- Для обезвреживания токсинов применяют следующие методы:
- Длительное выдерживание (3–5 нед.) токсина в 0,3–0,5 % растворе формалина при температуре 39–40ºС (метод Рамона).
- Использование окислителей (перекись водорода, тиазиновые и фталеиновые красители) при облучении видимым светом.
- Обработка протеолитическим ферментами (трипсином, папаином, проназой) при температуре 40–60ºС с последующей гель-фильтрацией на колонках с сефадексом для удаления фермента из препарата.
Анатоксины - Полученный анатоксин вводят в организм вместе с адъювантами. Белковый антиген адсорбируют на геле алюминия гидроксида или алюминия фосфата.
- В качестве консервантов препараты содержат 0,01 % раствор мертиолата или 0,25 % раствора фенола.
- Анатоксины, применяемые для вакцинации: дифтерийный анатоксин, адсорбированный; столбнячный анатоксин, адсорбированный; стафилококковый анатоксин адсорбированный и др.
- Установлены закономерности между морфологией и проявлением токсигенной активности штамма Clostridium tetani: большее количество токсина образуют S-формы колоний и штаммы, утратившие способность образовывать споры.
После максимального накопления токсина двойную фильтрацию культуральной жидкости и получают стерильный нативный раствор, который обезвреживают 0,4 % формалином при 38 ºС в течение 21–25 сут. Принято считать, что реакция формальдегид – белок состоит из 2 стадий: - быстрая стадия: взаимодействие свободных аминогрупп с формальдегидом и образование метилоламинных групп;
- в реакции участвуют активные радикалы циклических аминокислот (тирозина, аргинина, гистидина и триптофана).
Особенности получения бактериальных анатоксинов - Процесс детоксикации бактерийных токсинов протекает неравномерно.
- В течение первых 4 сут. отмечается падение токсичности на 80–90 %, хотя биологическая безвредность достигается только спустя 2–4 нед. детоксикации.
- При детоксикации происходят 2 процесса: собственно детоксикация препарата и стабилизация структуры молекулы антигена с образованием жестких связей и появлением всего комплекса свойств анатоксинов.
- Эти два процесса идут с разными скоростями, что зависит от свойств и количества присутствующих балластных белков.
Достарыңызбен бөлісу: |