Қазақстан республикасының білім және ғылым министірлігі
жүктеу/скачать 3.94 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- УДК 581. 1: 582.475 Защитная роль янтарной кислоты в свободнорадикальном процессе.
- УДК: 577. 24; 575. Биохимические механизмы супрессии РНК-интерференции вирусами растений
- Биохимические свойства вирусных супрессоров RNAi: Potyvirus
- Tombusvirus
- Tobamovirus
- Небольшие цистеин - обогащенные белки.
- Tobravirus
- Hordeivirus
Литература 1.Sanford A, Silverman E/ Chronic obstructive pulmonary disease 1: susceptibility factors for COPD the genotype- environment interaction // Thorax 2002 2. Чучалин А.Г.// Хронические обструктивные болезни легких – М; ЗАО издательство БИНОМ -1999 3. Глобальная стратегия диагностики, лечения и профилактики ХОБЛ / перевод с англ.под ред. Чучалина -1998;2003 (GOLD) 4. Lomas D.A, Silverman E.K / The genetics of chronic obstructive pulmonary disease 2001,p20-26 5. Гинтер Е.К / Популяционная генетика и медицина / Вестник РАМН -2001,с-25-31 6.Спицин В, Новорадовский А, Парик Ю// Полиморфизм α 1-антитрипсина // генетика 1989 7. Joos I, Pape P, Sanford A / genetic risk factors for chronic obstructive pulmonary disease-2002 8. Sanford A, Weir T, Spinelli J et al. Z and S mutation of the α 1- antitrypsin gene and the risk of chronic obstructive pulmonary disease// Am. Respir. cell boil-1999 9. Goldman, Anderson, Stolzenberg et al. / human defensin-1 is a salt-sensetive antibiotic in lung that is inactivated in cystic fibrosis -1997 10. He C, Gong P, Hu B et al. Implication for heme oxygenase-1 gene regulation// biochem-2001 11. Ishii T, Matsuse T, Teramoto S et al. DNA polymorphism of the α 1- antichymotrypsin gene regulation in patients with chronic obstructive pulmonary disease // Eur. J. clin-2000 12. Joos I, Mc Inntype L, Ruan G et al. Association of interleukin1 beta and IL-1 receptor antagonist haplotypes with rate of decline in lung function in smokers// Thorax -2001 13. Lim S, Roche N, Oliver B et al. Balance of matrix metalloproteinase-1 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 from alveolar macrophages in cigarette smokers. Regulation by IL-10 -2000 14. Matsushita I, Hasegawa K, Nakata K et al. Genetic variants of human b-defensin-1 and chronic obstructive pulmonary disease -2002 15. Schellenberg D, Pare D, Weir T et al. Vitamin D binding protein variants and the risk of COPD-1998 16. Teramoto S, Ishii T, Matsuse T// Genetic susceptibility to tobacco toxicity and chronic obstructive pulmonary disease-2002 17. Баранов В, Баранова Е, Иващенко Т, Асеев М// Геном человека и гены «предрасположенности»-2000 УДК 581. 1: 582.475 Защитная роль янтарной кислоты в свободнорадикальном процессе. Алтаева А.С Евразийский Национальный Университет им. Л.Н.Гумилева, Астана, Казахстан
Диеновые конъюгаты, являющиеся первичными продуктами ПОЛ, относятся к токсическим метаболитам, которые оказывают повреждающее действие на липопротеиды, белки, ферменты и нуклеиновые кислоты. Дальнейшими продуктами ПОЛ являются альдегиды и кетоны (малоновый диальдегид и др.), которым принадлежит важная роль в синтезе простагландинов, прогестерона и других стероидов. Взаимодействие диальдегидов со свободными группами мембранных соединений образуют конечные продукты ПОЛ, непрерывное накопление которых дестабилизирует мембраны и способствует деструкции клеток. Дальнейшее увеличение количества свободных радикалов и гидроперекисей липидов должно было бы привести к быстрому разрушению клеточных структур, но в естественных условиях этого не происходит благодаря наличию сложной и многокомпонентной системы биоантиокислителей и естественных антиоксидантов, способных