сопровождающих груз лиц, находившихся в салоне летательного аппарата, было осуществлено в первую очередь благодаря использованию сведений о зубо-челюстной формуле, поскольку в медицинских карточках военнослужащих имелись подробные описания стоматологического статуса. Другими опознавательными признаками послужили частицы одежды, сохранившейся на не подвергнутых обугливанию частях тела, металлические предметы (пуговицы, застежки-молнии, пряжки ремней, обуви и т.д.). Идентификация лишь двух биологических объектов из салона самолета вызвала затруднения в криминалистической идентификации - потребовалось применение дополнительных судебно-биологических и криминалистических методов.

Что же касается гражданских лиц, погибших на месте падения самолета ( жители дома, горожане, находившиеся во дворе ), то их опознание было затруднено по объективным причинам и в первую очередь, это сильное обугливание тел. Экспертная идентификация в этих случаях, проводимая как на месте катастрофы, так и в лабораториях ОБСМСЭ осуществлялась достаточно ограниченным методами, исходя из возможности учреждения.

Основной идентификационной системой используемой для опознания при отсутствии устойчивых морфологических признаков являлось определение системы группы крови АВ0.

Данная система анализа относительно проста, не требует дорогостоящего оборудования и участия высококвалифицированного специалиста. В качестве дополнительных используются системы MNSs, Rh, Р - системы полиморфных признаков клеточных элементов крови. Применение таких маркеров в качестве носителей идентификационных признаков возможно только при сохранении форменных элементов крови. Если же кровь частично или полностью гемолизирована, как это наблюдалось при описываемых выше исследованиях, установление групповой принадлежности или проведение идентификационного исследования просто невозможно.

В последнее время накопилось достаточное количество фактологического материала убедительно свидетельствующего о том, что в качестве устойчивых идентификационных признаков могут быть использованы некоторые полиморфные белки сыворотки и ( или ) плазмы крови [2].

Во - первых, в силу своей функциональной значимости данные белки достаточно устойчивы. Это, вероятно, объясняется тем, что растворимые белки жидких сред организма защищены от воздействия внешних факторов и, следовательно, в меньшей степени подвержены действию низких и высоких температур, а так же химических веществ. Что касается поражения динамическими поражающими факторами, то их влияние на жидкие среды организма и их компоненты весьма незначительно и не приводит в подавляющем большинстве случаев к принципиальным изменениям идентификационных признаков или их уничтожению;

во - вторых, концентрация данных белков в жидких средах организма достигает значительной величины;

в - третьих, они обладают сильно выраженным полиморфизмом, что с одной стороны увеличивает достоверность получаемых результатов, которая в самом общем случае определяется как произведение частот встречаемости последних в популяции, а с другой - ведет к значительной экономии материально - технических и временных ресурсов, что немаловажно при расследовании причин катастрофы;

в - четвертых, приборная база для проведения идентификационных экспертных исследований такого рода не включает в себя дорогостоящую аппаратуру, а значит ее комплектация возможна на уровне областных и региональных ОБСМЭ и судебно - биологических отделений ЭКУ УВД крупных городов, краев и областей;

в - пятых, методические подходы, предлагаемые для изучения данных белков весьма чувствительны и не требуют больших объемов материала для исследования. Это обстоятельство открывает дополнительные возможности для анализа и экспертной оценки вещественных доказательств, обнаруживаемых на месте катастрофы даже в микроколичествах.

Какие же сывороточные белки можно рассматривать в качестве идентификационных признаков крови?

При установлении половой принадлежности различных вещественных доказательств биологического происхождения, на наш взгляд, целесообразно использование ассоциированного с беременностью A₂ - гликопротеида ( АБГ ). Этот белок присутствует в сыворотке здоровых женщин в концентрации 0,022 г/л, а в сыворотке мужчин - 0,001 г/л. В период беременности концентрация этого белка в крови женщин растет в 1 - 3 триместре неосложненной беременности, а перед родами несколько снижается.

На основании имеющихся у нас экспериментальных данных можно заключить, что белок сохраняет нативную конформацию и антигенную детерминанту в трупной крови, сравнительно легко идентифицируется и служит достоверным маркером при установлении половой принадлежности вещественных доказательств биологического происхождения.

Немаловажно, что для проведения данного исследования практически не требуется дорогостоящая аппаратура, что весьма немаловажно в современных экономических условиях.

При установлении групповой принадлежности биологических субстратов, особенно подвергшихся сильной фрагментации возможно использование в качестве идентификационного признака сывороточного белка A_{2 -} макроглобулина ( МГ ). Этот белок является ингибитором протеиназ и идентифицируется не только в крови, но и других жидких средах организма. Эволюционно он возник приблизительно 500 млн. лет назад и представлен во многих таксономических группах.

