Методы биологических исследований


Тема клонирования в культуре и искусстве



бет2/4
Дата13.06.2016
өлшемі1.06 Mb.
#131763
1   2   3   4

Тема клонирования в культуре и искусстве


Литературные произведения, фильмы, компьютерные игры, затрагивающие тему клонирования человека и животных.

Литература


  • Мы - Е.И. Замятин

  • Геном - Сергей Лукьяненко

  • Люди и слепки

Фильмы


  • Через тернии к звёздам

  • Парк Юрского периода

  • Судья Дредд

  • Чужой 4: Воскрешение

  • Звериные Войны — мультипликационный

  • Шестой день

  • Репликант

  • Динокрок

  • Остров

  • Эон Флакс

  • Футурама

  • Звёздные войны

  • Трансформеры — мультипликационный

  • Луна 2112

  • Универсальный солдат 3: Возрождение

  • Клон

  • Чрево

  • Не отпускай меня

ЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮ

Коэффициент сходства — безразмерный показатель, применяемый в биологии для определения степени сходства видового состава двух растительных сообществ или зооценозов. К настоящему времени разработано множество коэффициентов сходства, которые можно разделить на две группы:



  1. показатели, основанные на качественных данных;

  2. показатели, основанные на количественных данных.

К наиболее известным показателям первой группы относятся:

  • коэффициент Жаккара: , где а — количество видов на первой пробной площади, b — количество видов на второй пробной площади, с — количество видов, общих для 1 и 2 площади

  • коэффициент Серенсена: , обозначения те же.

К наиболее известным показателям второй группы относятся:

  • коэффициент Брея-Кертиса: , где w — сумма меньших количественных показателей для видов, отмеченных на обеих площадях; а — сумма показателей видов 1-й площади, b — сумма показателей видов 2-й площади.

Если обилие выражено в десятых долях единицы, то формула Брея-Кертиса упрощается: , где а — выраженная в десятых долях значимость данного вида на 1 площадке, b —значимость данного вида на 2 площадке.

Если коэффициент сходства равен 1, то два сообщества обладают абсолютным сходством, если 0, то абсолютным несходством. Для отдельных исследований необходимо вычислить коэффициент несходства, который вычисляется вычитанием найденного коэффициента сходства из единицы

ЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮ

Матрично-активированная лазерная десорбция/ионизация (MALDI)


2. Матрица
3. Механизм ионизации
4. Применение

Матрично-активированная лазерная десорбция/ионизация, МАЛДИ — — десорбционный метод «мягкой» ионизации, обусловленной воздействием импульсами лазерного излучения на матрицу с анализируемым веществом. Матрица представляет собой материал, свойства которого обусловливают понижение деструктивных свойств лазерного излучения и ионизацию анализируемого вещества. МАЛДИ масс-спектрометрия находит свое широкое применение для анализа нелетучих высокомолекулярных соединений

Впервые возможность применения матрицы для подавления фрагментации при анализе нелетучих органических соединений на примере белков и пептидов была продемонстрирована в 1987 году группой ученых в Германии.

Обычно используется в сочетании с времяпролетным масс-анализатором. Таким образом, верхний рубеж определяемых масс ограничивается пропускаемой способностью анализатора. Чувствительность метода: << 1 фемтомоль.

Считается, что вещество, используемое в качестве матрицы, должно отвечать следующим основным требованиям:

1) обладать высоким коэффициентом экстинкции при длине волны лазерного излучения;

2) иметь способность к ионизации нейтральных молекул анализируемого вещества путем переноса заряда или заряженной частицы;

3) обладать хорошей растворимостью в растворителях, применяемых в процессе пробоподготовки;

4) быть химически инертным по отношению к анализируемому веществу;

5) иметь низкую летучесть и термическую устойчивость.