при химическом воздействии ингибировать свободнорадикальное окисление липидов. При нормальных условиях в организме сохраняется равновесие между скоростью ПОЛ и активностью антиоксидантной системы (витамины Е, С, В, супероксиддисмутаза, каталаза, глютатионтрансфераза, глютатионпероксидаза, глютатионредуктаза и др.), что является одним из основных показателей гомеостаза. Избыточное образование продуктов ПОЛ, как отмечено выше, оказывает цитотоксическое действие, что проявляется повреждением мембран эритроцитов, лизосом. При этом изменяется структура мембран клеток, вплоть до их разрыва, ингибируется активность цитохромоксидазы. Свободные радикалы участвуют прямо или опосредованно в механизмах некроза и апоптоза, т.е. в процессах, регулирующих длительность тканей, органов и систем организма, в процессах старения организма и в конечном итоге, в контроле длительности жизни организма. В организме активность ПОЛ и активность системы антиоксидантной защиты находятся в постоянном равновесии, и скорость перекисного окисления липидов превышает способность антиоксидантной системы гасить избыточное количество свободных радикалов. Такой процесс протекает лавинообразно с увеличением концентрации свободных радикалов, которые затем снова формируют цепи окисления. Эта практически цепная реакция прерывается лишь взаимодействием с антиоксидантами. Это обстоятельство диктует необходимость применения антиоксидантов в комплексной терапии. Исследования многих авторов показывают, что применение различных антиоксидантов (витамина Е, С, никотинамида, диквертина, тиоктацида и др.) снижает содержание продуктов ПОЛ (диеновые конъюгаты и малоновый диальдегид), повышает активность ферментов антиоксидантной защиты, что оказывает положительное воздействие на стабилизацию организма, сохраняя работоспособность и качество жизни больных, что в конечном итоге отдаляет время инвалидизации и снижает летальность. Было исследовано комбинационное воздействие оксида хрома, на экспрессию ICAM1 с янтарной кислотой. Результат в контрольном образце показал, что уровень экспрессии ICAM1 меньше, при стимулировании TNF –α экспрессия увеличивалась. Через 2 ч после обработки клеток оксидом хрома (10 µМ) уровень экспрессии ICAM1 менялся не значительно, только к 8 ч и 20 ч экспрессия повышалась. Обработка оксидом хрома через 8 и 20 часов значительно усиливает уровень экспрессии ICAM1. Показано что, янтарная кислота приводит к существенному ингибированию Cr- индуцированной экспрессии гена ICAM1. Эти результаты показывают, что NF kB играет существенную роль для ингибирования ПОЛ - зависимой цитотоксичности в действии с антиоксидантами. Определенно экспрессия ICAM1 происходит через индукцию ПОЛ. В целом предположительно, что оксид хрома сильнее активизирует NF kB в клетках фибробластах, нейроклетках. Таким образом, сохранение редокс-статуса клеток (тканей) обеспечивает как стабилизацию в них редокс чувстительных факторов (NF-kappa-B) и ограничение экспрессии генов, сохранение физиологической функции этой сигнальной молекулы. Предположительно, что протекторное действие янтарной кислоты показывает ее способность регулировать факторы, которые могут воздействовать на экспрессию генов и другие клеточные функции. Предварительная обработка клеток янтарной кислотой под действием токсических металлов приводила к снижению экспрессии генов cIAP10 (которые активизируются ядерным фактором NF-kB), ингибируя NF-kB сигнальные пути. УДК: 577. 24; 575. Биохимические механизмы супрессии РНК-интерференции вирусами растений Ибраева А.Р, Albina_-92@mail.ru Евразийский Национальный Университет им. Л.Н.