Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии умкд, стоматология

Пассивный метод- опрос, объяснение.

Активный метод (Выполнение и обсуждение практических работ, оформление протоколов. работа с мультимедийными базами данных, компьютерными моделями и программами.)

Время проведения рубежных контролей и консультаций по расписанию.

1. 
   Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. - М.: МИА, 2001.- 734 с.
   
1. 
   Табаева А.А. Микробиология поражений полости рта при стоматологических и инфекционных заболеваниях. Учебное пособие. – Алматы, 2006. -127с
   
2. 
   Медициналық микробиология, Алматы, 2011.-683б Рамазанова Б.А, Кудайбергенұлы К.К редакциялаумен.
   
3. 
   Ричард Дж.Ламонт., Роберт А.Берне., Мерилин С.Лантц., Дональд Дж.Лебланк., перевод с английского В.К. Леонтьева. Микробиология и иммунология для стоматологов. Практическая медицина. Москва 2010.- 502с.
   
4. 
   Jacquelyn G Black “Microbiology”,7 ^th ,WILEY,2010,p.846
   

1.Вопросы общей вирусологии, под ред. Кисилева И.О. Санкт- Петербург, 2007, 375 с.

2. Б.А. Рамазанова, А.Л. Котова және т.б. Микроорганизмдер морфологиясы.(оқу- әдістемелік құрал) Алматы,2007, 131б.

3 Б.А. Рамазанова, К.К Құдайбергенұлы, А.Л Котова. Инфекция туралы ілім.(оқу-құралы) Алматы 2007,111 б .

4. Б.А.Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микроорганизмдер физиологиясы. (оқу - әдістемелік құрал). Алматы,2007, 126 б.

5. Б.А. Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микроорганизмдер экологиясы. (оқу- құралы). Алматы, 2007, 95 б.

6. Б.А. Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микробтарға қарсы қолданылатын препараттар (оқу- құралы) Алматы, 2007.,47 б.

6. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология: Учебник/Л.Б. Борисов. - М.:Мединформ, 2005.-736 с.

7. Поздеев О.К. Медицинская микробиология: Учеб. О.К.Поздеев; под ред. В.И.Покровского.-2-е изд.испр.-М.:ГЭОТАР-МЕД,2004.-768 с

8. Компьютерная программа "Диаморф" - "Медицинская микробиология" - атлас-руководство по бактериологии микологии, протозоологии и вирусоло­гии под редакцией акад. проф. Воробьева А.А.

9. Саттон Д., Фотергил А., Ринальди М. Определитель патогенных и условно-патогенных грибов: Пер. с англ.-М.: М.:Мир, 2001.- 486 с.:ил.

10. Котова А.Л. Клиническая микробиология: Методические указания.-Алматы, 2004.-162 с.

11. Стамкулова А.А., Кудайбергенов К.К., Рамазанова Б.А. Вопросы общей и частной вирусологии, Учебное пособие, 2011, Алматы,

На английском языке:

Основная:

Richard V Georing, Hazel M Docrell, Mark Zukerman, Derek Wakelin, Ivan M Roit, Cedric Mims,Peter L Chiodini “Medical Microbiology”,4^th Edithion, 2008, UK, p.656.

Jacquelyn G Black “Microbiology”,7 ^th ,WILEY,2010,p.846

Patric R Muray,Ken S Rosenthal, Michael F Pfaller “Medical Microbiology”,5^th Edithion, 2008,p.962

Cedric Mims, Hazel M Docrell, Richard V Georing , Ivan M Roit, Derek Wakelin, Mark Zukerman, “Medical Microbiology”,3^th Edithion, 2004, ELSEVIER MOSBY, p.659.

Geo F Brooks,Kaaren C Carroll, Janett S Butel, Stephen F Morse,24^th Edithion, JAWETZ,MELNICK&ADELBERG^S

Mark Gladwin, Bill Trattler, “Clinical Microbiology”, 4^th Edithion, MedMaster, Miami, 2007, p.393.

