Методичні рекомендації для самостійної роботи студентів при підготовці до практичного заняття

Диагностика

Мукороз, фикомикоз — хронический глубокий микоз, обусловленный различными видами грибов из семейства Mucoraceae.

1. Приготовление мазков из исследуемого материала больного на кандидоз. Окрасить простым методом, промикроскопировать, зарисовать.

Микроскопически: овальные почкующиеся дрожжевые клеки (4-8 мкм), псевдомицелий (клетки соединены перетяжками), мицелий с перегородками и почкующиеся бластоспоры. Candida albicans образует хламидоспоры - толстостенные двухконтурные крупные овальные споры.
2. Выучить культуральные свойства кандид на среде Сабуро.

Колонии выпуклые, блестящие, сметанообразные, непрозрачные с различными оттенками.

В Penicillium - конидиеносец многоклеточный, ветвистый, что имеет вид кисточек.

В Мuсоr - на тонких отростках грибницы (гифах) образуются головки черного цвета (спорангии). В них находятся споры.
5. Обратить внимание на препараты и сроки лечения заболеваний вызванных патогенными грибами.

8. Материалы для самоконтроля:
1. В клинику поступил ребенок, на слизистой оболочке щек, неба и языка которого выявлен точечный налет белого и желтоватого цвета характерный для кандидоза. Какой материал необходимо взять для исследования?

А. Пленочный налет из разных участков ротовой полости.

B. Волосы и ногти

C. Кровь

E. Мочу
2. При изучении культуральных свойств возбудителя выявлен рост на плотной питательной среде в виде S-форм колоний, матовых, с характерным запахом дрожжей. Какой возбудитель имеет характерные свойства роста?

1. 
   - Стафилококк
   
2. 
   - Стрептококк
   
3. 
   - Кишечная палочка
   
4. 
   - Кандиды
   

3. Какие питательные среды используют для изучения культуральных свойств кандид?

A. - МПА

B. - *Сабуро

C. - КА

D. - ДДС

А. - Epydermophyton floccosum

В. - Microsporum canis

С. - Trichophyton schonleini

D. - Trichophyton violaceum
5. В отделение интенсивной терапии поступил ребенок с тяжелой формой пневмонии. Антибактериальная терапия результатов не дала. При посеве мокроты на среду Сабуро при 20º С образовались белые пушистые колонии. При микроскопии нативного препарата обнаружен септированный мицелий. Органы спороноше­ния состоят из терминального пузырька (головки) с вырастающими из него равномерно расположенными бутылочковидными структурами – стеригмами. Такую морфологию имеют грибы рода


A. Aspergillus 

B. Fusarium 

C. Pеnicillum 

D. Mucor

E. Rhizopus

Автор: доцент, к.мед.н. Сорокоумова Л.К.
Методическая разработка

для подготовки и работы на лабораторном занятии № 23

для студентов фармацевтического факультета (специальность фармация)
1.Тема занятия: Общая характеристика клинической микробиологии. Микробиоценозы здоровых и патологически измененных биотопов тела человека. Дисбактериоз. Коррекция дисбактериоза эубиотиками.

2. Цель занятия:

2а. Цель общая: Определить роль нормальной микрофлоры в функционировании организма человека. Познакомиться с понятием дисбактериоза и принципами его коррекции.

0. 
   2б. Цель конкретная:
   

1. 
   Уметь дать оценку микробиоценоза в каждой экосистеме тела человека.
   
2. 
   Оценить роль нормальной микрофлоры в защите организма человека от патогенных микроорганизмов.
   
3. 
   Познакомиться с методами диагностики дисбактериоза.
   
4. 
   Познакомиться с группами препаратов, которые используются для коррекции дисбактериоза.
   

1. Знания главных морфологических групп бактерий.

2. Знания факторов патогенности микроорганизмов.

3. Владение бактериологическим методом исследования.

1. Главные представители микрофлоры:

а) ротовой полости;

б) кожи;

г) мочеполовой системы;

д) желудочно-кишечного тракта

2. Роль нормальной микрофлоры в жизнедеятельности организма.

3. Возрастные изменения микрофлоры полости рта.

4. Дисбиоз, факторы, которые его обуславливают (возникновение, диагностика).

5. Пробиотики. Использование.

5. Содержание темы:

Схема лабораторной диагностики дисбиоза на примере исследования кишечного содержимого.

Материал Кишечное содержимое

↓

Микроскопическое исследование Посев 0,1мл в разведении

Питательную среду (Эндо,

Плоскирева, Сабуро, тиогликолевую,

кровянный МПА, и др.)

