6. Практические работы, которые выполняются на занятии
6.1. Определить микробное число воды. Подсчитать количество выросших колоний при посеве исследуемой воды на МПА с помощью счетной сетки и умножить на разведение воды (х10, х100 и т.д.). Дать санитарно-гигиеническую оценку исследуемой воды.
6.2. Определение микробного числа воздуха по методу Коха. Как показали исследования В.Л.Омельянського, на поверхности среды площадью 100 см2 оседает за 5 минут столько микробов, сколько их находится в 10 л воздуха. Например, на чашке с МПА при 5 мин экспозиции выросло 32 колонии, нужно определить количество микробов, находящихся в 1 м3 воздуха, применяя формулу Омельянського. Площадь чашки равна: 3,14 * 52 = 78, 5 см2. Зная площадь чашки и количество выросших колоний, можно определить количество микробов (х), которые выросли при данной экспозиции на поверхности среды площадью 100 см2:
32 * 100
х = ----------------- = 40
78,5
Это количество микробов находилась в 10 л воздуха, а в 1 м3 (1000 л) их будет: (40 * 1000): 10 = 4000.
Дать санитарно-гигиеническую оценку воздуха закрытых помещений для зимнего режима.
6.3. Определение микробного числа воздуха по методу Кротова. Чашку с МПА поместить в аппарат Кротова и провести посев 10-20 л воздуха. После инкубации провести определение микробного числа воздуха.
6.4. В демонстрационном опыте провести определение коли-титра и коли-индекса водопроводной воды по методу мембранных фильтров.
6.5.Провести испытание на стерильность препарата для парентерального введения, который не имеет антимикробного действия, методом прямого высевания.
-
В асептических условиях открыть ампулу с препаратом (водой для инъекций).
-
Стерильным шприцом отобрать 1 мл препарата.
-
Высеять 0,5 мл препарата в пробирку с 5 мл жидкой тиогликолевой среды (для выявления бактерий).
-
Высеять 0,5 мл препарата в пробирку с 5 мл жидкой среды Сабуро (для выявления грибов).
-
Посевы поместить в термостат при температуре 35оСи 25оС.
6.6. Учесть результаты исследования на стерильность препарата для парентерального введения, поставленного заранее. Лекарственный препарат отвечает требованиям стерильности, если на протяжении 14 суток инкубирования не появилось признаков видимого роста.
6.7.Провести исследование микробиологической чистоты лекарственного средства для перорального приема методом прямого высевания.
-
Стерильной пипеткой отобрать 0,2 мл препарата.
-
0,1 мл препарата высеять на поверхность пластинчатого агара в чашке Петре. Равномерно распределить жидкость по поверхности с помощью стерильного шпателя.
-
0,1 мл препарата высеять на поверхность плотной среды Сабуро. С помощью стерильного шпателя равномерно распределить препарат по поверхности.
-
Посевы поместить в термостат при t 350С для выявления бактерий и при 250С для выявления грибов.
6.8.Учесть результаты определения общего микробного числа для нестерильных лечебных средств для перорального применения в демонстрационном опыте. Сравнить с требованиями, сделать выводы.
Требования: в 1 мл или 1 г - не больше 1000 аэробных бактерий; не больше 100 грибов.
7. Рекомендованная литература:
7а. Основная:
2. К.Д. Пяткин, Ю.С. Кривошеин Микробиология М. 1980 (рос)
3. В.Д. Тимаков Микробиология М. 1983 (рос) с. 124-134
4.А.И. Коротеєв С.А. Бабич Медицинская микробиология, иммунология и вирусология Санкт - Петерб 2002 (рос) с. 107-118
5.И.Л. Дикий, И.Ю. Холуняк, Н.С. Шевелёва, М.Ю. Стегний, Микробиология Харк. 1999 (рос) с. 143-147
7.Л.Б. Борисов, Руководство к практическим занятиям по микробиологии М. 1984 (рос) с. 81-95
8.М.Н. Лебедева, Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии М. 1973 (рос) с. 107-115
7б. дополнительная:
Палий Г.К., Палий В.Г. Микробиология, вирусология, иммунология, инфекционные болезни. Словарь. Здоров”я, 2007.- 292 с.
Дикий И.Л., Холупяк И.Ю., Шевелева Н.Е. и др. Микробиология: Учебник для студентов фармацевтических вузов и фармацевтических факультетов медицинских институтов, 1999. - С. 159-165.
Дикий И.Л., Холупяк И.Ю., Шевелева Н.Е., Стегний М.Ю. Микробиология: Учебник для студентов фармацевтических ВУЗов и фармацевтических факультетов медицинских институтов, 2004. - С. 250-259.
Дикий И.Л., Сидорчук И.И., Холупяк И.Ю., Микробиология: Руководство к лаборатор. занятиям: Учебное пособие для студентов фармацевтических ВУЗов и фармацевтических факультетов медицинских институтов, 2004. - С. 178-198.
8. Материалы для самоконтроля:
1. Укажите санитарно-показательные микроорганизмы воды:
а. стрептококк
b.кишечная палочка
c. золотистый стафилококк
d. спорообразующие анаэробы
e. дрожжи
2.Укажите микробное число водопроводной воды:
a.100
b.200
c.300
d.400
e.500
3.Укажите метод определения санитарно-показательных микроорганизмов воды:
a. микроскопический
b. седиментационый
c. аспирационый
d.метод мембранных фильтров
e. биологический
4.Микробиологический контроль качества выпускаемых таблеток для приема
внутрь позволил установить бактериальную обсемененность препарата – 85
КОЕ (колониеобразующих единиц) на 1 г вещества. Какой официально
регламентированный показатель качества санитарно-микробиологического
исследования препарата использован в данном случае?
A Общее микробное число
B Полный ГОСТ санитарно-микробиологического исследования.
C Подсчет разных видов микроорганизмов.
D Изучение коли-индекса в 1 г вещества.
E Определение перфрингенс-титра в 1 г вещества.
5.Ребенку шести месяцев врач назначил лекарственный препарат для приема
внутрь. Какое максимальное количество бактерий и грибов допустимо в 1г этого
препарата в соответствии с требованиями ВОЗ и фармакопеи ?
A Не более 50 бактерий и грибов суммарно
B Не более 500 бактерий и грибов суммарно
C Не более 1000 бактерий и грибов суммарно
D Не более 1000 бактерий и 100 грибов
E Не более 500 бактерий и грибов
Автор: доцент, к.м.н. Сорокоумова Л.К.
Достарыңызбен бөлісу: |