Допинг контроль. Лабораторная экспресс-диагнос-тика бета-адреномиметиков. Кленбутирол. Сальбутамол. Сальметерол
жүктеу/скачать 6.12 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Улучшения в скрининге стероидов в допинг-контроле с особым акцентом на аналитические условия ГХ-МС и валидацию метода Структурные формулы исследуемых веществ
- Оборудование и условия
Определены:
Улучшения в скрининге стероидов в допинг-контроле с особым акцентом на аналитические условия ГХ-МС и валидацию метода Структурные формулы исследуемых веществ Оборудование и условия Газовый хроматограф Hewlett Packard (Пало-Альто, Калифорния, США) (серия 6890), оборудованный автоматическим пробоотборником 7673 л.с. в сочетании с квадрупольным масс-спектрометром (MS), Agilent (сеть MS 5973). Газ-носитель представлял собой гелий 1 мл мин -1 HP-1 капиллярная колонка (100% метилсилоксан, 17 м, внутренний диаметр 0,20 мм, толщина пленки 0,11 мкм). Температура инжектора составляла 280 ºC. Режим впрыска: сплит 1/10, импульсное давление 50 фунтов / кв. Дюйм / 0,80 мин. Объем впрыска 3 мкл; постоянный поток 1 мл мин -1 . 2 мл мочи + 750 мл 0,8 мл фосфатного буфера с рН=7,0 +25 мл внут.стандата +50 мл β-глюкуронидазы из E.Coli Гидролиз при 50⁰С в течение 1 часа + подщелачивание вытяжки 500 мл 20% раствора карбоната калия рН=9,0 Экстракция с 5 мл ТБМЭ Перемешивание на шейкере 5 мин +центрифугирование при 3000 об/мин 5 мин Органическую фазу переносят в другую стеклянную пробирку с завинчивающейся крышкой (100 х 16 мм) и упаривают досуха в атмосфере азота при 40 ° С. Остатки высушивают в эксикаторе над P 2 O 5 / КОН в течение по меньшей мере 40 мин перед дериватизацией. Дериватизация до анализа ГХ-МС Перед анализом ГХ-МС были получены производные N, O-TMS и O-TMS. Высушенные остатки хранили в эксикаторах, содержащих P 2 O 5 / KOH, в течение 20 минут. Затем остаток растворяли в 100 мкл MSTFA-NH 4 I-этантиола (1000: 2: 6, об / м / об) и нагревали при 60ºC. Три микролитра каждого образца вводили в систему ГХ-МС. Обработка данных Расчеты для определения параметров валидации были выполнены с использованием собственных электронных таблиц, запрограммированных в Excell, связанных с SPSS для окон. 15-20 Эти электронные таблицы выполняют анализ таблиц отклонений для определения точности, точности, качества подгонки, расчета пределов обнаружения и определения, отсутствия подгонки, стабильности при замораживании / оттаивании. Графики калибровки рассчитывали путем взвешенного анализа линейной регрессии (W = 1 / X) на отклики (отношение площади анализируемого вещества к площади ISTD) серии калибровочных образцов в сравнении с соответствующими номинальными концентрациями. жүктеу/скачать 6.12 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|