↓

Подсчет колличества колоний на

определение в 1мл (1г) материала

↓

Идентификация микроорганизмов по

ферментативным признакам, антигенному строению ↓

Определение характера дисбиоза

6. Практическая работа:

1. Провели исследование состава микрофлоры зубного налета. Приготовили микропрепарат и окрасили по методу Грама. Необходимо обратить внимание на таксономическое разнообразие представленной нормофлоры.

2. В готовых микропрепаратах, приготовленных с кишечного содержимого новорожденных, взрослых определили наличие грамположительных и грамотрицательных бактерий, грибов рода Сandida.

3. Познакомились с основными группами современных медицинских препаратов, которые используются для коррекции дисбиоза. Сейчас предлагается широкий выбор препаратов для поддержки та восстановления состава и функциональной активности физиологических микробных систем человека. Рациональное их использование является перспективным и направлено на улучшение здоровья населения.

И. Л. Дикий Микробиология / Дикий И. Л. и соавт. // К. 2007. – С. 236– 250.

В.П.Широбоков Мікробіологія, вірусологія, імунологія, В. 2010. – С. 807-837.

Практична мікробіологія.⁄ С.І.Климнюк та співавт. ⁄⁄ Тернопіль. Укрмедкнига, 2004. – С. 807-834.

К.Д.Пяткін, Ю.С.Кривошеїн. Мікробіологія, К., 1992. – С. 84-89.

О. К. Поздеев Медицинская микробиология //М. 2006. – С. 121-126, 551-561.

Мікробіологія, вірусологія, імунологія, інфекційні хвороби. Словник/ За ред Г.К.Палія, В.І.Палія. – Київ: Здоров'я, 2004.

Збірник завдань для підготовки до тестового екзамену з природничо-наукових дисциплін «Крок-1. Загальна лікарська підготовка» /Кол.авторів; За ред. В.Ф.Москаленка та співавт. – К.:Медицина, 2004.
8. Материалы для самоконтроля:

Приложение 1:

1.Представители нормальной микрофлоры ротовой полости:

А. S. mitior

В. S. Saligarsius

С. S. Sangues

D. S. Mutans

E. все ответы правильные

1. 
   Больному провели гастроскопию и в посеве желудочного сока получили несколько микроорганизмов. Какие из микроорганизмов не являются представителями нормальной микрофлоры желудка?
   

в. кампилобактерии

г. стафилококки

д. фузобактерии

е. хеликобактер
3. С помощью длинного кишечного зонда провели исследование пристеночной флоры верхних отделов тонкого кишечника. Изолировано несколько микроорганизмов. Какие из них не являются представителями нормальной микрофлоры тонкого кишечника?

а. ентерококк

б. лактобактерии

в. бактероиды

г. Сandida

д. гарднерелла

а. E. сoli

б. цитробактер

в. ентеробактер

г. протей

д. клебсиелла

а. является антагонистом гнилостной микрофлоры

б. продуцирует молочную и уксусную кислоты

в. продуцирует коллицины

г. принимает участие в метаболизме белков

д. все вместе

1. Врач получил результаты бактериологического исследования, в котором найдены клостридии, кишечная палочка, ентерококки. С какой части кишечника был взят материал для исследования?

1. 
   желудок
   
2. 
   тонкий кишечник
   
3. 
   толстый кишечник
   
4. 
   двенадцатипалая кишка
   
5. 
   еюнум
   

2. 
   У больного, которому был проведен курс антибиотикотерапии, в связи с обострением хронической пневмонии, появились диспептические явления, метеоризм, понос. Бактериологическое исследование испражнений показало отсутствие E. coli, Уменьшение количества лакто- и бифидобактерий. Какие препараты стоит назначить больному?
   

B Антибиотики и эубиотики

C Сульфаниламиды и эубиотики

D Антибиотики и витамины

E Сульфаниламиды и витамины

3. 
   Больной, которая длительное время принимала противомикробные препараты, провели бактериологическое исследование содержимого влагалища и определение рН. Было диагностировано снижение количества лактобактерий и щелочная среда. Что необходимо назначить больной для восстановления нормальной микрофлоры влагалища?
   

В. Суппозитории с антибиотиками

С. Раствор перманганата калия

Д. Сульфаниламидные препараты

Е. Суппозитории с антисептиком
4. Больному на онкопатологию удалено практически весь толстый кишечник. Какие препараты необходимо назначить больному для замещения функции микрофлоры толстого кишечника?