Дополнительная:

Robert M Diamond “Designing Assessing Courses and Curricula”, 3^th Edithion,Jossey-Bass,2008,p.487

Patric Leonardi “Microbiology Study Guide: Key Review Questions and Answers”, Silver Educational Publishig,2005,p.78

N.Cary Engelberg,Victor DiRita,Terence S Dermondy, “Mechanisms of Microbial Disease” , 4^th Edithion,Lippincton Williams&Wilkins,2007,p.762

William F Strohl, Harriet Rouse, Bruce D Fisher, “Microbiology”, Lippincton^s,2001,p.516

Контроль (вопросы, тесты, задачи).

Контроль усвоения материала:

1. 
   Назовите основные группы микроорганизмов.
   
2. 
   Каким методом исследуется морфология бактерий?
   
3. 
   Перечислить таксономические категории
   
4. 
   Перечислить правила роботы в бактериологической лаборатории.
   
5. 
   Что такое иммерсионная система микроскопа?
   
6. 
   Перечислить порядок работы с микроскопом при использовании иммерсионной системы.
   
7. 
   Что понимают под морфологическими свойствами бактерий?
   
8. 
   Что понимают под тинкториальными свойствами бактерий?
   
9. 
   Основные правила техники безопасности в бактериологической лаборатории.
   

1. 
   Морфология, ультраструктура и химический состав бактерий.
   
2. 
   Основные методы исследования морфологии бактерий. Микроскопирование с использованием светового микроскопа: темнопольная, фазово-конт­растная, люминесцентная, электронная.
   

1. 
   Для бактериологического исследования в лабораторию поступил материал от больного. Какими методами можно выявить наличие микро­бов в материале?
   
2. 
   Что нужно сделать, если вы нечаянно разобьете пробирку с культурой микроба, и ее содержимое окажется на столе, полу, Вашей одежде?
   
3. 
   Вы закончили работу в бактериологической лаборатории за ра­бочим столом, поставили в стакан прокаленную на огне петлю, закрыли колпачком спиртовку, сняли с головы колпак, халат, рабочую обувь, надели свои туфли, взяли сумку. Вышли из лаборатории. Какие грубые нарушения личной гигиены и санитарно-эпидемиологического режима Вы допустили?
   

1. 
   Назовите основные структурные элементы бактериальной клетки.
   
2. 
   Назовите функции клеточной стенки
   

4. Назовите роль ЦПМ:

5. Как Вы считаете, вирусы имеют клеточное строение ?

6. Назовите структурные элементы грибов рода MUCOR:

7. Кто предложил окраску бактерий?

8. Приведите примеры бактерий, вызывающие заболевания у людей.

9. Что из себя представляет цитоплазма и что в ней содержится?

10. Как называются палочки, образующие споры?

11. Приведите примеры простейших, возбудителей болезней у людей.

12. Что такое рибосомы и из чего они состоят?

13. Приведите примеры извитых бактерий.

14. Назовите структурные элементы грибов рода ASPERGILLUS:

15. Назовите функции и свойства спор.

16. Как в мазке располагаются диплококки?

17. Перечислите особенности строения клеточной стенки и химического состава грамм(+) бактерий.

18. Приведите примеры грам (-) бактерий.

20. Что из себя представляют жгутики и пили, назовите их функции.

21. Являются ли морфоварианты таксономическим признаком?

22. Как в мазке располагаются стафилококки?

23. Назовите свойства дрожжевых грибов.

24. Перечислите особенности строения и химического состава грам(-) бактерий.

25. Назовите функции капсулы бактерий:

26. Как в мазке располагаются стрептококки?

27. Дайте характеристику прокариотам.

28. Как в мазке располагаются сарцины?

29. Являются ли вегетативные клетки грибов кислотоустойчивыми?

30. Дайте характеристику эукариотам.

31. Грибы относятся к Грам (+) или Грам (-) микроорганизмам?

32. Назовите формы существования хламидий.

33. Что такое протопласты?

34. Что такое сферопласты?

35. Грибы относятся к эукариотам или прокариотам?

36. что такое l-формы бактерий?

37. Перечислите морфологические особенности лептоспир.

38. Как размножаются актиномицеты?

39. Перечислите структурные компоненты спирохет.

40. Какие Вы знаете внутриклеточные включения, где они располагаются и чем они являются?

41. перечислите морфологические особенности боррелий:

42. Что такое монотрихи?

43. приведите примеры прокариот.

