Г. Г. Щербаков, А. В. Яшин, С. П. Ковалев, С. В. Винникова
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕМОГЛОБИНА
жүктеу/скачать 5.27 Mb. Pdf көрінісі
|
| 2.4.8.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕМОГЛОБИНА Чаще применяется классический ме тод с использованием гемометра Сали (рис. 2.35). Он основан на способности гемогло бина крови, вступающего в реакцию с со ляной кислотой, образовывать солянокис лый гематин, имеющий бурую окраску. Путем разбавления раствора с исследуемой пробой крови до цвета стандартов опреде ляют содержание гемоглобина в грамм процентах — количество граммов гемо глобина в 100 мл крови (г%). Последовательность определения ге моглобина: 1) в градуированную пробирку гемо метра наливают пипеткой раствор соля ной кислоты до метки 3 (30) или 4 (40) (точность необязательна); Рис. 2.35 Набор оборудования для определения гемоглобина по методу Сали: 1 — гемометр Сали; 2 — пипетка для соляной кисло ты; 3 — стеклянная палочка; 4 — мерный капилляр; 5 — часовое стекло для крови. ГЛАВА 2. ЧАСТНАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА 83 2) перемешивают цитратную кровь в пробирке или часовом стекле (особенно тщательно кровь лошади, эритроциты ко торой быстро оседают); 3) набирают в капилляр кровь до мет ки или несколько выше ее; 4) тщательно протирают наружную поверхность капилляра ватой; 5) уравнивают столбик крови в капил лярах точно по метке путем кратковре менных прикосновений конца капилля ра к комочку ваты; 6) опускают капилляр в пробирку с соляной кислотой и выдувают кровь на дно пробирки, не допуская образования пузырьков воздуха; 7) приподнимают конец капилляра в светлый слой соляной кислоты и 2–3 раза промывают его внутренний просвет свет лым раствором кислоты; 8) извлекают капилляр из пробирки, 4–5 раз промывают его просвет дистил лированной водой, налитой в стаканчик, выдувают оставшуюся в капилляре воду на комочек ваты и кладут капилляр в ко робочку гемометра; 9) вращательным движением пробир ки между ладонями рук перемешивают ее содержимое до однородной массы; 10) ставят пробирку на штатив не ме нее чем на 5 мин (гемолиз эритроцитов и реакция гемоглобина с кислотой требу ют времени); 11) пипеткой вносят в пробирку 3–5 капель раствора соляной кислоты; 12) перемешивают содержимое стек лянной палочкой путем ее вращения (вер тикальным движением палочки можно выбить дно у пробирки); 13) далее разбавляют содержимое про бирки, внося раствор соляной кислоты по каплям, до цвета стандартов, перемеши вая содержимое пробирки после каждой капли. Сравнивая цвет раствора в пробирке со стандартами, палочку извлекают по стенке, а пробирку поворачивают делени ем в сторону. Палочку держат между паль цами, не допуская стекания с нее раство ра на руки или на стол. Содержание гемоглобина (табл. 2.5) отсчитывают по нижнему мениску жид кости. Для перевода показателей из г% в единицы Сали показатель г% умножают на коэффициент 6; при переводе показа телей содержания гемоглобина из единиц Сали в г% их делят на коэффициент 6. На пример, 12 г% гемоглобина равны 72 еди ницам Сали (12 × 6); 66 единиц Сали рав ны 11 г% (66 : 6). Проверка точности определения: в пробирку вносят еще одну каплю раство ра соляной кислоты и перемешивают ее содержимое палочкой. Если раствор стал светлее цвета стандартов, значит, опре деление было проведено правильно и эта дополнительная капля была лишней. Учеными Г. В. Дервиз и А. И. Воро бьевой разработан метод количественно го определения гемоглобина посредством фотоэлектрокалориметра (ФЭКМ), при веденный в журнале «Лабораторное де ло» (1959. № 3). Определение гемоглобина производит ся и фотоэлектрическими приборами. 1 2 3 4 5 6 2 7 89 7 жүктеу/скачать 5.27 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|