А. Витамины

В. Антистафилококковая плазма

С. Поливалентный бактериофаг

Д. Антибиотики

Е. Сульфаниламиды

А. Сульфаниламиды

В. Эубиотики

С. Интерферон

Д. Противогрибковые препараты

Е. Цефалоспорины

А. Азотобактерии

В. Клебсиеллы

С. Бифидумбактерии

Д. Энтеробактерии

Е. Сарцины

А. Норма

С. II степень

Д. ІII степень

Е. Полученных данных не достаточно для оценки дисбактериоза

А. Антибиотики, избирательно угнетающие рост стафилококков и дрожжеподобных грибов

В. Включение молочнокислых продуктов в рацион питания

С. Бифидумбактерин

Д. Колибактерин

Е. Лактобактерин

А. Бактериофаг

В. Антибиотик

С. Интерферон

Д. Эубиотик

Е. Поливитамины

А. Заменить антибиотики и провести фаготерапию

В. Отменить антибиотики и назначить сульфаниламидные препараты

С. Отменить антибиотики и назначить эубиотики. Давать энтеросорбенты и иммуномодуляторы

Е. Давать нитрофурановые препараты и иммуностимуляторы.

Автор: доц., к.м.н. Жоряк Е. И.


Методические рекомендации для самостоятельной работы

студентов фармацевтического факультета

при подготовке к практическому занятию № 24
1. Тема занятия: Основы санитарной микробиологии. Санитарно-микробиологическое исследование воды, почвы, воздуха. Фитопатогенные микроорганизмы. Микробная контаминация лекарственного сырья, готовых лекарственных препаратов.

2. Цель занятия:

2а. Общая: уметь проводить бактериологическое и вирусологическое исследования почвы, воды, воздуха; выучить биологические методы определения микробного загрязнения готовых лекарственных форм; значение фитопатогенных микроорганизмов при производстве и хранении лекарственного растительного сырья.

2б. Конкретная: знать санитарно-показательные микроорганизмы для воды, почвы и воздуха; уметь определить общее микробное число, коли-титр и коли-индекс воды, общее микробное число для почвы, ознакомиться с методами определения общего микробного числа для воздуха, знать о следствиях микробной деградации лекарственных препаратов, уметь определять стерильность готовых лекарственных препаратов, уметь определять микробное загрязнение готовых лекарственных форм, знать требования к микробной чистоте готовых лекарственных препаратов в зависимости от назначения и способа введения (категории).
3. Базовые знания, навыки, необходимые для изучения темы.

1. Возбудители инфекционных заболеваний, передающихся через воздух.

2. Возбудители инфекционных заболеваний, передающихся через воду.

3. Возбудители инфекционных заболеваний, передающихся через почву.

4. Бактериологический метод исследования.

5. Культуральные свойства кишечной палочки.

1. Определение, цель и задачи санитарной микробиологии. Санитарно-показательные микроорганизмы.

2. Определение микробного числа воды, коли-титра, коли-индекса.

3. Постоянная микрофлора и патогенные микробы лечебного учреждения. Санитарно-показательные микробы (патогенные стафилококки, стрептококки)

4. Патогенные микробы, которые находятся в почве. Определение микробного числа почвы.

5. Определение санитарного состояния почвы (коли-титр, коли-индекс, перфрингенс-титр)

6. Фитопатогенные микроорганизмы. Классификация заболеваний растений, вызванных фитопатогенными микроорганизмами.

7.Значение фитопатогенов в производстве и хранении лекарственных растительных препаратов. Понятие о микробной деградации лекарственных препаратов.

8.Меры по предупреждению заболеваний лекарственных растений при культивировании и хранении лекарственного растительного сырья.

9.Микробное загрязнение готовых лекарственных форм. Источники загрязнения, признаки микробной контаминации.

10.Требования к микробиологической чистоте готовых лекарственных форм в зависимости от назначения и формы введения (категории).

11.Методы определения микробного загрязнения лекарственных препаратов (метод прямого высевания, метод мембранной фильтрации).

12. Меры по предупреждению микробного загрязнения лекарственных препаратов. Санитарно-эпидемический режим в аптеках.
5. Содержание темы.

Для определения санитарно-гигиенического состояния разных объектов окружающей среды, воды, воздуха, почвы, продуктов питания и др. проводятся бактериологические исследования, целью которых есть опредиление эпидемической безопасности.

Микробное загрязнение определяется микробным числом. Микробное число - это количество микроорганизмов, которое находится в единице объема (1 мл воды, 1 г почвы, 1 м3 воздуха). Определение санитарно-показательных микроорганизмов проводится по двум показателям: титру и индексу. Титром называется та минимальная масса или объем, в котором есть данные бактерии; индексом - количество санитарно-показательных бактерий, которые находятся в 1 л жидкости, 1 г плотного вещества,1 м3 воздуха.

Микрофлору окружающей среды изучает санитарная микробиология, задача которой это разработка методов микробиологических и вирусологических исследований почвы, воды, воздуха, предметов быта, пищевых продуктов и др.

