Окраска по Граму (схема метода)
Этап Вещество Время Основной краситель
Генцианвиолет (кристаллвиолет)
1—2’
Фиксатор
Раствор Люголя
1—2’
Дифференцирующее вещество
Спирт этиловый 96°
5—10»
Промывка
Вода
Дополнительный
краситель
Водный фуксин
1—2’
Промывка
Вода
Принцип метода Генцианвиолет связывается с пептидогликаном клеточной стенки. Тол-
стый слой пептидогликана грамположительных бактерий связывает много
красителя, тонкийслой — грамотрицательных — мало. Раствор Люголя фик-
сирует краситель за счет образования комплекса краситель — пептидогликан — йод. При обработке мазка спиртом грамотрицательные микроорганизмы
быстро теряют краситель и обесцвечиваются, а грамположительные оста-
ются окрашенными в синий цвет. Дополнительный краситель окрашивает
грамотрицательные микроорганизмы в красный цвет.