44. перитрихи?

45. Перечислите структурные компоненты грибов:

46. лофотрихи?

47. каков принцип строения оболочки у простейших?

48. амфитрихи?

49. назовите постоянные органеллы движения простейших.

50. что относится к морфологическим свойствам микроорганизмов?

51. назовите временные органеллы движения простейших

52. какие вы знаете формы бактерий?

53. перечислите микробиологические методы исследования.

54. в чем измеряют размеры бактерий?

55. Перечислите морфологические особенности трепонем.

56. Приведите примеры палочковидных бактерий.
По правилам техники безопасности.

Что нужно сделать, если Вы нечаянно разобъете пробирку с биологическим материалом и ее содержимое окажется на столе? Необходимо:

1. 
   Не обращая внимания, продолжить работу
   
2. 
   Дать возможность высохнуть на воздухе
   
3. 
   Взять тряпку и стереть со стола
   
4. 
   Облучить бактерицидной лампой
   
5. 
   Немедленно сообщить преподавателю и вместе с ним провести обеззараживание
   

1. 
   Работа проводится обязательно в халатах и шапочках
   
2. 
   При попадании заразного материала на стол, это место обеззараживается дезинфицирующим раствором
   
3. 
   Разрешается пипетировать биологические жидкости ртом с ватным фильтром
   
4. 
   В лаборатории запрещается принимать пищуПредметы, используемые в работе с биологическими жидкостями и живыми микробами, сразу обеззараживаются
   

1. 
   Для работы в баклаборатории обязательно:
   

1. 
   ношение защитной одежды и средств индивидуальной защиты
   
2. 
   допуск только после ознакомления инструкцией по технике безопасности
   
3. 
   строгие требования к дезинфекции
   
4. 
   работать с биологическим материалом, хим.реактивами в резиновых перчатках
   
5. 
   все вышеперечисленное
   

2. 
   Приготовление препарата из живой культуры микробов предусматривает:
   

1. 
   Работу в резиновых перчатках
   
2. 
   Работу в вытяжном шкафу или ламинарном боксе
   
3. 
   Фиксацию в пламени для обезвреживания микробов
   
4. 
   Все вышеперечиленное
   

3. 
   В структуру баклаборатории не входит:
   

1. 
   Стерилизационная
   
2. 
   Моечная
   
3. 
   Средоварочная
   
4. 
   Столовая для лаборантов
   
5. 
   Виварий
   

4. 
   Знакомясь с запахом вещества разрешается:
   

1. 
   наклоняться над сосудом с жидкостью
   
2. 
   вдыхать полной грудью
   
3. 
   пробовать на вкус
   
4. 
   направить рукой струю воздуха от сосуда к себе и сделать носом легкий вдох
   
5. 
   все вышеперечисленное
   

5. 
   Внешний вид студента в баклаборатории:
   

1. 
   одежда, закрывающая открытые участки тела (брюки или длинные юбки, длинные рукава и т.д.)
   
2. 
   халат, колпак
   
3. 
   сменная обувь (закрытые туфли) или бахиллы
   
4. 
   длинные волосы прибраны назад, ногти коротко пострижены
   
5. 
   все вышеперечиленное
   

6. 
   Правила поведения студента в баклаборатории:
   

1. 
   перед началом занятия надевать защитную одежду
   
2. 
   хранить верхнюю одежду и сумки на вешалках
   
3. 
   мыть руки каждый раз перед выходом из учебной лаборатории
   
4. 
   избегайте лишних движений и разговоров
   
5. 
   все вышеперечисленное
   

7. 
   Вам необходимо перенести культуру микробов в пробирке из комнаты лаборантов в учебную комнату. Ваши действия:
   

1. 
   перенести в пробирке, имеющей маркировку
   
2. 
   перенести пробирки в штативе
   
3. 
   перенести пробирки в кармане медицинского халата
   
4. 
   в специальном ящике для транспортировки (контейнере, биксе)
   
5. 
   все вышеперечисленное возможно
   

8. 
   Наливая спирт в спиртовку, студент немного пролил его на стол, и спирт на столе загорелся. Действия студента :
   

1. 
   прикрыть плотной тканью, крышкой
   
2. 
   залить водой
   
3. 
   кричать, звать на помощь
   
4. 
   ничего не делать, т.к. спирт потухнет сам, как только прогорит
   
5. 
   все вышеперечисленное
   

Микроорганизмы можно увидеть при помощи оптического прибора-микроскопа (греч micros - малый, scopeo - смотрю). В зависимости от целей используют различные виды микроскопии: световую, темнопольную, фазово - контрастную, люминесцентную, электронную.