В почве необходимы для развития бактерий питательные вещества и влага, в результате чего их количество в 1 г почвы достигает огромных количеств: В 1 г почвы содержится 1-10 млрд бактерий.

Обсемененность почвы микроорганизмами зависит от степени загрязнения его фекалиями и мочой, а также от характера обработки и удобрения.

Патогенные, которые не образуют спор, бактерии вследствие недостатка нужных питательных веществ, а также в результате пагубного воздействия света, высыхания, бактерий-антагонистов и фагов сохраняются в почве от нескольких суток до нескольких месяцев.

Конечно, почва есть неблагоприятной средой для большинства патогенных видов бактерий, вирусов, грибов, простейших. Однако, как фактор передачи ряда возбудителей инфекционных заболеваний она играет важную роль. В почве долго остаются жизнеспособными споры бацилл сибирской язвы, клостридии столбняка, анаэробной инфекции, ботулизма и многих других микроорганизмов. При благоприятных условиях споры осуществляют полный цикл развития: летом они прорастают в вегетативные формы, а затем снова образуют споры.

В почве живут различные грызуны, на которых паразитируют переносчики возбудителей чумы, туляремии, геморрагической лихорадки, энцефалита, зоонозного кожного лейшманиоза и т.д. В почве проходят определенную стадию цисты простейших (амеб, балантидия и др.). Особенно велика роль почвы в распространении гельминтозов (аскаридоза, трихоцефалеза, анкилостомидозу и др.). В почве живут грибы, вызывающие алиментарно-токсическую алейкию, эрготизм, аспергиллез, пеницилиоз, гистоплазмоз, хромомикоз и др.

Выживание в почве энтеровирусов колеблется в широких пределах (15-90 суток), оно зависит от вида грунта, его влажности, температуры. Энтеровирусы долго сохраняются на овощах, выращенных на участках, орошаемых сточными водами. Сырые овощи с полей орошения могут быть фактором заражения в результате попадания энтеровирусов на их поверхность.

Важным показателем санитарного состояния является общее количество имеющихся в нем сапрофитов, термофильных микроорганизмов, энтеробактерий (Е. соli, протей), анаэробов (С. реfringens и др).

Грунт считают чистым, если его коли-титр * составляет 1,0 и выше, титр С. реfringens - 0,01 и выше, а количество термофильных бактерий в 1 г достигает 100-1000. По эпидемиологическим показаниям почву исследуют на наличие патогенных микроорганизмов (сальмонеллы, шигеллы, энтеровирусы), спор клостридий столбняка, ботулизма, сибирской язвы, гистоплазм и др.

В связи с определенной эпидемиологической ролью почвы как фактора распространения некоторых инфекционных заболеваний животных и человека санитарно-противоэпидемическая практика охватывает осуществление комплекса мероприятий, направленных на защиту почвы от загрязнения и инфицирования его патогенными видами микроорганизмов.

Микрофлора воды рек зависит от степени их биологического загрязнения и качества очистки сточных вод, которые опускают в русла рек.

Степень обсемененности воды организмами принято выражать сапробность, под которой понимают совокупность живых существ, обитающих в водах с большим скоплением животных или растительных остатков. Различают четыре зоны сапробности.
П о л и с а п р о б н а я з о н а - очень загрязненная вода, бедная кислородом и богата органическими соединениями. Количество бактерий в 1 мл достигает 1 млн и более, преобладают Е. соli и анаэробные бактерии, которые вызывают процессы гниения и брожения.
В м е с о с а п р о б н о й з о н е (зона умеренного загрязнения) минерализуются органические вещества с интенсивным окислением и выраженной нитрификации. Количество бактерий в 1 мл составляет сотни тысяч.
О л и г о с а п р о б н а я з о н а характерная для чистой воды. Количество бактерий в ней незначительно, в 1 мл насчитывается несколько десятков или сотен; Е. со1i в этой зоне нет.
К а т а р о б н а я з о н а - зона очень чистой воды (особенно в осенне-зимний период), она расположена вдали от населенных пунктов и берегов.
В зависимости от интенсивности загрязнения водоемов в них могут быть и некоторое время сохраняться жизнеспособными патогенные бактерии. Так, например, в водопроводной, морской, речной и колодезной воде сальмонеллы могут быть от 2 суток до 3 месяцев, шигеллы - 5-9 суток, лептоспиры - 7-150 суток. Холерный вибрион выживает в воде рек, морей течение нескольких месяцев, возбудитель туляремии - от нескольких суток до 3 месяцев.

