Диссертация на соискание ученой степени кандидата

После обработки сотовые рамки помещали в продезинфицированные ульи, заполняя весь объем, накрывали крышками, закрывали летки и выдерживали заданную экспозицию.

Разницы в эффективности полностью заполненных раствором Монклавита-1 сотов и сотов, подвергшихся только опрыскиванию, не установлено. Это позволило рекомендовать метод опрыскивания из мелкодисперсного распылителя для дезинфекции сотов с помощью дезинфектанта Монклавит-1. Оптимальные режимы обобщены и представлены в таблице 8.

Таблица 8. Эффективные режимы дезинфекции ульев и сотов

Монклавитом-1 при аскосферозе пчел

Расход дезраствора, мл
Улей				Соты (на 1 шт.)
12-рамоч-ный	12-рамоч-ный с надставкой	лежак (24 рамки)	многокор-пусный	гнездовые	магазинные
500	750	1000	1200	250	125

Согласно полученным данным, оптимальная концентрация дезинфектанта составила 5 %, а экспозиция как для ульев, так и сотовых рамок – 12 ч, для металлических изделий – 24 ч.

Анализ полученных результатов по изучению дезинфицирующей активности Монклавита-1 показал, что данный препарат надежно обеззараживает пчеловодный инвентарь от возбудителя аскосфероза пчел и может быть применен в качестве дезинфектанта.

2.2.3.2. Продолжительность жизни пчел в садках после их обеззараживания препаратом Монклавит-1

Для постановки опытов было подготовлено 6 энтомологических садков, которые поместили внутри улья и обработали Монклавитом-1 по разработанному режиму. По истечении экспозиции дезинфекции садки извлекли, высушили на открытом воздухе, три садка просто проветрили и высушили, а три других сначала промыли водой, а затем просушили. После этого в каждый садок поместили по 50 одновозрастных (1-2 суток) пчел. Параллельно в 3 садках, не подвергшихся дезинфекции, содержали контрольных пчел, отобранных из тех же семей. На протяжении всего эксперимента пчелам давали сахарный сироп, приготовленный 1:1. Садки с опытными и контрольной группами были помещены в термостат при температуре 30 ⁰С и относительной влажности 70-75 %.

Состояние и поведение пчел, их активность, количество погибших особей учитывали в течение периода, когда в садке оставалась половина пчел, первоначально отобранных для опыта, и сравнивали с показателями контрольной группы.

Среднюю продолжительность жизни вычисляли по формуле:

Пж = (а₁+ а₂ + а₃ + ……… а_n) / Н,

где Пж – продолжительность жизни пчел;

а₁+ а₂ + а₃ + ……… а_n – количество живых пчел, после 1, 2, 3, 4 и т.д. суток;

Н – количество первоначально взятых пчел.

Результаты исследований, представленные в таблице 11, показали, что обработка садков препаратом Монклавит-1 с последующим проветриванием и промыванием не оказывала отрицательного влияния на поведение и продолжительность жизни пчел.

Обработка садков даже без последующего промывания не привела к снижению уровня продолжительности жизни опытных пчел, которая оставалась во всех опытах 32+1,3 суток (табл.9).

Таблица 9. Влияние продезинфицированных препаратом Монклавит-1

энтомологических садков на продолжительность жизни пчел

На основании результатов лабораторных и пасечных исследований можно сделать следующие выводы.

• 
  Монклавит-1 обладает фунгицидной и фунгистатической активностью в отношении грибов рода Ascosphaera.
  
• 
  5 %-ный раствор Монклавита-1 применяется методом опрыскивания из мелкодисперсного распылителя в дозе 0,5 л на улей типа Дадана-Блатта, 1 л на улей-лежак, 1,2 л на многокорпусный улей (4-корпусный), 0,25 л на стандартную (435х300 мм) корпусную и 0,125 л на магазинную (435х145 мм) сотовые рамки при экспозиции 12 часов.
  
• 
  Металлический инвентарь обеззараживается 5 %-ным раствором Монклавита-1 с экспозицией 24 часа.
  
• 
  Монклавит-1 при разработанной схеме применения не оказывает отрицательного воздействия на взрослых пчел.
  

2.2.3.3. Производственные испытания Монклавита-1 в

качестве дезинфектанта при микозной инфекции пчел
Положительные результаты лабораторных и пасечных опытов позволили провести испытания разработанного режима дезинфекции в производственных условиях. Необходимо было:

• 
  установить степень эффективности обеззараживания контаминированного грибом Ascosphaera apis пчеловодного инвентаря препаратом Монклавитом-1 при аскосферозе пчел;
  
• 
  изучить влияние продезинфицированных объектов на пчел, маток и выращивание расплода.
  

