Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор В. В. Мефодьев Тюмень 2016
жүктеу/скачать 2.68 Mb. Pdf көрінісі
|
| v
c m m . Интегральная подвижность сперматозоидов в суспензии m=m(t) для контрольного и опытного образцов измерялась за период времени, пока ее величина не станет близкой к нулю. Подвижность суспензии сперматозоидов измерялась анализатором токсичности АТ-05 фирмы БМК-Инвест, (г. Москва), включающим в себя компьютеризованный измерительный блок, анализирующий микроскопические видеоизображения суспензии сперматозоидов, и блок пробоподготовки. Измерения проводили согласно инструкции фирмы- изготовителя. Показателем биологического действия явился индекс токсичности (I t ), равный процентному отношению средневзвешенного времени подвижности суспензии клеток в исследуемой среде к средневзвешенному времени подвижности суспензии клеток в контроле. Количественная оценка параметра тест-реакции определялась индексом токсичности «I», представляющим собой отношение суммарной двигательной активности сперматозоидов опытной и контрольной проб, выраженное в процентах. Величина индекса токсичности, гарантирующая безопасность, находилась в интервале от 70 до 120%. 126 Расчет вели до цикла, в котором количественное содержание сперматозоидов было не менее 10% от первоначального значения двигательной активности. Прибор в заданном режиме (в соответствии с программным обеспечением) обсчитывал значение токсичности испытуемого образца. Интегральная оценка подвижности сперматозоидов (S. ср.) в опыте по трем проведенным испытаниям и 23 циклам составила 5570,2±10,0; 5572,4±10,0; 5572,4±10,0 у.е. против 4910,8±14,5; 4924,4±14,6; 5230,5±8,0 у.е. – в контроле. В результате статистической обработки данных установлено, что подвижность сперматозоидов в контроле и эксперименте практически не отличалась (р >0,05). Оценку результатов испытаний осуществляли путем сравнения полученных значений индексов токсичности исследуемых образцов (экстракт марит O. felineus) и допустимого интервала индекса токсичности. Полученные по трем завершенным циклам индексы токсичности составили 75,6%; 78,2%; 78,3% соответственно (рисунок 5.1, таблица 5.1) Условные обозначения: Контроль Опыт Рисунок 5.1. - Кривая интегральной подвижности сперматозоидов в растворе экстракта сухих марит O. felineus и контроле 1500 1200 900 600 300 0 0 5 10 20 25 30 15 у.е мин 127 Таблица 5.1 Экспериментальные данные по оценке подвижности сперматозоидов крупного рогатого скота в растворе экстракта высушенных на воздухе нативных марит O. felineus (опыт) и в изотоническом фильтрате модельной среды (контроль) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Цикл Кн Кн Кн Кн Кн Оп Оп Оп Оп Оп 1 1405 1482 1797 1190 1593 1350 1408 1310 1801 2068 2 1145 1150 1400 1150 1233 1265 1275 1154 1550 1654 3 1042 851 1169 831 946 1116 1205 967 1328 1517 4 810 537 805 658 732 907 1036 898 1027 1012 5 567 422 621 607 538 669 765 705 660 597 6 410 299 424 396 449 575 471 398 524 496 7 308 194 302 273 335 375 344 289 254 365 8 270 159 328 254 272 253 163 138 100 233 9 202 146 251 202 205 73 56 162 76 132 10 134 94 206 162 155 52 7 23 55 50 11 115 67 136 138 111 32 31 14 20 27 12 92 55 117 97 115 8 15 8 15 17 13 77 50 107 55 89 16 10 1 16 8 14 53 25 75 63 80 36 2 2 9 2 15 44 28 52 37 74 37 6 0 6 0 16 37 15 69 23 62 7 3 2 8 0 17 35 23 44 16 40 10 2 2 5 0 18 28 4 33 22 31 7 3 0 4 0 19 16 1 38 20 23 8 12 0 3 0 20 14 0 24 14 24 4 0 0 4 0 21 7 0 18 4 26 2 0 0 1 0 22 7 4 16 4 14 1 0 0 4 1 23 8 2 7 3 6 1 0 0 0 0 t ср. 33,7 30,0 37,2 34,4 37,5 28,7 26,4 26,5 26,8 27,3 S 4915 3699 5819 4755 5366 5328 5371 4818 5861 6473 128 Обозначения: Оп – опыт (5); Кн – контроль (5); t ср. – средневзвешенное значение времени подвижности (у.е.); S – суммарная подвижность. Это указывало на то, что его величины находились в интервалах, гарантирующих безопасность (от 70 до 120%), вследствие чего испытуемый образец можно отнести к 4-му классу малоопасных соединений, не обладающих раздражающим действием. Для определения возможного влияния метаболитов, содержащихся в экстракте высушенных марит O. felineus, зерна овса (Avena sativa L.) высаживали в стаканы емкостью 200,0 мл со стандартным почвогрунтом при температуре плюс 24ºС и умеренном естественном освещении. Полив семян осуществлялся регулярно водопроводной водой по 50 мл (контроль) и экстрактом марит O. felineus (опыт). Наблюдения проводили в течение 27 сут., измеряя высоту ростков овса. На 5-е сут. наблюдения высота ростков овса, поливаемого экстрактом марит O. felineus, равнялась 9,0±2,031 мм; в то время как в контроле всхожести семян овса не наблюдалось. Первые ростки в контроле появились на 6-е сутки, величина которых была в пределах 4,0±0 мм. Как показывают результаты, темпы прироста в опыте, особенно в период всхожести семян, были выше, чем на 200%. Опережение в росте растений в эксперименте наблюдалось в период всего срока наблюдения, его максимальное значение (681,3%) отмечалось на 6-е сут с постепенным понижением на 27-е сут эксперимента. Таким образом, впервые полученные экспериментальные данные на модели репродуктивных клеток свидетельствуют о том, что мариты O. felineus не обладают выраженным токсическим действием на животные и растительные клетки, однако обладают выраженным ростстимулирующим эффектом. Это позволяет пересмотреть сложившиеся представления о патогенезе описторхозной инвазии и признать приоритетную роль метаболитов в инициации и течении патологических процессов преимущественно продуктивного (пролиферативного) характера. |