Водопроводную воду считают пригодной для употребления, если общее количество бактерий в 1 мл составляет 100, условным - при 100-150, загрязненной - при 500 и более. В воде колодцев и открытых водоемов количество бактерий в 1 мл не должно превышать 1000. Кроме того, качество воды определяют по наличию в ней Е. со1i.

Показатель биологического загрязнения воды оценивают по коли-индексу и коли-титру. Водопроводная вода должна иметь коли-индекс в пределах 2-3, а когда-титр - 300. Для воды шахтных колодцев допустимы коли-индекс не более 10, а когда-титр не менее 100.

Поскольку Е. со1i постоянно живет в кишечнике человека и теплокровных животных и имеет высокую устойчивость против температурных колебаний и других факторов окружающей среды, количество ее вместе с коли-титром и коли-индексом является показателем степени биологического загрязнения воды, сточных вод, почвы и других объектов.

Вода мощный фактор передачи возбудителей многих инфекционных заболеваний: брюшного тифа, сальмонеллезного гастроэнтерита, холеры. дизентерии, лептоспироза, туляремии, кампилобактериоза, амебиаза, энтеровирусных инфекций (полиомиелит, гепатит А и др.).

Энтеровирусы зачастую выделяются из воды летом и осенью, когда количество вирусоносительства увеличивается в 2-3 раза по сравнению с осенне-зимним периодом. Пассивное и длительное выделение энтеровирусов из кишок больных и вирусоносителей обусловливает значительное обсеменение хозяйственно-бытовых сточных вод (30-85%). Энтеровирусы определали в водоемах, особенно при коли-титре 0,1 и ниже. Их находили и в воде, которая прошла соответствующую очистку и обеззараживание.

Во время посещения бассейнов с нехлорированной водой возможно заражение людей лептоспирозом, конъюнктивитом, вызываемых хламидиями, стафилодермии, эпидермии.

Обеззараживание воды, инфицированной патогенными бактериями и токсинами, делается химическими методами с последующим кипячением.

Микрофлора воздуха очень разнообразна. Она состоит из самых разнообразных видов микроорганизмов, поступающих в связи с почвы, растений и живых организмов. В воздухе часто случаются пигментные сапрофитные бактерии (микрококки, различные сарцины), бациллы, актиномицеты, плесневые, дрожжевые грибы и др.

Количество бактерий в воздухе колеблется в больших диапазонах от нескольких особей до многих десятков тысяч экземпляров в и м3; а в промышленных городах в 1 см с воздуха оказывается огромное количество бактерий. В лесу, особенно хвойном, бактерий в воздухе очень мало, потому что на них губительно действуют летучие вещества растений - фитонциды, обладающие бактерицидными свойствами. Спороносные виды и плесневые грибы были обнаружены на высоте 20 км. В 1 г пыли есть к 1 млн бактерий.

В зависимости от времени года качественный и количественный состав микрофлоры воздуха меняется.

Для воздуха закрытых помещений санитарно-показательными микроорганизмами являются стафилококки, Зеленя стрептококки, а о прямой эпидемиологическую опасность заключают по количеству гемолитических стрептококков и стафилококков.

Общее количество бактерий в операционном отделении до начала операции не должна превышать 500 в 1 м с воздуха, а после операции 1000; патогенных стафилококков и стрептококков не должно проявляться в 250 л воздуха. В воздухе операционных роддомов (отделений) до начала работы допускается не более 20 колоний сапрофитов, образовавшихся при осадке бактерий воздуха на чашке с МПА в течение 30 мин.

Ультрафиолетовое облучение губительно действует на микроорганизмы, но если последние адсорбированные на частицах пыли или других веществ, то бактерицидное действие ультрафиолетового излучения неэффективна.

Количество микроорганизмов в рабочих и жилых помещениях тесно связана с санитарно-гигиеническим режимом. При скоплении людей, плохой вентиляции, слабом естественном освещении, неправильном уборке помещений количество микроорганизмов значительно увеличивается. Сухая уборка, жидкое мытье полов, использование грязных тряпок и щеток, сушки их в том же помещении создают благоприятные условия для накопления в воздухе микроорганизмов.

Вирусы могут распространяться воздушно-пылевым и воздушно-капельным путем. При чихании, кашле, разговоре больной человек выделяет в окружающую среду на расстояние 1-1,5 м и более вместе с капельками слизи, мокроты патогенные вирусы. Человек вдыхает в сутки в среднем 12 000-14 000 л воздуха, причем 99,8% микроорганизмов, в нем, задерживаются в дыхательных путях. Бактериальный аэрозоль (до 60000 капель разного размера), образующийся естественным путем в пространстве носовой части глотки, при чихании и кашле выделяется в воздух.