Гумилева; Астана, Казахстан; Абстракт. В регуляции экспрессии генов у эукариотов важную биологическую роль играет молекулярный процесс РНК интерференции (RNA interference (RNAi)). В настоящее время также стало очевидным, что RNAi также является адаптивным защитным молекулярно-иммунным механизмом, направленным против вирусных заболеваний. Антивирусная RNAi инициируется с генерации коротких интерферирующих РНК (short interfering RNAs (siRNAs)), которые используются в последующем распознавании и деградации вирусных молекул РНК. В ответ на защитную реакцию растений, большинство вирусов кодируют специфические белки, способные противодействовать RNAi, и данный процесс общеизвестен как супрессия RNAi. Вирусные супрессоры действуют на различных этапах RNAi и обладают биохимическими свойствами, которые позволяет им эффективно противодействовать защитной системе растений. Современные молекулярные и биохимические исследования нескольких вирусных супрессоров значительно расширили наше понимание всей сложности природы супрессии RNAi, а также заметно углубили наше понимание всей сложности природы взаимодействия между вирусами и растениями. Введение. RNAi первоначально известная как пост- транскрипционное молчание генов (post-transcriptional gene silencing (PTGS)) в растениях, представляет собой молекулярный механизм, который играет главную роль в регуляции экспрессии генов в живых организмах. RNAi в высших растениях, также является естественной молекулярной составляющей устойчивости, которая способна к селективному распознаванию вирусов с их последующей деградацией. Изначальным и пусковым механизмом в RNAi является синтез длинных двухцепочечных молекул РНК (dsRNA)(1). Следующий функциональный шаг RNAi включает в себя действие ферментов Dicer (Dicer-like DCL)-(членов группы РНКазы III), которые катализируют образование коротких интерферирующих молекул РНК (short interfering RNAs (siRNAs)) или микро РНК (microRNAs (miRNAs)) 20-30 нуклеотидов (нт) (2,3). В последующем шаге RNAi, двухцепочечные молекулы siRNAs расплетаются, и одна из цепей встраивается в многокомпонентный эффекторный комплекс (RNA-induced silencing complex (RISC)). Включаясь в RISC, siRNA функционирует в качестве «поисковой матрицы» для распознавания комплементарных нуклеотидных последовательностей специфических транскриптов с их последующим ферментативным гидролизом(3). Комплиментарное спаривание между нуклеотидами siRNA и заданной РНК обеспечивает эффективное и высокоспецифичное обнаружение нужной цели. Экспериментальные данные дают основание полагать, что siRNAs и белки семейства Argonaute (AGO) представляют собой универсальные компоненты RISC(4). В ответ на действие RNAi, вирусы выработали специфические стратегии для противодействия молекулярному механизму иммунной устойчивости растений. Наиболее эффективной и действенной контрмерой против RNAi является вирусная супрессия молекулярного иммунного механизма. Например, многие вирусы кодируют специфические белки-супрессоры (viral supressors of RNAi (VSR), которые способны эффективно блокировать RNAi. Экспрессия VSR вирусами для противодействия защитной системе растений выдвигает вполне конкретное предположение, что изначальной функцией RNAi в растениях было противодействие вирусным патогенам. В большей части экспрессия данных белков не является обязательным фактором для вирусной репликации, однако вирусные супрессоры необходимы для успешной аккумуляции и распространения вирусов в ходе инфекции. К настоящему моменту обнаружено множество вирусных белков, которые обладают супрессорной активностью. Однако описания биохимических механизмов их работы появились в литературе относительно недавно. Последние молекулярные, биохимические и структурные исследования различных