Методическое пособие с о д е р ж а н и е V семестр д/о, VII семестр в/о
жүктеу/скачать 2.35 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 2
- Провести идентификацию метилтестостерона и метандростеналона в смеси методом ТСХ (обучающее задание)
- Определить примесь посторонних стероидов в гидрокортизона ацетате методом ТСХ
Определение количественного содержания стероидных соединений мо- жет быть также выполнено фотоколориметрически. Предварительно на определяемое вещество действуют одним из реагентов, используемых в качественном анализе и позволяющих получить растворимый продукт взаимодействия с устойчивой окраской.Таблица 2.4 Спектральные характеристики лекарственных веществ
Так, для определения сердечных гликозидов используют реакцию их взаи- модействия с нитропроизводными ароматического ряда, чаще всего с пикрино- вой кислотой (см. Тема 2, задание 3.1). Для определения некоторых гестаген- ных препаратов (прегнин, медроксипрогестерона ацетат), а также андрогенов (метилтестостерон), анаболиков (ретаболил) и кортикостероидов (кортизона ацетат) используют реакцию образования гидразонов (присоединение по оксо- группе в положении С-3) с последующим колориметрическим пределением ок- рашенных продуктов. На восстановительных свойствах -кетольной группы в молекулах кортикостероидов основаны реакции с солями теразолия (см. Тема 2, задание 4.2), образующийся растворимый краситель красный формазан легко определяется колориметрически с max=485 нм. ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 2Методы ТСХ, УФ- спектрофотометрии и фотоколори-метрии в фармакопейном анализе лекарственных средств, производных циклопентанпергидрофенантренаЦель работы. Освоить физико-химические методы оценки качества лекар- ственных средств, производных циклопентанпергидрофенантрена. Задание 1. Определить подлинность и доброкачественность лекарственных средств группы кортикостероидов и андрогенов методом ТСХ. Провести идентификацию метилтестостерона и метандростеналона в смеси методом ТСХ (обучающее задание)М е т о д и к а . На линию старта хроматографической пластинки марки Сорбфил-УФ-254 размером 5 10 см наносят 0,01 мл 0,1 % стандартных раство- ров препаратов в этаноле и смесь веществ. Хроматографируют восходящим методом в системе растворителей гексан- ацетон 7:3. Когда фронт растворителя поднимется на 8 см, пластину вынимают и сушат на воздухе. Детекцию пятен проводят в УФ-свете или опрыскиванием пластины 10 %-ным раствором фос- форно-молибденовой кислоты в ацетоне. После обработки пластину нагревают в сушильном шкафу при 110-120 С в течение 1-2 мин. Идентификацию инди- видуальных веществ в смеси проводят, рассчитывая и сравнивая величину Rf зон метилтестостерона и метандростенолона в смеси и стандартах. Определить примесь посторонних стероидов в гидрокортизона ацетате методом ТСХМ е т о д и к а . На линию старта пластинки «Сорбфил-УФ-254» размером 8 15 см наносят 0,01 мл 0,01 % раствора (100 мкг) субстанции гидрокортизона ацетата в смеси 95 % спирт-хлороформ (1:1); 0,005 мл (0,5 мкг); 0,01 мл (1 мкг); 0,015мл (1,5кг) и 0,02мл (2мкг) растворов стандартных образцов веществ- свидетелей (СОВС) гидрокортизона и гидрокортизона ацетата. Хроматографируют восходящим методом в камере со смесью растворителей хлороформ – метиловый спирт – вода (95:5:0,2). Длина пробега растворителя – 13 см. Высушенную на воздухе пластинку просматривают в УФ-свете при 254 нм. Пятна посторонних примесей на хроматограмме испытуемого препарата сравнивают по величине и интенсивности окраски с пятнами СОВС: пятно примеси гидрокортизона сравнивают с пятном СОВС гидрокортизона, пятна других возможных примесей сравнивают с пятнами СОВС гидрокортизона аце- тата. Суммарное содержание примесей не должно превышать 4 %. П р и г о т о в л е н и е р а с т в о р о в С О В С . 0,01 г гидрокортизона (стан- дарт) и 0,01 г гидрокортизона ацетата растворяют в 70 мл смеси 95 % спирт- хлороформ (1:1) в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора той же смесью растворителей до метки и перемешивают. жүктеу/скачать 2.35 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|