Больше всего бактерий выделяется при чихании, меньше - при кашле, еще меньше - при разговоре. Характер бактериального аэрозоля - зависит от вязкости секрета, выделяемого из дыхательных путей. У бактериовыделитель образуется наиболее концентрированный аэрозоль, состоящий из бактериальных капель размером от 1 до 2000 мкм. Крупные капли величиной от 100 до 2000 мкм выделяются на расстояние 2-3 м и более и быстро оседают. Мелкие капельки бактериального аэрозоля (1-10 мкм) могут долго (в течение нескольких часов и суток) быть во взвешенном состоянии.

Воздух - неблагоприятная среда для бактерий и вирусов. Отсутствие питательных веществ, влаги, оптимальной температуры, пагубное воздействие солнечных лучей и высушивание не создают условий для их сохранения. Однако и сравнительно короткого пребыванием микроорганизмов в воздухе вполне достаточно для того, чтобы вызвать передачу патогенных видов микроорганизмов от больных лиц здоровым. Через воздух могут передаваться вместе с каплями слизи и мокроты при чихании, кашле, разговоре возбудители болезней - скарлатины, дифтерии, коклюша, стафилококковой, стрептококковой и менингококковой инфекций, туберкулез, грипп, корь, натуральной и ветряной оспы, герпеса, эпидемического паротита, краснухи , аденовирусной и других заболеваний. Воздушно-пылевым путем распространяются споры сибирской язвы, столбняка, гистоплазмоза, грибов, возбудители Ку-лихорадки, орнитоза и др.

Лабораторные исследования воздуха делают для определения количественного и качественного состава его микрофлоры. Разработаны ускоренные методы обнаружения (индикации) микроорганизмов в окружающей среде (почве, воздухе, воде).

Пробы для вирусологического исследования воздуха берут с помощью улавливая жидкости (сахарный бульон или гидролизат лактоальбумин), которой заражают куриные эмбрионы (для выделения вируса гриппа) или клетки культуры Неlа (для выявления аденовирусов). Идентификацию выделенных вирусов делают по общепринятой методике.

Для обеззараживания воздуха закрытых помещений (больниц, детских садов), в которых скученно много людей, используют ультрафиолетовое, кварцевое облучение, бактерицидное пару и аэрозоли дезинфицирующих веществ, фильтрации воздуха через различные материалы, интенсификацию процессов обмена воздуха в помещениях и другие способы, которые обеспечивают устранение или уменьшения возможности распространения возбудителей вирусных инфекций аэрогенным путем.

Бактерицидным действием обладают аэрозоли ряда химических веществ: триетиленгликолю, молочной кислоты, гексилрезорцину, смеси эфирных масел, пероксида водорода и др. Однако широкое использование этих средств ограничивается их побочным действием на организм человека. Для обеззараживания воздуха боксов приемных отделений в инфекционных стационарах, детских лечебно-профилактических учреждений, бактериологических лабораторий и для дезинфекции воздуха санитарного транспорта может быть использован перекись водорода.

Определенное значение в распространении возбудителей бактериальных и вирусных инфекций, особенно в детских коллективах, имеют предметы потребления на поверхности которых могут быть патогенные и условно-патогенные микроорганизмы. Не только бактерии, но и вирусы сравнительно долго (от 1 до 80 суток) сохраняются на поверхности многих предметов.

Исследование смывов или соскобов с предметов обихода (столы, игрушки, посуда, столики для пеленания, обеденные столы, кухонный инвентарь и др.) Делают по эпидемиологическим показаниям. Выявление в них санитарно-показательных и условно-патогенных микроорганизмов и минимальных количеств енгеровирусив и респираторных вирусов свидетельствует о неблагополучном состоянии обследуемого учреждения.

Выделение энтеровирусов и респираторных вирусов из разных объектов окружающей среды (почва, вода, воздух, предметы) делают с помощью заражения куриных эмбрионов и первичных культур тканей; добытые культуры идентифицируют с помощью РГА, РН, РСК.

Предметы обихода обеззараживают физическими и химическими методами (кипячение, мытья горячей водой, ультрафиолетовое облучение, обработка перекисью водорода, растворами хлорамина, гексилрезорцину).

Существует большая группа микроорганизмов, способных контаминировать и вызывать заболевания у растений. Такие микроорганизмы называются фитопатогенными. Они широко распространены в природе, к фитопатогенам относят более 40 000 видов вирусов, грибов, бактерий.

Среди них значительную часть составляют те, которые имеют признаки облигатных паразитов (способны размножаться в организме растений и только, быстро погибают в почве). Среди них значительную часть составляют те, которые имеют признаки облигатных паразитов (способны размножаться в организме растений и только, быстро погибают в почве).

