[Decrease in tumorigenic activity of murine hepatoma cells after treatment with antioxidants and melatonin]

[Decrease in tumorigenic activity of murine hepatoma cells after treatment with antioxidants and melatonin].

We studied the effect of antioxidants such as N-acetylcysteine (NAC, 10 mM) and alpha-lipoic acid (ALA, 1.25 mM) and of the hormone melatonin (1 microM) on the ability of murine hepatoma cells MH22a to develop tumors in syngenic mice (C3HA) after subsutaneous injection. Tumor formation and development slowed down and mouse mortality decreased when the injected cells were pretreated by NAC, ALA or melatonin during 20 h. Melatonin had the most marked effect. Tumors appeared in 100 % cases after 10 days in control mice when untreated cells had been injected; injection of cells pretreated by NAC or ALA resulted in tumor formation only in 40 and 53 % of mice, respectively. When cells were pretreated with melatonin the tumors appeared only in 18-20 days after injection. Until the end of the observation (36 days) 67 % of control mice died, but when the cells were pretreated by NAC or ALA mouse death-rate was 20 and 53 %, respectively. In the case of melatonin we did not observed any dead mice at all. We showed that treatment by antioxidants delayed (NAC) or completely inhibited (ALA) cell cycle of hepatoma cells. Cell cycle was restored after removal of the antioxidants. Melatonin did not change cell cycle phase distribution. We conclude that there is no direct correlation between loss of tumorigenic properties and changing of proliferative activity of hepatoma cells. Different mechanisms of antioxidants and melatonin action resulting in transient tumor phenotype normalization are discussed.

[ Снижение онкогенного активности мышиных клетках гепатомы после лечения антиоксидантами и мелатонина ] .
[ Статья на русском языке ]
Филатова Н.А., Кирпичникова К.М., Аксенов Н.Д., Vakhromova Е.А., Гамалеи И.А. .
Мы изучали влияние антиоксидантов, таких как N- ацетилцистеина ( NAC , 10 мм ) и альфа-липоевая кислота ( ALA , 1,25 мм) и гормона мелатонина ( 1 мкМ ) на способность мышиных клетках гепатомы MH22a развития опухоли в сингенный мышей ( C3HA ) после subsutaneous инъекции. Образование опухоли и развитие замедляется и смертность мыши уменьшается, когда введенные клетки предварительно НАК , ALA или мелатонина в течение 20 часов. Мелатонин был самый заметный эффект . Опухоли появился в 100 % случаев после 10 дней в контрольных мышей , когда необработанные клетки были вводили ; инъекция клеток , предварительно обработанных НАК или ALA привело к образованию опухоли только в 40 и 53% мышей , соответственно. Когда клетки предварительно обрабатывали мелатонина опухоли появились только в 18-20 дней после инъекции. До конца наблюдения ( 36 дней) 67% контрольных мышей не умер , но, когда клетки предварительно НАК или ALA мыши смертность составила 20 и 53% соответственно . В случае мелатонина мы не наблюдали никаких мертвых мышей вообще. Мы показали , что лечение с помощью антиоксидантов задержанных (NAC) или полностью ингибирует (ALA) клеточный цикл клеток гепатомы . Клеточного цикла была восстановлена ​​после удаления антиоксидантов. Мелатонин не изменить фазовое распределение клеточного цикла . Мы пришли к выводу , что нет прямой связи между потерей онкогенных свойств и изменения пролиферативной активности клеток гепатомы . Обсуждаются различные механизмы антиоксидантов и мелатонина действиях, приводящих к временной фенотипа опухоли нормализации .
ВЛИЯНИЕ МЕЛАТОНИНА НА ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ТРАНСФОРМИРОВАННЫХ КЛЕТОК

В экспериментах in vitro изучали действие мелатонина (1 мкМ) на чувствительность мышиных трансформированных фибробластов 3T3-SV40 и клеток мышиной гепатомы МГ22а к литическому действию естественных киллерных клеток (ЕКК). Изменение туморогенных свойств клеток МГ22а после того же воздействия изучали в экспериментах in vivo. Показали, что после 24-часового действия мелатонина чувствительность к действию ЕКК клеток обеих линий уменьшалась в 4 раза, и значение их цитотоксического индекса приближалось к значению нормальных клеток, нечувствительных к действию ЕКК. Возникновение и развитие опухолей после трансплантации сингенным мышам клеток МГ22а, предварительно обработанных в течение 24 ч мелатонином, замедлялось, а смертность мышей уменьшалась. Оба исследованных эффекта мелатонина обратимы. Через 24 ч после удаления мелатонина клетки по исследованным параметрам не отличались от интактных, не подвергавшихся действию мелатонина. Показали, что мелатонин не изменял распределения клеток по фазам клеточного цикла, что свидетельствует о неизменности скорости пролиферации клеток. Обсуждаются различные механизмы действия мелатонина на трансформированные клетки, приводящие к временному изменению их фенотипа в сторону нормального.