Световой микроскоп состоит из механической и оптической частей (рис.1. 1). Механическая часть представлена ножкой (или башмаком), тубусодержателем, тубусом, предметным столиком. В нижней части тубусодержателя находятся макро- и микровинты для грубой и тонкой подачи тубуса. Верхняя часть тубусодержателя снабжена головкой крепления револьвера для объективов. Оптическая часть микроскопа состоит из объектива, окуляра и осветительного аппарата. Объективы делятся на сухие и иммерсионные (погружные). Сухой объектив – это такой объектив, между фронтальной линзой которого и рассматриваемым препаратом находится воздух. Из - за разницы показателей преломления предметного стекла и воздуха часть световых лучей не попадает в глаз наблюдателя. При изучении микроорганизмов используется главным образом иммерсионный («погружной») объектив с небольшим фокусным расстоянием и более высокой разрешающей способностью (увеличение 60х-100х).

При иммерсионной системе микроскопии объектив погружают в масло (кедровое, вазелиновое, персиковое, «иммерсиол» и др.), показатель преломления которого близок к показателю преломления стекла. В этом случае лучи света, пройдя через предметное стекло, не меняют своего направления и не рассеиваются, а попадают в объектив. Благодаря этому достигается наилучшее освещение объекта, так как лучи не преломляются и попадают в объектив. Разрешающая способность иммерсионного объектива около 0,2 мкм. Максимальное увеличение современных оптических микроскопов достигает 2000х-3000х. При обычной световой микроскопии наблюдаемый объект рассматриваются в проходящем свете. Поскольку микробы, как и другие биологические объекты, малоконтрастны, то для лучшей видимости их окрашивают.

Рис. 1.1 Микроскопы, а - общий вид микроскопа "Биолам"; б - микроскоп МБР-1: 1-основание микроскопа; 2-предметный столик; 3- винты для перемещения предметного столика; 4-клеммы, прижимающие препарат; 5-конденсор; 6- кронштейн конденсора; 7-винт, укрепляющий конденсор в гильзе; 8-рукоятка перемещения конденсора; 9-рукоятка ирисовой диафрагмы конденсора; 10-зеркало; 11-тубусодержатель; 12-рукоятка макрометрического винта; 13-рукоятка микрометрического винта; 14-револьвер объективов; 15-объективы; 16-наклонный тубус; 17- винт для крепления тубуса; 18-окуляр.

1) на окрашенный препарат нанесите каплю иммерсионного масла, поместите его на предметный столик, укрепив зажимами;

2) поверните револьвер до отметки иммерсионного объектива 90х или 100х;

3) с помощью макровинта осторожно опустите тубус микроскопа до погружения объектива в каплю масла на предметном стекле. Погружайте иммерсионный объектив под контролем глаза, наблюдая сбоку. Как только объектив коснется масла, глядя в окуляр, осторожно опускайте тубус микроскопа, пока не различите в поле зрения контуры препарата. Следите за тем, чтобы не раздавить стекло препарата, что влечет за собой порчу фронтальной линзы! Затем с помощью микрометрического винта настройте точное изображение объекта;По окончании микроскопирования поднимают тубус микроскопа, а затем снимают препарат; фронтальную линзу осторожно вытирают мягкой тряпочкой (необходимо удалить масло с иммерсионного объектива), иногда смачивая ее спиртом, разведенным водой 1:1 и переводят револьвер на малый объектив 8х.

Поскольку микроскоп – это оптический прибор, то в работе с ним необходимо соблюдать ряд правил. Для защиты от пыли микроскоп нужно хранить под чехлом. Время от времени следует проверять чистоту и состояние оптики и протирать ее, но только снаружи. Для чистки оптики применяют волосяную кисточку или мягкую ткань, смоченные этиловым спиртом, разбавленным водой, но ни в коем случае не применяют бензин или ксилол во избежание расклеивания линз. Механические трущиеся части протирают ксилолом или бензином, а затем смазывают маслом.

