Инструкция по применению. Комплект vk 48 480 тестов

СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ

Для анализа используют образцы сывороток или плазмы. Следует убедиться в том, что образцы сыворотки для анализа отбираются из полностью свернувшейся естественным образом крови. Перед постановкой образцы следует осветлить центрифугированием. Хранить образцы при 2-8 ^ОС в течение 7 дней. Образцы не проанализированные в течение этого времени следует отделить от сгустка или осадка клеток и хранить при температуре –15 ^ОС или ниже. Не допускать многократного замораживания и оттаивания! Можно анализировать образцы плазмы, взятые в присутствии ЭДТА, цитрата натрия или гепарина.

Хранить раствор можно в течение 2 дней при температуре 15-25 ^ОС или 2-8 ^ОС, однако раствор необходимо выбросить если образовались кристаллы. Приготовленный рабочий раствор субстрата взаимозаменяем с аналогичным буфером других серий Мюрекс анти-HCV.

1. 
   Отобрать необходимое количество стрипов. Оставшиеся стрипы положить в пластиковый пакет с защелкой вместе с пакетом силикогеля и хранить при 2-8 ^ОС.
   
2. 
   Стрипы, предназначенные для проведения анализа, а также все реагенты и образцы выдержать для достижения ими температуры 18-20 ^ОС.
   
3. 
   Приготовить рабочий раствор конъюгата (раствор 1), рабочий раствор субстрата (раствор 2), отмывающий буфер (раствор 3) и стоп-реагент (раствор 4).
   
4. 
   Внести в каждую лунку по 180 мкл буфера для разведения образцов. Буфер для разведения образцов и контролей – жидкость зеленовато-коричневого цвета.
   
5. 
   Внести в лунки по 20 мкл исследуемых образцов. Если используется два стрипа или меньше, внесите пипеткой один отрицательный контроль в лунку А1 и один положительный контроль в лунку В1. Если используется больше двух стрипов, рекомендуется использовать две лунки отрицательного контроля. Внесите контроли в обозначенные лунки на каждом планшете после внесения образцов. Использование белого фона будет способствовать зрительному контролю факта добавления образцов. Образцы и контроли должны быть тщательно смешаны с буфером для разведения образцов путем 4-х кратного пипетирования содержимого лунок. Альтернативно, для достижения адекватного перемешивания в лунках используйте шейкер при 800 об/мин в течение 30 секунд (используйте новый наконечник для каждого нового образца или контроля). При внесении образцов цвет раствора меняется на сине-зеленый.
   
6. 
   Накрыть планшет крышкой и инкубировать 1 час при 37-38^ОС во влажных условиях (влажная камера). Влажной камерой может служить чистый полиэтиленовый пакет, в который вложен смоченный водой кусок фильтровальной бумаги или ткани. Не уменьшайте рекомендуемое время инкубирования.
   
7. 
   Отмывание планшета.
   

• 
  Автоматическим вошером. Выполняйте 5 циклов, используя отмывающий буфер. Убедитесь, чтобы:
  
  1. 
     объем наполнения составлял 500 мкл на лунку при использовании вошеров, поставляемых Мюрекс. При использовании других вошеров убедитесь, что лунки полностью заполнены;
     
  2. 
     положение заполняющих игл было такое, чтобы полностью заполнить лунки не приводя к переливу;
     
  3. 
     время, необходимое для полного выполнения одного цикла отмывки (аспирация/отмывка/замачивание) составляло примерно 30 сек;
     
  4. 
     следите, чтобы в лунке не оставалось жидкости (с помощью этапа двойного осушения на конечном этапе, если это возможно).
     
• 
  Отмывание вручную.
  

1. 
   аспирируйте жидкость из первого ряда полностью;
   
2. 
   полностью заполните лунки этого ряда отмывающим буфером;
   
3. 
   повторите эту процедуру для каждого ряда лунок;
   
4. 
   убедитесь, чтобы каждый ряд лунок оставался в заполненном состоянии в течение 30 сек;
   
5. 
   повторить пункты а-d еще четыре раза;
   
6. 
   аспирировать содержимое лунок. Рекомендуется лунки перевернуть и отстучать насухо о бумежное полотенце или ткань после последней отмывки.
   