Примеры бактериозов растений: гниль корней женьшеня (Erwinia araliavora) - красно-коричневые пятна, на корнях листья растений приобретает желто-коричневой полосатости и растение погибает. Бактерицидная пятнистость листьев и коробочек опийного мака (ксантомонады).

Вирусные заболевания растений чаще всего распространяются насекомыми, которые питаются соком растений; выявляются заболевания пятнистости или мозаичным окраской листьев, связанным с разрушением возбудителей хлоропластов (мозаичная болезнь табака, тюльпаны Рембрандта)

В распространении фитопатогенных микоплазм ведущую роль играют насекомые. Среди растений, которые используются в медицине, микоплазмы могут поражать барвинок, черный паслен, дурман, белизну. Среди других культурных растений следует назвать картофель, томаты, виноград, пшеницу. Среди первых признаков заболевания - потеря зеленой окраски сосудами инфицированного письма, растения. Постепенно приобретают карликовости и теряют способность к плодоношению.

Большое значение для сохранения лечебных свойств растительного сырья играют условия хранения. Большинство фитопатогенных микроорганизмов плохо выдерживают высушивание. Поэтому ведущую роль в условиях хранения играют t и влажность воздуха.

Оптимальные условия: влажность 30-40 %%, t- 18-20 С.

При нарушении этих условий быстро портятся богатые сахаристыми веществами ягоды и корневища. Установлено, что измельченные листья наперстянки в результате увлажнения и действия микрофлоры быстро теряет более 50% своей специфической активности.

Выделяют несколько типов заболеваний растений, вызванных фитопатогенных микроорганизмов:

1) увядания - поражение корневой и проводящей системы растений, при котором возбудитель локализуется в сосудах и вызывает механическую закупорку;

2) гнили - размягчение и разрушение тканей растения под действием ферментов м / о (целлюлозы, Пектиназа и др.);

3) пятнистости - отмирание четко отделенных от непораженных тканей частей листовых пластинок;

4) поволоки - появление на листьях поверхностных разного цвета пленок, которые легко стираются;

5) пустулы - выпуклые образования в тканях растений, которые несут в себе споры фитогена, покрытые эпидермисом или перидермы;

6) опухоли - местное увеличение объема стволов, корней и корневищ, обусловленное вызванной м / о гиперплазией тканей.

Наличие указанных выше перечисленных проявлений заболевания следует учитывать в процессе заготовки лекарственного сырья, поскольку содержание действующего вещества в пораженных растениях может изменяться, а наличие продуктов жизнедеятельности фитопатогенных бактерий оказывать неблагоприятное воздействие на организм человека.

Среди возбудителей заболеваний растений наибольшую группу составляют грибы. Фитопатогенные грибы обнаружены среди оомицетов, аскомицетов, зигомицеты, базидиомицетив, дейтеромицетов.

Например, грибы рода Ramularia могут поражать насаждения лекарственных растений: мяты, ромашки, валерианы и др.

Второй по численности группой фитопатогенов являются бактерии. Заболевания растений, вызываемые бактериями, называются бактериозами. Бактериозы чаще проявляются в виде гнили и увядания. Среди возбудителей бактериозов преобладают гр (-) аэробные подвижные палочки из родов псевдомонад, ксантомонад, агробактериями и эрвиний.

Для готовых лекарственных средств из лекарственного растительного сырья Государственной Фармакопее Украины установлены нормативы микробной загрязненности (категория 4)

А. Растительные лекарственные средства, состоящие из цельных дробленых или растертых в порошок растительных компонентов, в которых перед употреблением добавляют кипящую воду могут содержать не более 107 КОЕ / г бактерий и не более 105КУО грибов / ч.

Не допускаются наличии не более 102 КОЕ E. coli / г или мл.

Б. Для лекарственных растительных средств, в которых перед употреблением не добавляют кипящую воду:

не более 105 КОЕ бактерий / г

не более 104 КОЕ грибов / ч

Кроме того, не должно быть никакой E. coli в 1 г / мл препарата и не должно быть никакой Salmonella в 10 г (мл) препарата.

Микробного загрязнения подвергаются также разнообразна химическое сырье, готовые лекарственные формы. Например, спорообразующие м / о способны длительное время сохранять жизнеспособность даже в чистом этаноле.

С сыпучих материалов, используемых в аптеках, всегда богаты м / о тальк, крахмал, сахара, желатина. С мягких материалов значительную микробную загрязненность часто несут ланолин, кондитерские Саломасы, вазелин. Благодаря высокой ферментативной активности м / о способны изменять необходимые для изготовления лекарств свойства этих материалов и даже образовывать токсичные продукты для организма человека (этот процесс носит название микробной деградации).