Перед дезинфекцией ульи и планки рамок сотов подвергали тщательной механической очистке, а затем обрабатывали 5 %-ным раствором Монклавита-1 методом опрыскивания из садового распылителя АО-1 при давлении 4 атм из расчета 500 мл на улей типа Дадана и 250 мл на магазинную надставку с предварительным разбором комплектующих деталей ульев, если они были разборными. Дезраствор наносили на стенки, донья, подкрышники и внутренние стенки крышки ульев с расстояния 30-35 см от распылительной головки. Затем, если ульи были разборными, их собирали и закрывали летки задвижками.

На сотовые рамки, установленные на металлических поддонах, препарат наносили с расстояния 25-30 см сначала с одной, затем с другой стороны, расходуя на каждую сотовую рамку по 250 мл дезинфектанта. Затем сотовые рамки ставили в обработанные ульи, закрывали крышками и выдерживали 12 ч. Контрольные ульи и соты были обработаны стерильной дистиллированной водой.

Через 12 ч ульи и соты проветривали и делали смывы с их поверхностей.

При лабораторных исследованиях смывов возбудителей аскосфероза пчел в опытных ульях и сотах не выявлено. В смывах с контрольных ульев и сотов отмечен рост возбудителя. После взятия смывов одну часть обеззараженных ульев и сотов промывали водой из расчета 1 л на один улей и 1 л на одну сотовую рамку. Другую часть использовали без промывания. Воду из ячеек удаляли путем центрифугирования в медогонках. После чего их просушивали в течение 24-48 ч.

В продезинфицированные и просушенные ульи и сотовые рамки перегоняли пчелиные семьи, подобранные по принципу аналогов по массе пчел, возрасту маток, числу сотов, типу улья, с одинаковыми условиями медосбора. Опыты сопровождались контрольными группами. Одна группа – здоровые семьи. Их помещали в чистые, продезинфицированные ульи и соты, другая группа – семьи, пораженные аскосферозом, заселяли в непродезинфицированные ульи.

В общей сложности в опыте было занято 5 групп по 14 пчелиных семей в каждой. 1 и 2-я группы – больные семьи, которые перегнали в чистые, продезинфицированные, промытые водой ульи и соты; 3-я группа – больные семьи перегнали в чистые, продезинфицированные ульи и соты без промывания; 4-я группа – больные семьи перегнали в чистые, без дезинфекции ульи и соты; 5-я группа - здоровые семьи перегнали в чистые, продезинфицированные ульи и соты.

Семьи 1 и 2-й групп отличались друг от друга тем, что семьи 1-й группы далее лечили нистатином, а семьи 2-й группы не лечили. 3-ю и 4-ю также группы лечили нистатином.

Препарат нистатин вводили в гнездо методом скармливания. Лечебный сироп готовили в день применения из расчета 1 млн. ЕД нистатина на 1 л сахарного сиропа. Скармливали из расчета 100-150 мл лечебного сиропа на одну улочку пчел четырехкратно через каждые 5 суток. В опыте были семьи массой 1,25-1,5 кг.

Учет количества расплода при помощи рамки-сетки стали проводить через 12 суток после начала опыта. Всего проведено четыре учета через каждые 12 суток. Кроме того, исследовали качество засева и время, когда матки приступили к яйцекладке.

Результаты исследований показали, что после перегона семей в другие ульи матки сразу приступили к яйцекладке во всех опытных группах. Пчелы не проявляли беспокойства. Мертвых пчел, выброшенного расплода не установлено.

Таблица 10. Влияние продезинфицированных ульев и сотов

на выращивание расплода (n = 14)

№ группы	Количество печатного расплода, кв.
	Даты учета
	14.05	26.05	07.06	19.06
1	14,4±5,28	52,6±4,88	106,2±22,76	128,8±20,42
2	11,4±3,12	36,4±5,16	74,5±17,22	71,4±12,06
3	12,6±3,12	58,6±12,14	99,4±16,26	130,2±26,84
4	13,0±2,32	68,4±10,66	81,2±12,08	96,2±10,24
5	22,4±5,16*	82,8±12,33*	158,5±22,62**	242,9±26,88**

*/Достоверно выше по сравнению с контролем при Р>0,95

**/ при Р>0,99

***/ при Р>0,999

Результаты исследований, представленные в таблице 10, показали, что количество расплода в 1-й и 3-й группах было приблизительно одинаковым. Выброшенных мертвых пчел, расплода, выкучивания пчел из ульев указанных групп не отмечено. Следовательно, последующее промывание водой после дезинфекции ульев и сотов Монклавитом-1 влияния не имеет и оно излишне.