Авторы:

Гамалей И.А.
Кирпичникова К.М.
Филатова Н.А.

Издание: Вопросы онкологии

Melatonin exerts by an autocrine loop antiproliferative effects in cholangiocarcinoma: its synthesis is reduced favoring cholangiocarcinoma growth.

Cholangiocarcinoma (CCA) is a devastating biliary cancer. Melatonin is synthesized in the pineal gland and peripheral organs from serotonin by two enzymes, serotonin N-acetyltransferase (AANAT) and acetylserotonin O-methyltransferase (ASMT). Cholangiocytes secrete neuroendocrine factors, including serotonin-regulating CCA growth by autocrine mechanisms. Melatonin exerts its effects by interaction with melatonin receptor type 1A/1B (MT1/MT2) receptors. We propose that 1) in CCA, there is decreased expression of AANAT and ASMT and secretion of melatonin, changes that stimulate CCA growth; and 2) in vitro overexpression of AANAT decreases CCA growth. We evaluated the 1) expression of AANAT, ASMT, melatonin, and MT1/MT2 in human nonmalignant and CCA lines and control and CCA biopsy samples; 2) melatonin levels in nonmalignant and CCA lines, and bile and serum from controls and patients with intrahepatic CCA; 3) effect of melatonin on the growth and expression of AANAT/ASMT and MT1/MT2 in CCA lines implanted into nude mice; and 4) effect of AANAT overexpression on the proliferation, apoptosis, and expression of MT1/MT2 in Mz-ChA-1 cells. The expression of AANAT, ASMT, and melatonin decreased, whereas MT1/MT2 expression increased in CCA lines and biopsy samples. Melatonin secretion decreased in the supernatant of CCA lines and bile of CCA patients. Melatonin decreased xenograft CCA tumor growth in nude mice by increased AANAT/ASMT and melatonin, along with reduced MT1/MT2 expression. Overexpression of AANAT in Mz-ChA-1 cells inhibited proliferation and MT1/MT2 expression and increased apoptosis. There is dysregulation of the AANAT/ASMT/melatonin → melatonin receptor axis in CCA, which inhibited melatonin secretion and subsequently enhanced CCA growth.

Мелатонин оказывает на аутокринным петель антипролиферативных эффектов в холангиокарцинома : его синтез снижается в пользу роста Холангиокарцинома .
Хан Y , Demorrow S , Invernizzi P , Цзин Q , Глейзер S , Рензи, Мэн F , Вентер J , Bernuzzi F , Белый M , Фрэнсис H , Lleo, Marzioni М, Onori P , Альваро D , Torzilli G , Gaudio E , Alpini Г.
Холангиокарцинома (ОСО ) является разрушительной желчных рак . Мелатонин синтезируется в шишковидной железе и периферических органов от серотонина двумя ферментами , серотонина N- ацетилтрансферазы ( AANAT ) и acetylserotonin О-метилтрансферазы ( ASMT ) . Холангиоцитах выделяют нейроэндокринные факторы, включая серотонин - регулирующей рост CCA по аутокринных механизмов . Мелатонин оказывает свое действие при взаимодействии с типа мелатонин рецепторов 1A/1B ( MT1/MT2 ) рецепторов. Мы полагаем, что 1) в ОСО , есть снижение экспрессии AANAT и ASMT и секрецию мелатонина , изменения , которые стимулируют рост CCA , и 2) избыточная экспрессия в пробирке AANAT уменьшается рост CCA . Мы оценили 1 ) выражение AANAT , ASMT , мелатонин , и MT1/MT2 в человека доброкачественных и ОСО линий и контроля и образцов биопсии ОСО , 2) уровней мелатонина в доброкачественных и ОСО линий и желчи и сыворотке от контроля и пациентов с внутрипеченочной ОСО ; 3) эффект мелатонина на рост и выражение AANAT / ASMT и MT1/MT2 в ОСО линий , имплантированных в голых мышей и 4) эффект AANAT избыточной экспрессии на пролиферацию , апоптоз и выражения MT1/MT2 в MZ- Ча- 1 клеток . Выражение AANAT , ASMT , и мелатонин уменьшается, в то время как выражение MT1/MT2 увеличился в ОСО линий и образцов биопсии . Секреции мелатонина уменьшается в супернатанте ОСО линий и желчи больных ОАС . Мелатонин снизилась ксенотрансплантата CCA рост опухоли в голых мышей повышенной AANAT / ASMT и мелатонина , наряду с пониженной экспрессией MT1/MT2 . Сверхэкспрессия AANAT в Mz -ча- 1 клеток ингибирует пролиферацию и экспрессию MT1/MT2 и увеличение апоптоза. Существует нарушение регуляции в AANAT / ASMT / мелатонина → мелатонина оси рецепторов в ОСО , который ингибирует секрецию мелатонина и впоследствии усиленный рост CCA .

Oncol Res. 2011;19(6):259-63.