Стоит указать на селективность в выборе матричных соединений по отношению к классу анализируемых соединений. Во многом это определяется различной природой механизмов образования ионов анализируемого вещества. Как правило, доминирующим процессом в их образовании являются процессы вторичной ионизации, а именно ион-молекулярные взаимодействия между матричными ионами и молекулами анализируемого вещества. Иными словами, вторичная ионизация может происходить за счет таких процессов, как перенос протона, заряженной частицы в виде электрона, металл-катионов.

Например, существует широко распространенная группа кислотных матриц для анализа белков и пептидов: 2,5-дигидроксибензойная кислота, различные производные коричной кислот и т. д. Пептиды и белки, как правило, обладают высокими значениями сродства к протону от 900 кДж/моль и более. Эти значения превышают величины сродства к протону матричных соединений, в результате чего реакция переноса протона является экзотермической:

А + МН → М + АН, где А – молекула анализируемого вещества, М – матричная молекула.

Другой путь образования ионов происходит путем переноса электрона, конечным результатом которого является образование молекулярного радикал-катиона:

А + М → А + М.

Это наиболее эффективный способ образования положительных ионов для неполярных соединений с низкими значениями энергии ионизации.



Примеры МАЛДИ матриц

Название

Английское название

Растворители для матрицы

Типы исследуемых веществ

2,5-Дигидроксибензойная кислота

2,5-Dihydroxybenzoic Acid

Вода, этанол, метанол, ацетон, ацетонитрил, хлороформ, тетрагидрофуран

Пептиды, олигонулеотиды, полисахариды, синтетические полимеры

2--бензойная кислота

2--benzoic acid

Диоксан, ацетон, тетрагидрофуран, диметилформамид

Пептиды, белки, синтетические полимеры

α-Циано-4-Гидроксикоричная кислота

α-Cyano-4-hydroxycinnamic acid

Ацетон, водн. ацетонитрил, ТГФ, ДМФА, этанол

Пептиды, синтетические полимеры

Синапиновая кислота

Sinapic Aсid

ТГФ, ДМФА

Пептиды, белки, липиды

Феруловая кислота

Ferulic Aсid

ТГФ, ДМФА

Пептиды, белки

1,8,9-Антрацентриол

1,8,9-anthracentriol

ТГФ, ДМФА, толуол, хлороформ, хлорбензол

Синтетические полимеры, липиды


Схематическое представление механизма МАЛДИ



  • При облучении лазером с длительностью импульса несколько наносекунд и высокими величинами интенсивности излучения из образца, представляющего собой твердый раствор или смесь анализируемого вещества и матрицы, происходит выброс материала в виде микрочастиц. Такие частицы могут достигать размеров несколько сотен микрометров. Над поверхностью образца возникает область высокого локального давления — так называемый факел, который преимущественно состоит из нейтральных частиц. Вместе с тем, в нем присутствуют и заряженные частицы, доля которых по разным оценкам составляет 10—10 от полного числа всех частиц. На начальном этапе образования факела его плотность близка к плотности вещества в конденсированном состоянии.

  • C расширением факела происходит распад конгломератов вплоть до образования отдельных молекул или их фрагментов, а также заряженных частиц. Ионизацию молекул, происходящую непосредственно при выбросе материала из конденсированного состояния, принято рассматривать как первичную.

  • В расширяющемся факеле происходят непрерывные соударения между частицами, в том числе возможны ион-молекулярные реакции между матричными заряженными частицами и молекулами анализируемого вещества, которые приводят к ионизации последнего. Такого рода ионизацию относят к вторичной.

Диапазон применения МАЛДИ достаточно широк и охватывает многие классы химических соединений:

  1. Биоорганические соединения;

  2. синтетические полимеры;

  3. органические комплексные соединения;

  4. высокомолекулярные материалы;

  5. синтетические дендримеры;

  6. фуллерены и др.

ЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮ

Метод Бредфорда — один из колориметрических методов количественного определения белков в растворе. Предложен Мерионом Бредфордом в 1976 году. Статья М. Бредфорд в журнале Anal Biochem, посвящённая методу количественного определения белка в растворе, является одной из самых цитируемых научных статьей в мире.




Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4




©dereksiz.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет