Методические указания для студентов Учебно-методическое сопровождение практического занятия
Этап: «Сообщение темы и цели занятия»
жүктеу/скачать 1.81 Mb.
|
Этап: «Сообщение темы и цели занятия» Знания методов изучения генетики человека позволяют врачу любой специальности и биологии всех профилей понимать механизмы индивидуального развития и его нарушения, природы любого заболевания, рационального подхода к диагностике заболеваний. Вопрос: возможности какого метода мы будем разбирать на занятии? Ответ: цитологического метода Вопрос: какие понятия терминологического диктанта вы не смогли назвать во время опроса Ответ: хроматин, эухроматин, тельца Барра, гетерохроматин Эти понятия, составляющие арсенала цитологического метод. Они связаны с половыми хромосомами. Поэтому тема занятия: «Генетика пола у человека. Тельца Барра и их диагностическое значение» Цель занятия: научиться отличать нормативный кариотип женщины и мужчины от патологического по кариограммам и количеству телец Барра Этап: Практическое усвоение материала Задача №1 . Анализ кариотипа по кариограмме Среди предложенных кариотипов укажи аномальные, запиши их, назови синдром, определи вид хромосомной анеуплоидии: моносомия или трисомия 
Решение задачи 1 Кариотип 1 47, ху +21 патология, синдром Дауна, трисомия по 21 паре хромосом Кариотип 2 47, ху +13 патология, синдром Патау, трисомия по 13 паре хромосом Кариотип 3 47, Х0 патология, синдром Шерешевского –Тернера , моносомия трисомия по 23 паре хромосом Кариотип 4 47, ХХУ патология, синдром Клайнфельтера, трисомия по 23 паре хромосом Кариотип 5 47, ху +18 патология, синдром Дауна, трисомия по 21 паре хромосом Задача №2 . Решение задач на дисбаланс половых хромосом и определение количества телец Барра Определите количество полового хроматина у людей с дисбалансом половых хромосом, укажите число хромосом, синдром: а)у мужчины ХХУ, ХХХУ, ХХХХУ ; б) у женщин ХО, ХХХ.
А) Количество полового хроматина у мужчины с дисбалансом половых хромосом ХХУ-1 тельце Барра, синдром Клайнфельтера ХХХУ- 2 тельца Барра, синдром Клайнфельтера ХХХХУ- 3 тельца Бара, синдром Клайнфельтера Б) Количество полового хроматина у женщины с дисбалансом половых хромосом составляет: при ХО- ни одного, синдром Шерешевского –Тернера ХХХ-2 тельца Баррра, синдром трипло-Х
а)3р13; б)3g29; в)3р26; г) 4р15; д)4g26; е) 11 р 14; ж)11g 26 Решение задачи а) третий сегмент первого района короткого плеча третьей хромосомы; б) девятый сегмент второго района длинного плеча третьей хромосомы; в) шестой сегмент второго района длинного плеча третьей хромосомы; г) пятый сегмент первого района короткого плеча четвертой хромосомы; д) шестой сегмент второго района длинного плеча четвертой хромосомы; е) четвертый сегмент первого района короткого плеча одиннадцатой хромосомы; ж) шестой сегмент второго района длинного плеча одиннадцатой хромосомы. Задача №4 С помощью современных молекулярно-генетических методов в ДНК обнаружены: а) локус гена WHCR – ген синдрома Вольфа (низкий рост, микроцефалия, судорожные припадки, множественные аномалии развития), имеющего координаты 4 р16; б) локус гена NF – ген нейрофиброматоза 2 типа, имеющего координаты 22 g12 в) локус гена CLS – ген синдрома Коффина Лоури (умственная отсталость, «куриная грудь», «нос боксера», гипертелоризм), Хр22; г) локус гена GEY – зеленый/синий цвет глаз, имеющего координаты 19 р13 д) локус гена NPC- болезнь Нимана-Пика , имеющего координаты 18 g 11- g 12; е)локус гена онкогена ras, имеющего координаты 3р25; ж)локус гена ОFS1, CL – расщепление губы с расщеплением или без расщепления неба, 6р24 з) локус гена NF – ген нейрофиброматоза 2 типа, имеющего координаты 22 g12 Р  ешение задачи 4
. г Э   тап: Подведение итогов, домашнее задание
1. Повторить к следующему занятию учебный материал по генеалогическому методу; 2. Дать характеристику кариотиограмме. А  ) Б)
