Методическое пособие к малому практикуму по биохимии и молекулярной биологии
жүктеу/скачать 1.21 Mb. Pdf көрінісі
|
| Гидролиз нуклеопротеидов: в колбочку на 100 мл помещают 2 г
дрожжей, предварительно измельченных, и добавляют 30 мл 5 %-ного рас- твора Н 2 SO 4 . Содержимое колбочки тщательно перемешивают. Небольшое количество жидкости отфильтровывают в пробирку, где после нейтрализа- ции 30 %-ным раствором NаОН проводят биуретовую реакцию. Колбочку закрывают пробкой с обратным холодильником, помещают в кипящую во- дяную баню, осторожно кипятят в течение часа. После этого жидкость, со- держащую продукты гидролиза нуклеопротеинов, охлаждают и фильтру- ют. С гидролизатом проделывают следующие реакции: 1 . Реакция на белковый компонент : 10 капель гидролизата дрожжей титруют 30 %-ным раствором NаОН до щелочной реакции и при- бавляют 1 2 капли 2 %-ного раствора СuSO 4 . 2 . Р е а к ц и я М о л и ш а н а у г л е в о д ы : в пробирку наливают 10 ка- пель гидролизата, добавляют 30 %-ный раствор NаОН до щелочной реак- ции, затем добавляют 5 капель -нафтола, перемешивают. Осторожно под- слаивают концентрированную Н 2 SO 4 (15 20 капель). На границе жидко- стей появляется окрашенное кольцо. 3. Реакция на фосфорную кислоту : к 10 каплям гидролизата до- бавляют равный объем раствора молибденовокислого аммония в азотной кислоте и нагревают до кипения. Образуется желтый осадок фосфорно- молибденового аммония. 4. Проба на пуриновые основания : 10 капель гидролизата дрож- жей титруют 10 %-ным раствором NаОН до нейтральной реакции (по ин- дикатору). Затем добавляют 3 капли 1 %-ного раствора азотнокислого се- ребра. Появляется осадок. Результаты работ свести в таблицу. №№ пробирок Исследуемый материал Употребляемые реактивы Открытый компонент К какой группе сложных белков относится 1 жүктеу/скачать 1.21 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|