Темнопольная микроскопия

Метод микроскопического исследования объектов, не поглощающих свет, плохо видимых при методе светлого поля. При темнопольной микроскопии объекты освещаются косыми лучами или боковым пучком света, что достигается при помощи специального конденсора. При этом в объектив микроскопа попадают только лучи, рассеянные объектами, находящимися в поле зрения, поэтому наблюдатель видит эти объекты ярко светящимися на темном фоне. Темнопольную микроскопию применяют для прижизненного изучения трепонем, лептоспир, боррелий, жгутикового аппарат бактерий.

Метод исследования прозрачных, неокрашенных, не поглощающих света объектов, основанный на усилении контраста изображения. Прозрачные объекты (в том числе живые микробы) отличаются от окружающей среды по показателю преломления, не поглощают свет, но изменяют его фазу. Эти изменения не улавливаются глазом. При фазово-контрастной микроскопии свет, не поглощенный объектом, проходит через так называемое фазовое кольцо, нанесенное на одну из линз объектива. Фазовое кольцо смещает фазу этого проходящего света на четверть длины волны и снижает его интенсивность. Прохождение прямого, не поглощенного объектом света через фазовое кольцо обеспечивается кольцевой диафрагмой конденсора. Лучи, даже немного отклоненные (рассеянные) в препарате, не попадают в фазовое кольцо и не претерпевают сдвига фазы. В результате разность фаз между отклоненными и не отклоненными лучами усиливается, давая контрастное изображение структуры препарата. Фазово - контрастную микроскопию используют для прижизненного изучения бактерий, грибов, простейших, клеток растений и животных.

Метод морфологического анализа с помощью потока электронов. Роль оптических линз выполняют электрические и магнитные поля. Использование в качестве источника излучения потока электронов повышает разрешающую способность микроскопа, измеряемую в нанометрах. Это позволяет изучать структуру объектов на субклеточном и макромолекулярном уровне. Применяется для изучения субмикроскопической анатомии вирусов, бактерий, грибов, простейших. Использование электронной микроскопии в сочетании с иммунологическими методами обусловило развитие иммуно - электронной микроскопии. Наряду с приборами "просвечивающего" типа используют сканирующие электронные микроскопы, обеспечивающие рельефное изображение поверхности объекта. Преимущество сканирующей электронной микроскопии состоит в том, что дает объемное изображение объекта.

Метод микроскопии, позволяющий наблюдать первичную и вторичную люминисценцию микроорганизмов. Люминисценция (лат. (lumen-свет) - особый вид свечения, которое возбуждается коротковолновой частью видимого света либо ультрафиолетовыми лучами. Для люминисцентной микроскопии применяют либо специальные люминисцентные микроскопы, либо приставки к обычным «биологическим» микроскопам. Она помогает проводить ускоренную идентификацию микроорганизмов. Первичная (собственная) люминесценция характерна для ряда биологически активных веществ (ароматические аминокислоты, порфирины, хлорофилл, витамины А и В2, тетрациклины и др.). Вторичная ( или наведенная ) люминисценция возникает в результате обработки исследуемого объекта светящимися красителями - флюорохромами (акридиновый оранжевый, ФИТЦ, бромид этидия и др.). Среди различных видов люминисцентной микроскопии наиболее распространены прямое флюорохромирование - окрашивание флюорохромами и иммунофлюоресценция (РИФ). Иммунофлюоресценция (метод Кунса) - сочетание микроскопического метода с иммунологическим.