Среди готовых аптечных лекарственных форм микробной порче зачастую подлежат жидкие лекарственные формы, содержащий сахарный сироп.

Признаки порчи:

-изменение цвета

-помутнение

-образование пленок

-образование осадка

-появление кислотного запаха

Наиболее суровые требования, степени микробной чистоты оказываются к растворам для парентерального ввода и глазных капель. Эти препараты должны быть стерильными. В условиях промышленной фармации согласно международным требованиям надлежащей производственной практике лекарственных средств технологический процесс изготовления таких лекарственных средств подлежит валидации.

Валидация - моделирование технологического процесса изготовления лекарственного средства с использованием промышленных помещений, серийного оборудования, постоянного рабочего персонала с контролем качества готового продукта, которое гарантирует стабильное получение в дальнейшем серийной качественной продукции.

Микробиологическая валидация технологического процесса получения стерильных лекарств предусматривает имитацию изготовления лекарственного средства на технологической линии с использованием вместо лекарственного сырья питательных сред от стадии заполнения первичных емкостей до стадии получения конечной упаковки. В серии изготовленной таким образом модели лекарственного средства допускается проростом не больше 0,1% упаковок продукции.

Готовая продукция, к которой оказываются требования стерильности, подлежит испытанию на стерильность.

Для испытания с каждой серии лекарственного средства, которая насчитывает 500 и больше упаковок произвольно отбирается 2% флаконов и контейнеров. Содержание проверяют на стерильность одним из следующих способов:

1) 1) метод прямого посева

2) метод мембранной фильтрации

1) - содержание вносят в жидкую тиогликолиевую среду для выявления бактерий и жидкую среду Сабуро для выявления грибов.

Количество препарата не больше 10% объема среды.

Инкубация - 14 дней при t = 35C. Серия лекарственного средства считается выдерживает испытания на стерильность, если в одной из проб при визуальном контроле не обнаруживается признаков роста.

2) - используют целлюлозно-нитратные или целлюлозно-ацетатные мембранные фильтры с размерами пор НЕ больше 0,45мкм и d = 50 мм.

В стерильную фильтрационную установку вносят лекарственный препарат и фильтруют. Немедленно после фильтрации фильтр в асептических условиях разрезают пополам и вносят по 1 половине в тиогликол. б-н и жидкую среду Сабуро.

Инкубация 14 дней при t = 35C (тиоглик. Б-н)

- "-" - "- T = 25C (среда Сабуро)

Если лекарственное средство обладает антимикробными свойствами, то фильтр перед внесением в среду отливают путем фильтрации через него тройной (от количества объема препарата) стерильной 0,9% NaCl или стерильного питательной среды.

Готовые лекарственные формы, не применяют парентерально, не является глазными каплями и не предназначены для внесения в раны и полости тела, могут быть нестерильными.

Допустимые нормы микробного загрязнения для нестерильных лекарственных средств:

1) для местного применения и применения в респираторном тракте

- Не более 102 аэробных бактерий и грибов суммарно в 1 г (мл).

Не должно быть Ps. Aeruginosa, St aureus и не более 10 КОЕ Enterobacteriocea

2) для орального и рект. применения - не более 103 КОЕ анаэробных бактерий / г или мл; не более 102 КОЕ грибов / г или мл.

Не допускается наличии E. coli.

Подробные требования к микробиологической чистоты субстанций и вспомогательных веществ, а также бактериологические методы исследования микробиологического загрязнения изложенные во II и В разделах Государственной Фармакопеи Украины.

С целью предотвращения микробной контаминации лекарств в аптечных условиях в аптеках соблюдаются санитарно-эпидемиологического режима.

"Инструкцией по санитарно-эпидемиологическому режиму аптек" предусмотрены жесткие требования к:

- Размещение и отделка аптечных помещений и оборудования

- Уборка и ухода за оборудованием аптек

- Личной гигиены персонала и порядка его периодического медицинского обследования

- Получение, транспортировка и хранение воды очищенной

- Технология изготовления лекарств.

В Инструкции подробно расписана система противомикробных мероприятий (способы обеззараживания воздуха, дезинфекции помещений и оборудования, мойки и стерилизации посуды, вспомогательных материалов контроля эффективности обеззараживания).

Контроль за соблюдением санитарно-эпидемиологического режима в аптеках осуществляют бактериологические отделы Обл. СЭС путем бактериологического обследования не реже 2 раз в квартал:

- Воды очищенной и воды для инъекций

- Лекарственных средств

- Аптечной посуды, пробок и других вспомогательных материалов

- Инвентаря и оборудования

- Рук и одежды персонала

- Воздух.