8. 
   Добавить в каждую лунку по 100 мкл рабочего раствора конъюгата. Избегать касания или забрызгивания ободка лунки конъюгатом. Не выдувайте остатки раствора конъюгата из наконечника. Рекомендуется обратное пипетирование. Избегать перекрестного загрязнения реагентов. Рекомендуется использование отдельной пипетки для внесения раствора конъюгата, которая должна быть маркирована соответствующим образом.
   
9. 
   Закрыть планшет крышкой и инкубировать во влажных условиях 30 мин при 37-38^ОС (см. п.6).
   
10. 
    Отмыть планшет (см. п.7).
    
11. 
    Внести в каждую лунку по 100 мкл раствора субстрата. Рекомендуется использование отдельной пипетки для внесения рабочего раствора субстрата, которая должна быть маркирована соответствующим образом.
    
12. 
    Закрыть планшет крышкой и инкубировать 30 мин при 37-38^ОС. В лунках с реактивными образцами появляется синее окрашивание.
    
13. 
    Добавить в каждую лунку по 50 мкл стоп-реагента. При этом цвет лунок с положительными образцами переходит в оранжевый, а цвет лунок с отрицательными образцами остается розовым.
    

1. 
   В течение 15 мин измерить с помощью ридера оптическую плотность (ОП) в каждой лунке при длине волны 450 нм, используя волну из диапазона 620 нм / 690 нм в качестве референсной. Прибор бланкировать по воздуху. Подсчитать среднюю величину ОП для лунок с отрицательным контролем. Подсчитать критическую величину: добавить 0,600 к среднему значению ОП отрицательного контроля.
   

2. 
   Среднее значение ОП_(К-) -должно быть меньше 0.250
   ОП_(К+) должна быть больше значения ОП_(К-) на 0.800
   

3. Образцы, ОП₄₅₀ которых превышает значение ОП_крит, рассматриваются как первоначально положительные. Такие образцы должны быть перетестированы в двух повторах с использованием исходного материала. Образцы, которые остаются положительными, по крайней мере, в одном из двух повторов, рассматривают как повторно положительные и считают, что они содержат антитела к антигенам HCV.

Рекомендуется классифицировать образцы со значением ОП₄₅₀ >ОП_(К-) + 0.300, но < ОП_крит. или < ОП_(К-) + 0.600 (серая зона), как погранично положительные. Погранично положительные образцы должны быть перетестированы повторно. Если погранично реактивные результаты повторяются, или если получены противоречивые результаты, необходимо тестировать образцы с использованием тест-системы другого производителя или в подтверждающем тесте:

• 
  если получен положительный результат при использовании тест-системы другого производителя или в подтверждающем тесте, то считается, что сыворотка содержит антитела к HCV антигенам;
  
• 
  если значение ОП₄₅₀ образца остается в серой зоне, или, если получены противоречивые результаты, то донор или больной, чья кровь исследовалась, в дальнейшем нуждается в наблюдении врача.
  

• 
  Перед началом анализа все реактивы и пробы выдержать некоторое время при комнатной температуре 18-25 ^ОС.
  
• 
  Если планшет не используется полностью в одном опыте, оставшиеся стрипы следует хранить в прилагаемом полиэтиленовом пакете с защелкой при температуре 2-8 ^ОС.
  
• 
  Очень важно обеспечить тщательное смешивание в лунках контрольных и исследуемых проб с буфером. Адекватное смешивание достигается с помощью автоматической пипетки путем насасывания и выпускания жидкости не менее 4 раз или с помощью шейкера.
  
• 
  Нельзя допускать подсыхания лунок в процессе работы.
  

Тест-система выпускается в виде упакованного в коробку комплекта, рассчитанного на проведение 480 анализов.

Срок годности тест-системы 12 месяцев. Набор с истекшим сроком годности хранению не подлежит.

Тест-систему хранят при температуре 2 – 8 ^ОС и относительной влажности не более 60%. Транспортирование осуществляют всеми видами крытого транспорта при температуре не выше 10^ОС в условиях, исключающих замораживание.
Рекламации на препарат направлять

в адрес Фирмы Мюрекс Биотех Лтд: Центр роуд,Темпл хилл, Дартфорд, Кент, Англия ДА1 5ЛР, тел. 01322 277711, факс 01322 273288