1) Использование флуоресцирующих красителей

2) Применение УФЛ в качестве источника освещения

3) Изучение неокрашенных подвижных микроорганизмов (спирохет), видимых при боковом освещении на темном поле

4) Масляная система за счет выравнивания показателей преломления света повышает уровень полезного увеличения микроскопа

5) Использование системы диафрагм для превращения фазовых колебаний светового луча в амплитудные, что позволяет более четко изучить неокрашенные микроорганизмы

2. этапы иммерсионного микроскопирования

‪□ -.повернуть тубус до погружения объекта в каплю масла

□ - установить ориентировочный фокус при помощи макровинта

□ - револьвер повернуть до отметки иммерсионного объектива х90

□ - провести окончательную фокусировку препарата микровинтом , вращая его в пределах одного оборота

‪□ -.на готовый окрашенный мазок нанести каплю иммерсионного масла и поместить препарат на предметный столик

Квантованный текст №2

Исследование микроорганизмов в живом состоянии

Исследование микроорганизмов в живом состоянии применяется, главным образом, для изучения формы и подвижности бактерий, реже при реакции агглютинации. Для этих целей готовят препараты «раздавленная капля» и «висячая капля».

Жидкость с исследуемым материалом наносят на предметное стекло и сверху накладывают покровное. Капли материала надо брать такой величины, чтобы они заполняли все пространство между покровным и предметным стеклами и не выступали за края покровного.

На покровное стекло предварительно наносят каплю жидкости с исследуемой культурой микроорганизмов. Затем на покровное стекло накладывают предметное стекло с луночкой посередине, края которой предварительно смазаны вазелином. Предметное стекло слегка прижимают к покровному, в результате чего оба стекла склеиваются. После этого препарат перевертывают покровным стеклом кверху. Получается герметически закрытая камера, в которой капля долго не высыхает. Для предотвращения быстрого высыхания препараты рекомендуется помещать во влажную камеру (чашку Петри), на дно которой положено 2-3 влажных кружка фильтровальной бумаги, покрытых сухими.

При изучении препаратов «раздавленная » и «висячая» капли под световым микроскопом край капли сначала отыскивают со слабым увеличением и при суженной диафрагме, а потом исследуют препарат при помощи более сильного увеличения. Более удобными для их микроскопического изучения представляются такие виды микроскопии, как темнопольная, фазово-контрастная и ноптральная.

Исследование бактерий в окрашенном препарате дает возможность не только изучить их морфологию, но и получить представление о некоторых деталях их химического строения. Это достигается применением специальных методов.

1. Препараты{нативные, фиксированные }

1) висячая капля

2) окрашенный мазок

3) раздавленная капля

4) фиксированный мазок

2. Подвижность бактерий изучают при:

1) электронном

2) темнопольном

3) иммерсионном

4) люминесцентном

5) фазово-контрастном

Микроскопировании:

Установите правильную последовательность

3. Этапы приготовления препарата «раздавленная капля»

‪□ - сверху накладывают покровное стекло

‪□ -.микроскопируют, используя объективы х40 или х50

‪□ -.на предметное стекло наносят каплю бульонной культуры

4. Этапы приготовления препарата «висячая капля»

‪□ - края лунки смазывают вазелином

□ - при малом увеличении (х8) находят край капли

□ - микроскопируют с плоским зеркалом и суженой диафрагмой

□ - предметное стекло с прилипшим покровным стеклом переворачивают

□ - покрывают предметным стеклом с лункой, чтобы капля свободно висела в центре лунки

□ - найденный край капли устанавливают в центре поля зрения микроскопа при малом увеличении

□ - на середину обезжиренного покровного стекла наносят небольшую каплю культуры в бульоне или физ. растворе

‪□ - не сдвигая препарата, переходят на объектив (х40) или иммерсионную систему, слегка расширив диафрагму микроскопа

В зависимости от характера исследуемого материала при его заборе используют бактериологическую петлю, пастеровскую пипетку или иглу.

Для приготовления мазка из культуры бактерий, выращенной на плотной среде, наносят каплю физиологического раствора или воды. Петлю держат, как карандаш. Рабочую часть петли прожигают в пламени горелки в вертикальном положении, сначала конец петли, а затем постепенно всю металлическую часть. Обезжиренное предметное стекло прожигают в пламени горелки. Пробирку с изучаемой культурой микроорганизмов держат между указательным и большим пальцами левой руки. Бактериологическую петлю берут правой рукой и прожигают ее в пламени горелки. Не выпуская петли из правой руки, мизинцем прижимают пробку к ладони и вынимают их пробирки. Во время манипуляции с пробиркой пробка находится в руке. Прожигают пробку и горло пробирки в пламени горелки. Водят петлю в пробирку. Охлаждают петлю о стенку пробирки, чтобы горячая петля не убила выросшую культуру. Захватывают петлей культуру и выводят ее из пробирки, не касаясь стенок. Держа петлю с культурой, закрывают пробирку пробкой над пламенем горелки. Ставят пробирку в штатив. Все описанные действия производят только вблизи пламени горелки. Культуру вносят петлей в каплю жидкости на стекле и распределяют равномерно круговыми движениями на площади диаметром 1,0-15 см, а затем петлю обжигают. Остатки культуры на петле сжигают в пламени горелки. Мазок должен быть тонким, равномерно растертым и небольшим. Мазок высушивают на воздухе при комнатной температуре.