VSR позволили детально рассмотреть механизмы супрессии RNAi. Общим свойством всех вирусных супрессоров является их способность к противодействию защитной системе RNAi на её различных этапах. Данное противодействие является ярким примером сложной и интенсивной «эволюционной борьбы» между вирусами и растениями. Коэволюция между вирусными супрессорами и механизмом RNAi растений, также свидетельствует о чрезвычайно сложной природе адаптации вирусов к защитной системе растений. Цель сегодняшней работы заключается в обобщении современных научных данных о молекулярных и биохимических механизмах супрессии RNAi некоторыми вирусами растений. Биохимические свойства вирусных супрессоров RNAi: Potyvirus HC-Pro. Вирусы семейства Potyviridae кодируют супрессор HC-Pro (helper component-proteinase), который служит в качестве классического примера вирусного белка, ответственного за успешное системное распространение вирусов этого семейства в инфицированный организм. Наиболее важной биологической функцией HC-Pro является его участие в супрессии RNAi.. Независимые исследования показали, что белок является стержневым фактором в супрессии RNAi в инфицированных растениях. Дальнейший мутационный анализ вируса показал, что центральный регион HC-Pro необходим для супрессорной деятельности белка. Было так же показано, что экспрессия HC-Pro приводит к дефектам в росте и дифференцировки растений Arabidopsis, предположительно благодаря ингибированию miRNA-ассоциированного гидролиза РНК транскрипционных факторов. Впервые была установлена функциональная схожесть между молекулярными факторами, вовлеченными в процессы роста и дифференцировки с одной стороны, и антивирусной RNAi с другой. Более того, было впервые предложено объяснение причине возникновения симптомов заболевания в инфицированных растениях ввиду экспрессии вирусного супрессора(5). Было обнаружено, что HC-Pro препятствует функциональному метилированию mi/siRNA и связыванию ds siRNA. Недавние исследования выявили функциональную роль участка FRNK в структуре HC-Pro белка для связывания siRNA. Более того, было обнаружено, что данная функция взаимосвязана с селективным связыванием miRNAs и степенью колебания симптомов вирусного заболевании. Tombusvirus P19. Ранние генетические исследования белка P19, который кодируется геномом вирусов семейства Tombusviridae, выявили вовлеченность белка в процессах репродукции, движения, инкапсидации и векторной трансмиссии вируса. Между тем, позднее было открыто, что P19 является важным патогенным фактором, который необходим для развития симптомов инфекции. Дальнейшие исследования показали решающую роль TBSV P19 в защите вирусной РНК в ходе системной инфекции в растениях N. Benthamiana(6,7). Более того биологическая активность белка зависела от его количества, т.е. успешная инфекция, сила симптомов, а также стабильность вирусной РНК требуют достаточно высокого уровня экспрессии P19. Вероятно наиболее весомым объяснением функции того или иного белка является определение его структуры. Исследования, проведенные двумя независимыми научными группами полученные методом рентгеновской кристаллографии, указали на существование комплекса между димерами P19 и двухцепочечными молекулами siRNA(8,9). Более того, прямое физическое взаимодействие между P19 и вирусными siRNAs было также обнаружено в инфицированных растениях. Тем самым, функция P19 в качестве вирусного супрессора состоит в том, что в ходе инфекции белок P19 связывает обильно циркулирующие вирусные siRNA делая их недоступными для программирования RISC, активность которого необходима для разрушения вирусной РНК. В результате этого происходит аккумуляция вирусных молекул РНК в инфицированном