Биомассаны анықтау. Құрғақ биомассаның ылғалдылығын және құрғақ биомассаны анықтау
жүктеу/скачать 0.65 Mb.
|
Жұмыстың орындалу әдiсiЛоури әдісі (ақуызды сандық анықтау) Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. V. 193. №1. P. 265-275. Анализ жүргізу 0,5 мл зерттелетін ерітінді + 2,5 мл С реактив, араластыру → + 0,25 мл Фолина Е реактиві → ОП750 Калибрі қисық бойынша ақуыздың саны анықталады. Реактивтерді дайындау Реактив А 1 л 20 г Na2CO3 еріту 0,1 н ерітіндіде NaОН (4г NaОН 600 мл Н2О еріту және 1 л сумен жеткізеді) Реактив В 10 г Na2C4H4O6 (немесе К2C4H4O6) + 300 мл Н2О + 5 г мыс купоросы (CuSO4 • 5Н2О) = 1 л-ге қосып Н2О жеткізеді Реактив С Реактив А + Реактив В = 50 : 1 (олай болса, 50 мл реактив А + 1 мл реактив В) Анықтаудың алдында дайындалады жарамдылығы 1 күннен аспайды. Реактив Фолина 100 г натрий вольфраматы (Na2WO4 • 2Н2О) 25 г натрий молибдаты (Na2MoO4 • 2Н2О) 700 мл ерітеді Н2О + 50 мл 80 % Н3РО4 (немесе 55 мл 72 % Н3РО4)1 +100 мл конц. НСl →колбаны кері холодильникпен қосады және қоспаны 8 сағат қайнатады +150 г күкірт қышқылды литий (Li2SO4) + 50 мл Н2O +5 тамшы бром суы → қоспаны холодильниксіз қайнатады, 15 мин желдеткіштің астында салқындатады, 1 л-ге қажет деңгейге сумен жеткізеді, фильтрлейді және қараңғылау шыныда сақталады. Аликвоттың дайын ерітіндісін фосфор-молибден қышқылының санын анықтауға лабораторияға аналитикалық әдіспен анализ жасауға беріледі. (Фолина Е реактивін дайындау үшін қажет = Реактив Фолина + Н2O) 2 1 - егер Н3РО4 дайындау үшін басқа тығыздығымен қолданылады, онда Н3РО4 санын қайта есептеу керек берілген тығыздығымен [49]. 2 – араластырылған ингредиенттердің үлесін бөтелкеде Фолина реактивімен жазады (мыс., берілген уақытта (декабрь 2012;) Фолин Е = 1 мл Фолина + 0,2 мл Н2O) Ескерту: микроәдісті қолдануға болады. Ол үшін реактив пен сынама санын пропорционально азайту қажет. Микроәдіс үшін Калибрлі қисықты жеке, бөлек тұрғызу қажет. Калибровка (Фотоколориметр қолданылады) Калибрлі қисықты тұрғызу үшін кәдімгі альбумин керек. Әр қайсысы үшін қайта дайындалған Фолина реактивінен калибрлі қисық тұрғызылады. l=360нм 12 сурет. Ақуызды сандық анықтау жүктеу/скачать 0.65 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|