Биомассаны анықтау. Құрғақ биомассаның ылғалдылығын және құрғақ биомассаны анықтау
Ашытқы штамының таксономиялық жағдайын анықтау
жүктеу/скачать 0.65 Mb.
|
| Ашытқы штамының таксономиялық жағдайын анықтау
Алынған культураны толығырақ сипаттау үшін культура формасы жеке-жеке зерттеледі, ашытқы клеткасының размері, штрихтің өсу ерекшелігі және гигантты колоннасы, көбею сипаты, псевдомицелия және спораның пайда болуы, көмірсуды ашыту қабілеті, олардың әр түрлі азотты және көміртекті қоректену көзіне қатысты, күкірт көзіне де, температураның өсу шегіне және культивирлеудің рН ортасына сонымен қатар витаминсіз ортада өсуіне және т.б. Ашытқы жасушасының 2-3 тәуліктік размері және формасы, айлық штрихі, 10-20 күндік және айлық гигантты колоннасын термостатта 28-320 С температурада келесідей қоректік ортада зерттеледі. Солод сусласы (қанттылығы 70 баллинг): Агар –агар - 20 % рН - 5,5 Культура белгілері - ашытқының өсуін, сақина түзілуін, сұйық ортадағы Редер ортасы солод сусласы, жеміс жидек шырынында тұнбаны және сұйықты зерттеу.. 11 сурет. Дунбара түтігі Петри табақшасындағы Мак Клраи ацетонды агарда, гипсті блокта немесе Городковой ортасында, ол псевдомицелий шыны пластинкада, картопты –глюкозды агарда ашытқыдағы спораның түзілуі зерттелді Ашытқы спорасының түзілуі 2-15 тәуліктен бастап белгіленді, ол псевдомицелия 5-7 тәулікте өскенде белгіленді. Әр түрлі жеміс- жидек шырынында және Ридер ортасында келесідей қанттармен Дунбара түтігінің тізесіне жиналған көмір қышқыл газының мөлшері бойынша 12 сағат өткен сайын ашытқының ашу қабілетілігі анықталады: Глюкоза 2 % Сахароза 2% Мальтоза 2% Галактоза 2% Лакоза 2% Рафиноза 3% Ашытқыны күкірттің сіңірілуін жоғарыда көрсетілген ортада Мg SО4 қоспай-ақ анықталды. Егу жасағаннан кейін биомассасы бойынша 2 апта өткен соң ашытқының өскені белгіленді. Қатты қоректік ортада пайда болған затты бақылаумен салыстырғанда, онда тәжірибе жасалатын қоспа жоқ. Егіс материалы ретінде солодты сусла агарда пробиркадағы 2 тәуліктік ашытқы культурасы қолданылады, одан суспензия дайындалады, оның мөлшері 0,1 мл сұйықтықты Дунбара түтігіне ауыстырады немесе бір тамшыдан қатты қоректік ортаға ауыстырылады. Бірақ тәжірибелер 28-300 С температурада термостатта жүргізіледі. Ашытқының өсу температурасын анықтау үшін оларға +80 ден +1500 С дейінгі аралықта өсірілді: 8;10;20;24;28;32;37;41;45;47; және 500 пробиркада солодты сусла агарда. Ортаның рН мәнінің максимальды, минимальды ұлайлылығын анықтау үшін ашытқы ортада 1,5-ден 9,5 дейінгі 0,5 аралықта өсіріледі. Ридер ортада анықталады, онда NaCI-3 г/л құрайтын Осмотолеранттығын культураны 50% глюкозамен өсіріледі. Витаминдерсіз ортада ашытқының өсуі, оларды жасанды Ридер ортасында оған ашытқы автолизатын қоспай өсіріп анықталады. Клетка қосылған ашытқы протаплазмасында (валютин, гликоген, май) құрайтын арнайы әдіспен тірі препараты бояу әдісімен анықталды. Ашытқымен крахмал тәрізді қосылыстың түзілгенін Люгола ертіндісімен тексерілді, бір аптадан кейін белгілі ортада немесе сусла ортасында Петри табақшасында ашытқының өскені анықталды, ал лакмуспен сүтегі реакция пробиркада 2 апта өткен соң анықталды. Ашытқының санын 1 мл шайындыда чашечный әдіспен анықталды. Әрмен қарай зерттеу солодты сусла агар ортада жүргізілді. Ашытқы штаммын салу сусла агарда егіп және 2 тәулік өткен соң одан препарат дайындап оны микроскоппен клеткасын көріп ашытқы анықталды. жүктеу/скачать 0.65 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|