организме. Было также показано, что P19 препятствует процессу защитного метилирования miRNAs. Таким образом, есть основание предполагать, что способность P19 связывать siRNA может также препятствовать работе фермента HEN1, ответственного за метилирование siRNA. Tobamovirus репликаза. Tobacco mosaic virus (TMV) приводит к активации защитной RNAi в растениях, так как вирусная инфекция сопровождается с генерацией вирусных siRNA(10). Более того, единичная аминокислотная замена в TMV репликаза приводит к отсутствию симптомов в течение вирусного заражения. Биохимические эксперименты по изучению взаимодействия TMV репликаза с молекулами РНК указывают, что данный белок имеет способность связывать короткие молекулы siRNA. Более того было показано, что siRNA связывающая способность белка не препятствует активности уже перепрограммированного RISC, указывая на необратимость механизма программирования нуклеазного комплекса. Последние исследования указывают на то, что инфекция TMV препятствует метилированию siRNA ферментом HEN1 метил трансферазой. Однако остается неясным, влияет ли данный супрессор непосредственно на активность HEN1, или же он участвует в процессе демелитилирования уже преметилированных молекул siRNA. Closterovirus P21. Ранние исследования с Beet yellows virus (BYV), продемонстрировали, что белок 21-кДа (P21) супрессирует РНК - индуцированное умалчивание экспрессии белка GFP(11). Супрессия RNAi была также выявлена, используя гомолог P21 кодируемый другими членами семейства Closteroviridae. Более того, в инфицированных растениях BYV P21 обнаруживается в клетке в качестве растворимого белка цитоплазмы, а также в форме нерастворимых белковых тел на периферии клетки. Примечательно, что подобно P19, P21 не воздействует на активность RISC комплекса, но препятствует процессу miRNA метилирования. P21 представляет собой вирусный супрессор RNAi, который подобно раннее обсуждаемым примерам, препятствует программированию RISC, необходимого для нуклеазной деградации вирусной РНК. Небольшие цистеин - обогащенные белки. Цистеин - обогащенные белки, кодируемые вирусными семействами Hordeivirus, Tobravirus, Pecluvirus, Furovirus и Carlavirus, не проявляют существенной родства, однако они обладают структурным сходством и играют важную роль в вирусных инфекциях и функционируют в качестве патогенных вирусных факторов. Tobravirus 16K. В ходе инфекции данный белок играет ключевую роль для эффективной аккумуляции TRV. Более того, было обнаружено, что белок в состоянии частично супрессировать RNAi в клетках Drosophila. Экспрессия 16K ведет к незначительному уменьшению уровня аккумуляции GFP siRNAs, указывая на возможную роль белка в супрессии начальных этапов RNAi в инфицированных растениях. Последнее данные свидетельствует, что TRV-16K, вероятно блокирует RNAi до момента образования dsRNA, так как супрессионная активность белка нивелировалась с увеличением дозы dsRNA. Hordeivirus b. Barley stripe mosaic virus (BSMV) кодирует 17-кДа цистеин - обогащенный белок b, который не является обязательным для репликации и движения вируса, но существенно воздействует на процесс патогенеза. Первый, косвенный признак возможного участия b в супрессии RNAi был получен в экспериментах с использованием мутанта TRV не экспрессирующим p16. Биохимические анализы показали, что BSMV b взаимодействует с ssRNAs, посредством трех Zn-связующих участков на N-терминальной части белка. Более того, РНК связующая способность b белка существенно стимулируется в присутствии Zn ионов. Несмотря на необходимость получения дальнейших биохимических данных, вышеприведенные результаты дают основание полагать, что взаимодействие вирусного белка