В  )
Г) 
Д) 
Методические указания для студентов к практической работе №1. Цель: Научиться отличать нормативный кариотип женщины и мужчины от патологического по кариограммам и количеству телец Барра Оснащение занятия: рисунки
Ход работы: 1. Изучите по схемам видимое строение хромосом (рисунок 1, 2) и зарисуйте особенности их морфологии.  2. Изучите классификацию и номенклатуру равномерно окрашенных хромосом (рисунок 3,4). Оответьте на вопросы:
Классификация и номенклатура равномерно окрашенных хромосом человека впервые были приняты в 1960 году в г.Денвере. Согласно классификации все хромосомы человека разделены на 7 групп, расположенных в порядке уменьшения их длины, и обозначаются буквами латинского алфавита от A до G . Все пары хромосом стали нумеровать арабскими цифрами. Группа А. (1- 3) – самые большие хромосомы; 1 и 3-я- метацентрические, 2-я- субметацентрические. Группа В. 4 и 5-я)- крупные субметацентрические хомосомы. Группа С (6-12-я и Х-хромосома)- субметацентрические хромосомы среднего размера. Группа D(13-15-я)- акроцентрические хромосомы средних размеров. Группа Е (16-18-я)- маленькие субметацентрические хромосмы. Группа F(19-20-я)- самые маленькие метацентрические хромосомы. Группа G((21,22-я и Y) –самые маленькие акроцентрические хромосомы. Предложенная классификация позволяла четко различать хромосомы, принадлежащие к разным группам. 
3. Выполните задание Задача 1. Среди предложенных кариотипов (рисунок 6 , кариотипы 1-5), укажи аномальные, запиши их кариотип и определи вид хромосомной анеуплоидии: нулесомия, моносомия, трисомия, если возможно- назови синдром.
4. Изучите принципы определения определение полового хроматина Хроматин клеточного ядра подразделяется на два основных типа на эу - и гетеро хроматин. Это наследственный материал различной степени спирализации и упаковки белками различной степени конденсации. Эухроматин (от греч. еu — полностью и сhгоmа - цвет) в метафазных хромосомах виден в виде светлых полос. В эухроматине находятся структурные активные уникальные гены, которые контролируют развитие признаков организма. Эухроматин менее плотно упакован и доступен для ферментов РНК-полимераз, обеспечивающих синтез и-РНК, а затем синтез белков. Гетерохроматин выявляется в метафазных хромосомах при дифференциальном окрашивании в виде темных полос различных размеров, состоящих из конденсированной (спирализованной) плотно упакованной молекулы ДНК. Даже в интерфазном ядре гетерохроматин в виде глыбок хорошо виден в световой микроскоп Чаще всего он расположен вокруг ядрышка и около ядерной оболочки. Переписывания информации и-РНК с данных участков не происходит. Эти гены неактивны. Структурный и факультативный гетерохроматин Структурный гетерохроматин в интерфазном ядре спирализирован, плотно упакован в метафазных хромосомах постоянно обнаруживается вокруг центромеры во всех 46 хромосомах (составляет около 13 % от генома). Расположение темных полос для каждой пары хромосом строго индивидуально. Функция структурного гетерохроматина в целом пока неясна. Факультативный гетерохроматин появляется в интерфазном ядре не всегда. Это спирализованный эухроматин. В метафазных хромосомах факультативный гетерохроматин не обнаруживают. Например, в ядрах клеток женщин в диплоидном наборе имеется две Х-хромосомы, одна из которых полностью инактивирована (спирализована, плотно упакована) уже на ранних этапах эмбрионального развития и видна в виде глыбки гетерохроматина, прикрепленного к оболочке ядра. Благодаря этому женские и мужские организмы уравновешиваются по количеству функционирующих генов, сцепленных с полом, так как у мужчин одна-X-хромосома и одна доза генов Х-хромосомы. Инактивированная Х-хромосома называется половым хроматином или тельцем Бара (рисунок 5). 