Фиксация мазка

После полного высыхания мазки фиксируют, чем достигается умерщвление микробов и прочное прикрепление их к стеклу. Фиксация резко улучшает окрашиваемость микробов, которые в живом виде слабо воспринимают краски. Самый простой и распространенный способ – фиксация жаром. Держа стекло мазком вверх, его трижды проводят через пламя газовой или спиртовой горелки (мазком вверх). Во избежание перегрева препарата время фиксации не должно превышать 5-6 с, а время прямого воздействия пламени -2 с. Кроме жара, для фиксации могут быть применены следующие вещества:

1.Этиловый спирт 96^о. Время фиксации 10-15 мин.

2. Смесь равных объемов абсолютного спирта и эфира (по Никифорову)- (10-15 мин).

3. Метиловый спирт-5 мин

4. Ацетон-5 мин

5.1% раствор сулемы -10-15 мин и затем промывание препарата раствором Nacl и водой

6.10% раствор AgNO₃-10 мин

7. Жидкость Буэна: формалина неразбавленного 10 мл, ледяной уксусной кислоты 2 мл и насыщенного водного раствора пикриновой кислоты 30 мл.

8. Жидкость Карнуа: ледяной уксусной кислоты 10 мл, хлороформа 30 мл и 96^о спирта 60 мл.

Фиксированный препарат готов к окрашиванию.
Вашему вниманию предлагаются задания, в которых могут быть один, два, три и большее число правильных ответов. Нажимайте на клавиши с номерами всех правильных ответов.
1. Особенности строения клеточной стенки и химического состава {грам (+),грам (-) } бактерий

1) Узкие поры оболочки

2) Широкие поры оболочки

3) Наличие тейхоевых кислот

4) Тонкий слой петидогликана

5) Толстый слой петидогликана

6) Наличие ЛПС наружной мембраны

7) Магниевые соли рибонуклеиновой кислоты

8) Отсутствие тейхоевых кислот и рибонуклеата магния
2. При физическом способе фиксации предметное стекло с препаратом плавным движением проводят в _____
3. При химическом способе фиксации предметное стекло с препаратом опускают в _____
4. Этапы приготовления фиксированного мазка

из жидкого материала

□ - обезжирить предметное стекло

□ - зафиксировать мазок в пламени горелки

□ - мазок высушить на воздухе или в струе теплого воздуха над пламенем горелки

□ - петлей внести каплю исследуемой жидкости и круговыми

□ - движениями распределить равномерным слоем в виде кружка , диаметром примерно 1-1,5 см
5. Этапы приготовления фиксированного мазка с твердой питательной среды

‪□ -.обезжирить предметное стекло

‪□ - зафиксировать мазок в пламени горелки

‪□ - нанести на предметное стекло каплю воды или физ. раствора

‪□ - мазок высушить на воздухе или в струе теплого воздуха над пламенем горелки

□ - петлей внести культуру и круговыми движениями распределить равномерным слоем в виде кружка, диаметром примерно 1-1,5 см

Микроскопия

РИФ

Флюорохром

Препарат «висячая капля»

Фиксированный мазок

Нативный мазок

Мазок- отпечаток

Микроскоп световой

Микроскоп электронный

Микроскопия в темном поле

Микроскопия в фазово-контрастном микроскопе

Микроскопия люминисцентная

Нанометр

Нанограмм

Микрометр

Капсула

Жгутики
Примерный хронометраж занятия:

- научить студентов владеть простыми и сложными методами окраски микроорганизмов, в т.ч. окраске по Граму:

• 
  сформировать знания об основах микроскопического метода;