с РНК является ключевой функцией b в супрессии RNAi. Заключение. Современные молекулярные и биохимические исследования ряда вирусных супрессоров значительно расширили наши знания о вирусных стратегиях супрессии RNAi. Вирусные супрессоры обладают широким спектром биохимических свойств, необходимых для борьбы с RNAi на разных стадиях этой защитной системы. Дальнейшие детальные молекулярные, биохимические и структурные исследования вирусных супрессоров необходимы для более полного изучения механизма молекулярных отношений между защитной системой организма и вирусами. Со временем эти знания могут быть реализованы, для развития эффективных стратегий создания растений устойчивых к вирусным патогенам. Список литературы: 1. Fire, A., Xu, S., Montgomery, M. K., Kostas, S. A., Driver, S. E., and Mello, C. C. (1998) Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans. Nature 391, 806-811. 2. Deleris, A., Gallego-Bartolome, J., Bao, J., Kasschau, K. D., Carrington, J. C., and Voinnet, O. (2006) Hierarchical action and inhibition of plant Dicer-like proteins in antiviral defense. Science 313, 68-71. 3. Ding, S. W., and Voinnet, O. (2007) Antiviral immunity directed by small RNAs. Cell 130, 413-426. 4. Rand, T. A., Ginalski, K., Grishin, N. V., and Wang, X. (2004) Biochemical identification of Argonaute 2 as the sole protein required for RNA-induced silencing complex activity. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 101, 14385-14389. 5. Chapman, E. J., Prokhnevsky, A. I., Gopinath, K., Dolja, V. V., and Carrington, J. C. (2004) Viral RNA silencing suppressors inhibit the microRNA pathway at an intermediate step. Genes Dev. 18, 1179-1186. 6. Qiu, W., Park, J. W., and Scholthof, H. B. (2002) Tombusvirus P19-mediated suppression of virus-induced gene silencing is controlled by genetic and dosage features that influence pathogenicity. Mol. Plant Microbe Interact. 15, 269-280. 7. Scholthof, H. B., Desvoyes, B., Kuecker, J., and Whitehead, E. (1999) Biological activity of two tombusvirus proteins translated from nested genes is influenced by dosage control via context-dependent leaky scanning. Mol. Plant Microbe Interact. 12, 670-679. 8. Ye, K., Malinina, L., and Patel, D. J. (2003) Recognition of small interfering RNA by a viral suppressor of RNA silencing. Nature 426, 874-878. 9. Vargason, J. M., Szittya, G., Burgyan, J., and Tanaka Hall, T. M. (2003) Size selective recognition of siRNA by an RNA silencing suppressor. Cell 115, 799-811. 10. Molnar, A., Csorba, T., Lakatos, L., Varallyay, E., Lacomme, C., and Burgyan, J. (2005) Plant virus-derived small interfering RNAs originate predominantly from highly structured single-stranded viral RNAs. J. Virol. 79, 7812-7818. 11. Reed, J. C., Kasschau, K. D., Prokhnevsky, A. I., Gopinath, K., Pogue, G. P., Carrington, J. C., et al. (2003) Suppressor of RNA silencing encoded by Beet yellows virus. Virology 306, 203-209.
Л.Н.Гумилев атындағы Еуразия ұлттық университетінің студенті, Астана Ғылыми жетекші: Ұқбаева Т.Д.
АБЛ анықтауды бактериялық (дифтерия, бруцеллез, туберкулез, сифилис, ірің-қабыну және сепсистік аурулар, т.б.) және вирустық (кене энцефалиті) инфекциялары, сондай-ақ, деструкциялық-қабыну үрдістерінің (гломерулонефрит, пиелонефрит, тонзиллит, гепатит, панкреатит, т.