Установлено, что перегон пчелиных семей на чистые, продезинфицированные ульи и соты недостаточен для выздоровления семей, пораженных аскосферозом. Уже через месяц после перегона (07.06) в пчелиных семьях 2-й группы появились клинические признаки поражения расплода грибом Ascosphaera apis. В семьях отмечены клинические признаки первой степени поражения расплода и только в одной семье зарегистрирована вторая степень поражения.

В семьях 4-й группы также через месяц появились единичные мумифицированные личинки. Это свидетельствует о том, что лечение пчелиных семей без дезинфекции ульев и сотов не освобождает полностью пчелиные семьи от аскосфероза. Количество печатного расплода за все время опыта в 4-й группе было выращено в среднем на 14,1 % меньше, чем в семьях, пересаженных в продезинфицированные ульи и соты (1-я и 3-я группы).

Микологические исследования смывов с внутренних стенок ульев и сотов 1-й и 3-й групп показали отсутствие роста возбудителя аскосфероза.

Лучше всего в течение опыта развивались контрольные здоровые семьи. Количество выращенного расплода было в 1,6 раза больше в сравнении с 1-й и 3-й группами, успешно освободившимися от аскосфероза в первой декаде июня. Посевы со смывов с внутренних стенок ульев и сотов (01.06) у данных групп дали отрицательные результаты.

На основании результатов лабораторных, пасечных и производственных испытаний Монклавита-1 в качестве дезинфектанта при микозной инфекции пчел можно сделать следующие выводы.

Разработан метод дезинфекции ульев и сотов 5 %-ным раствором Монклавита-1 методом опрыскивания из мелколдисперсного распылителя при расходе 500 мл раствора на один 12-рамочный улей (0,8 м²), 250 мл на одну стандартную гнездовую (435х300 мм) и 125 мл на одну магазинную (435х145 мм) сотовые рамки с экспозицией 12 часов. После окончания экспозиции сотовые рамки, ульи высушивают и используют по назначению без промывания.

Условия применения Монклавита-1 100 % обеззараживают контаминированные возбудителем аскосфероза ульи, соты и пчеловодный инвентарь.

Использование продезинфицированных ульев и сотов без последующего промывания водой не оказывает отрицательного влияния на поведение пчел, яйцекладущую способность маток, выращивание расплода и продолжительность жизни пчел.

жизнедеятельности пчелиных семей в условиях защищенного грунта

Анализ литературных данных по уровню эффективности и характеру воздействия остановил наше внимание на пробиотическом препарате БИОД-5 (рабочая версия для пчел – ТАНГ) на основе бактерий рода Bacillus. У пробиотиков на основе бактерий рода Bacillus выявлены иммуномодулирующие, антиаллергические, антитоксические, антирадиационные свойства. Препарат обладает антибактериальной, антимикозной и антивирусной активностью. Установлена высокая ферментативная активность, что положительно воздействует на регулирование и стимулирование пищеварения. Способствует лучшему усвоению кормов и увеличивает приросты животных [110, 115, 136, 144, 148, 161].

В пчеловодстве препарат ТАНГ впервые применен против энтеробактериальных инфекций и европейского гнильца [92-94].

Действующим веществом препарата является смесь бактерий Bacilla subtilis ТПИ 13 и Bacilla licheniformis ТПИ 11 в соотношении 3:1. Разработаны препаративные формы БИОД-5 в виде порошка, таблеток, растворов. Для пчеловодства более эффективен препарат в форме порошка и таблеток.

Хорошие результаты, полученные при лечении бактериальных болезней расплода и взрослых пчел, а также резкое улучшение состояния пчелиных семей после скармливания им пробиотика позволили нам испытать ТАНГ для стабилизации жизнедеятельности пчелиных семей в условиях защищенного грунта.
2.2.4.1. Разработка условий применения ТАНГА

в условиях защищенного грунта

Результаты исследований показали, что уже на следующий день после подкормки отмечено повышение активности пчел во всех группах, получающих препарат ТАНГ. Матки работали, как и прежде, не прекращая яйцекладку.

Через 1,5 месяца после начала опыта (18.04) масса пчелиных семей в контрольной группе снизилась на 42 % (табл.11). В первой группе снижение произошло на 21,7 %, то есть в 1,9 раза меньше в сравнении с контролем.

Во второй группе масса пчелиных семей в сравнении с исходной сократилась лишь на 6,5, в третьей – на 5,6 %. Это стало возможным за счет стабильного выращивания расплода в семьях, получающих подкормки с препаратом ТАНГ (табл.11). В первой группе для получения указанного эффекта пчелы затрачивали больше усилий в сравнении со второй и третьей группами.

пчелиных семей в условиях защищенного грунта (n = 5)