Рисунок 5. Ядра клеток буккального эпителия а - ядро без глыбки полового хроматина, б - с глыбкой полового хроматина
Половой хроматин обычно определяют путем анализа эпителиальных клеток в соскобе слизистой оболочки щеки. Отсутствие тельца Барра у женщин свидетельствует о хромосомном заболевании - синдроме Шерешевского-Тернера, присутствие у мужчин тельца Барра свидетельствует о наследственном заболевании - синдроме Клайнфельтера (кариотип 47, XXV). 5. Выполните задание Задача 2 Определите количество полового хроматина у людей с дисбалансом половых хромосом, укажите число хромосом, синдром: а)у мужчины ХХУ, ХХХУ, ХХХХУ ; б) у женщин ХО, ХХХ.
Наиболее подходящей фазой для исследования хромосом является метафаза митоза. Для изучения хромосом чаще используют препараты кратковременной культуры крови, полученные через 48 -72 ч после взятия крови. При приготовлении препаратов хромосом к культуре клеток добавляют колхицин, который разрушаем веретено деления и останавливает деление клетки в метафазе. Затем клетки обрабатывают гипотоническим раствором, после чего их фиксируют и окрашивают. А) Полное окрашивание хромосом. Для окраски хромосом чаще используют краситель Романовского—Гимзы, 2% ацеткармин или 2 % ацетарсеин. Они окрашивают хромосомы целиком, равномерно (ругинный метод) и могут быть использованы для выявления численных аномалий хромосом человека (45, 47 и т. д.). Б) Дифференцированное окрашивание хромосом. Для получения детальной картины структуры хромосом используют различные способы дифференциального окрашивания. Один из них - G-метод: по длине хромосомы выявляется ряд окрашенных и неокрашенных полос. Чередование этих полос и их размеры строго индивидуальны и постоянны для каждой пары гомологичных хромосом. Например, хромосомы 13, 14, 15-й пар трудно отличить при равномерной окраске, а при дифференциальной - рисунок исчерченности (чередование и размер темных и светлых полос) неодинаков ( рисунок 6). 6. Выполните задания Задача 3 Расшифруйте условные обозначения и отметьте стрелками соответствующие сегменты хромосом на рисунках: а)3р13; б)3g29; в)3р26; г) 4р15; д)4g26; е) 11 р 14; ж)11g 26
С помощью современных молекулярно-генетических методов в ДНК обнаружены: а) локус гена WHCR – ген синдрома Вольфа (низкий рост, микроцефалия, судорожные припадки, множественные аномалии развития), имеющего координаты 4 р16; б) локус гена NF – ген нейрофиброматоза 2 типа, имеющего координаты 22 g12 в) локус гена CLS – ген синдрома Коффина Лоури (умственная отсталость, «куриная грудь», «нос боксера», гипертелоризм), Хр22; г) локус гена GEY – зеленый/синий цвет глаз, имеющего координаты 19 р13 д) локус гена NPC- болезнь Нимана-Пика , имеющего координаты 18 g 11- g 12; е)локус гена онкогена ras, имеющего координаты 3р25; ж)локус гена ОFS1, CL – расщепление губы с расщеплением или без расщепления неба, 6р24 з) локус гена NF – ген нейрофиброматоза 2 типа, имеющего координаты 22 g12 
жүктеу/скачать 1.81 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|