б.) диагностикасында сәтті қолданылады [4]. АБЛ тесті үшін эритроциттік реагенттерді дайындау кезінде адам лимфоциттерімен кездейсоқ розеткалар түзбейтін тауық немесе бұқа эритроциттерін қолданады [5]. Алуан түрлі ұлпалық арнайылық АБЛ анықталуы бойынша патологиялық үрдіске жүрек, бауыр, бүйрек (қабық және ми қабаттары) ұлпалары, таңдай бадамы, дәнекер ұлпасы, тік және тоқ ішек, өт көпіршігі, басқа мүшелер мен ұлпалардың қатысуы туралы айтуға болады [6]. Ауыр түрдегі бруцеллез бен өкпе туберкулезін анықтау кезінде сәйкес арнайылықтағы АБЛ анықтау 100 пайызды құрайды [7]. Дифтерия кезінде АБЛ анықтау әдісі ерте, сондай-ақ, кеш диагностика үшін қолданылуы мүмкін. Берілген әдістің бактериологиялық әдіске қарағанда артықшылығына ол антибиотиктерапия мен арнайы иммундық терапиядан тәуелсіз болуы жатады. Сонымен қатар, АБЛ ошақтарда дифтерияны науқастар мен токсигенді дифтерия коринобактерияларының тасушыларын ерте анықтау мақсатында анықтау үшін қолданылуы мүмкін. АБЛ тестін сальмонеллездік және шигеллездік инфекциясымен ауыр ішек инфекциясымен науқастарда ерте және дифференциалдық диагностика әдісі ретінде Е.А.Славкомен қолданылды. Оның тиімділігі көрсетілді, тест жоғары сезімталдылық, түр және топтық арнайылықпен сипатталады. Көптеген зерттеушілер еңбектерінің нәтижелері бойынша АБЛ зертханалық жануарларды жұқтыру немесе вакцинациясынан кейін алғашқы күндері және адамдардың ауырғаннан кейін алғашқы күндері анықталады. Арнайылық антиген байланыстыратын лимфоциттердің тек гомологиялық антигендер мен АБЛ-дің тек гомологиялық антигендермен таңдамалы реакциясымен анықталуының доза тәуелді немесе конкурентті тежелуімен дәлелденген. Иммунологиялық (T.pallidum арнайылықтағы АБЛ анықтау) және серологиялық әдістер кешенімен превентивті емдеудегі тұлғаларды параллельды зерттеу кезінде алынған мәліметтерді талдау кезінде АБЛ антиденелермен салыстырғанда 11,5 есе жиі анықталған. Бұл мәліметтер сифилистің ерте диагностикасының болашағын анықтайды. Сифилиспен науқастардың барлығында АБЛ анықтау жиілігі 97 % құраса, біріншілік сифилиспен науқастарда 100 % құрады. Бұл тұрғыдан алғанда, әртүрлі антигендерден эритроциттік диагностикумдерді (ЭД) қолданумен розетка түзу реакциясының (РТР) көмегімен АБЛ құрамының динамикасын зерттеу үлкен қызығушылыққа ие. Микроскоппен бақылағанда немесе бояу жолымен Т- және В-лимфоциттерді ажырату мүмкін емес. Клиникалық тәжірибе үшін қазіргі таңда әртүрлі моноклондық антиденелер арқылы анықталатын лимфоциттердің әртүрлі маркерлерін анықтау үлкен маңызға ие. Алайда, қымбат моноклондық антиденелер мен оларды қолдану үшін құралдардың қымбаттығын ескере отырып, клинико-диагностикалық зертханаларда лимфоциттердің розетка түзуінің әртүрлі модификацияларын қолданатын лимфоциттердің фенотиптеу әдістерін қолданады. Ең қарапайым әдіс Т- және В-жасушаларды анықтау бойынша розетка түзу әдісі болып табылады. Т-лимфоциттердің жасушалық мембранасының бетінде қой эритроциттеріне арнайы рецептор орналасса, В-лимфоциттер бетінде тышқан эритроциттеріне арнайы рецептор орналасқан. Бұл эритроциттер Т- және В-жасушаларына маркер қызметін атқарады: әрбір лимфоцит өзінің бетіне 4-ке дейін және оған сәйкес келетін эритроциттерді қосып, микроскоп астында жақсы ажыратылатын розетка түзеді. Сонымен қатар, Т-жасушалардың популяциясында теофеллин әсеріне төзімді жасушаларды ажыратады, бұл Т-хелперлік субпопуляция және төзімсіз (ТФ-сезімтал) Т-супрессорлық популяция. Егер лимфоциттерді алдын-ала теофиллинмен өңдеп, қой эритроциттерімен байланыстырса, онда розетка түзу реакциясы тек лимфоциттердің Т-хелперлік субпопуляциясымен өтеді. Бұл негізде лимфоциттердің субпопуляциясының пайыздық қатынасы туралы тұжырым жасайды. Розетка түзу тесті – перифириялық қандағы антиген байланыстыратын лимфоциттерді анықтаудың негізгі әдісі – мембранада Т-, В-лимфоциттер мембранасында қой немесе тышқан эритроциттеріне рецепторлардың барлық субпопуляцияларының болуына және олармен берік байланыс (розетка) түзу қабілетіне негізделген.
жүктеу/скачать 3.94 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|