Катлинский, Сазыкин. Курс лекций по биотехнологии
жүктеу/скачать 2.51 Mb. Pdf көрінісі
|
| Рис.15.
45 Отжиг – это процесс смещения двух фрагментов ДНК, когджа восстанавливаются только водородные связи и фосфодиэфирные связи не образуются. Для восстановления фосфодиэфирных связей используют ДНК-лигазы – это ферменты, которые восстанавливают ковалентные фосфодиэфирные связи и таким образом концы однотяжевой линейной молекулы ДНК соединяются с кольцевой молекулой ДНК- плазмидой. Плазмида – это вектор. Так лиганды сшивают, склеивают молекулы ДНК. На этом этапе плазмида называется вектором или транскриптом. 4. Включение вектора в клетку-реципиент (Е.coli) Условием включения вектора в клетку реципиента является то, что цитоплазматическая мембрана ее должна близко подходить к клеточной стенке, когда вектор входит внутрь клетки через окошечки. 5. Отбор гибридных клонов Рис. 16. Посев идет на питательную среду, содержащую, как пример, бензилпенициллин, при этом вырастают клоны клетки Е.coli с маркером в гибридной плазмиде. Рис. 17 46 У эукариот при образовании молекулы м РНК имеет место процесс сплайсинга (от английского splicing- созревание, сращивание). Ген у эукариот представляется не непрерывный, а мозаичной структуры, содержащей наряду с кодирующими, несущими информацию (так называемые экзоны), также некодирующие, не несущие информацию (интроны) последовательности. Фермент ДНК-зависимая РНК-полимераза катализирует транскрипцию как экзонов, так и интронов. В процессе сплайсинга интроны с помощью ферментов вырезаются, а экзоны после удаления интронов сращиваются. При этом образуется функционирующая м РНК. У прокариот процесс образования м РНК идет проще. При помощи РНК- полимеразы идет транскрипция соответствующего гена. Процесс сплайсинга у прокариот отсутствует. Образующаяся в процессе транскрипции молекула м РНК уже способна к функционированию. жүктеу/скачать 2.51 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|