Однако, имеют место существенные различия в структуре данного белка у разных родов, классов, типов животных и человека.

Нами получены экспериментальные подтверждения полиморфного характера данного протеина у разных таксономических групп и разработана методика идентификации МГ в трупном материале с использованием дотт - блоттинга.

В ЭКЦ МВД РФ разработана и успешно внедрена в практику методика установления групповой принадлежности крови по полиморфным белкам сыворотки: Gc и гаптоглобину. Для определения генетически детерминированных фенотипов белка используют метод горизонтального электрофореза на стандартном комплекте приборов “Коллоид”. Такое направление научных исследований при установлении групповой принадлежности крови и идентификации трупов и их фрагментов представляется весьма перспективным по перечисленным выше соображениям. Однако, на наш взгляд, необходимо расширить круг исследуемых белков с целью создания единой идентификационно-диагностической системы, отвечающей всем требованиям, предъявляемым к экспертным системам такого рода, которые применяются или же могут быть применены при расследовании причин крупномасштабных катастроф. Внедрение данной методики в практику расследования существенно повысит информативность, доказательственную значимость экспертных систем, будет способствовать повышению достоверности экспертных оценок биологического материала, облегчит дифференциацию одногрупповых следов и вещественных доказательств биологического происхождения, окажет позитивное влияние на отработку версий о причинах трагедии и установление причинно - следственных связей.

Литература

Пашинян Г.А., Тучек Е.С.// Судебно-медицинская экспертиза при крупно масштабных катастрофах. -М., ПАН,1994, 136 с.

 

Яковлев Д.Ю., Солодун Ю.В..

ИЗУЧЕНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА СЫВОРОТОЧНОГО МАКРОГЛОБУЛИНА НЕКОТОРЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДОВ RATTUS, MUS, APODEMUS СЕМЕЙСТВА MURIDAE.

Изучение альфа₂-макроглобулина как представителя класса неспецифических ингибиторов протеиназ представляется весьма перспективным с точки зрения решения ряда вопросов, связанных с анализом филогенетических взаимоотношений между различными таксономическими единицами, выяснением структурно-функциональных свойств данного белка, особенностей эволюции макроглобулинов.

Кроме того, в литературе имеются сведения, касающиеся полиморфизма альфа₂-макроглобулина внутри отдельного таксона [2].

Объектами исследования служили образцы крови 33 представителей вида Rattus norvegicur, 17 - Mus musculus, 26 - Apodemus agrarius, 31 - Apodemus silvaticus.

В качестве контроля использовали пул крови доноров.

Животных декапитировали, кровь собирали в стеклянные пробирки, выдерживали в термостате при 37⁰ С в течение 2ч, после чего из пробирки удаляли фибриновый сгусток. Сыворотку переносили в центрифужные пробирки Eppendorf фирмы Pharmacia ( Швеция ), центрифугировали при 2000 об / мин в течение 30 мин. Супернатант отбирали и хранили при температуре - 20 ⁰ С.

Наличие белковых изоформ регистрировали при помощи реакции дотт-блоттинга [3]. Для этого в лунки планшета наносили по 5 нг сыворотки крови исследуемого образца и добавляли 100 мкл антител к альфа₂-макроглобулину человека, меченных пероксидазой из хрена. Инкубировали в течение 60 мин в термостате при 37⁰ С. Визуализацию результатов осуществляли фенилизотиоционатом.

Окончательную обработку результатов исследования проводили с помощью оптической системы анализа изображения IBASS - 2.

Для статистической обработки результатов использовали коэффициент корреляции Вилкоксона - Манна - Уитни.

В результате исследования установлена высокая степень гомологии между альфа₂-макроглобулином сыворотки крови человека и представителей отряда Rodentia. Степень гомологии - 67 %.

Гомология белков внутри отряда Rodentia составила 74,5 %. Соответственно межвидовая гомология - 87,3 %, внутривидовая гомология - 97,4%.

Результаты исследования:

подтверждают данные о филогенетическом присутствии белка в разных таксономических группах;

свидетельствуют об уменьшении степени гомологии в ряду вид - род - семейство - отряд;

Литература

Зорин Н.А., Жабин С.Г., Чирикова Т.С. Изменение альфа2-макроглобулинов в процессе эволюции // ЖЭБиФ.- № 3.- 1990.

Зорин Н.А., Жабин С.Г., Зайцева С.В. Иммуноэлектрофоретическая идентификация белков, разделенных методами зонального иммуноэлектрофореза и изоэлектрического фокусирования // Вопр. мед. химии.- № 5.- 1990.