Цель исследования: провести ХТЭ представленных трупных биообъектов - определение в трупной крови концентрации карбоксигемоглобина методом спектрофотометрии.
Приведите схему химико-токсикологического анализа представленных биообъектов, опираясь на методологию системного химико-токсикологического анализа (СХТА).
Лаборатория работает согласно принципам GLP и оснащена аналитическим оборудованием в соответствии с современными рекомендациями TIAFT.
ПРИМЕЧАНИЕ
При решении задачи следует учесть информацию предыдущего занятия:
• информацию о выборе биообъекта, используя знания физико-химических свойств токсикантов, их токсикокинетики и метаболизма;
• информацию о способе пробоподготовки и изолирования (выделения) токсикантов, используя знания физико-химических свойств токсикантов и учитывая Ваш выбор последующих методов анализа;
• выбор методов идентификации и количественного определения токсикантов, учитывая их чувствительность и специфичность, преимущества и недостатки;
• обосновать выбор способа количественного определения, поэтапно изложить схему и процедуру его проведения, привести математические формулы; если необходимо, то произвести вычисления;
• представить интерпретацию полученных количественных результатов;
• дать заключение об обнаружении токсикантов.
Литература
Токсикологическая химия: метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие + СD/ под ред. Н.И. Калетиной. – М., 2008. – 1016 с. Переплет.
Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т.В. Плетеневой. – 2-ое изд. – М., 2008. – 512 с. Переплет.
Крамаренко В. Ф. Токсикологическая химия / В. Ф. Крамаренко. - Киев, «Высшая школа», 1989.- 272 с.
Руководство к практическим занятиям по токсикологической химии/ А.В. Белова.- М., "Медицина", 1976.-231с.
Контрольные вопросы:
Особенности определения оксида углерода (II) в трупных биообъектах.
Подготовка проб к анализу
Предварительные методы исследования (химические)
Обнаружения в трупной крови карбоксигемоглобина с использованием химических методов анализа
Обнаружения в трупной крови карбоксигемоглобина с использованием физико-химических методов анализа
Экспертное заключение (акта судебно-химического исследования).
ПРИЛОЖЕНИЕ
Оптические методы (Калетина Н.И.-Метаболизм и определение токсикантов.-М.-2007.-С.-753-759 )
Объектами исследования на СО являются главным образом кровь пострадавшего и воздух производственных или жилых помещений, содержащий СО.
Диагностическое значение имеет определение НbСО в крови, взятой непосредственно на месте происшествия, так как при оказании пострадавшему первой помощи происходит частичная элиминация угарного газа и снижается содержание НbСО в крови. Спектрофотометрический метод определения СО наиболее распространен, потому что все гемоглобиновые структуры имеют абсорбцию в определенной части спектра.
Количественное определение в крови НbСО спектрофотометрическим методом
При добавлении восстановителя (натрия тиосульфата) к исследуемой крови окси- и метгемоглобин количественно образуют восстановленную форму гемоглобина. Последняя имеет спектр поглощения, представленный на рис. 1.
СО имеет большее сродство к гемоглобину, чем кислород, поэтому комплекс НЬСО не можег быть разрушен тиосульфатом натрия. Таким образом, после обработки тиосульфатом натрия комплекс НbСО проявляется характерным спектром с двумя максимумами поглощения (рис. 8-16, А). Максимальная разница оптической плотности между спектрами А и Б отмечается при длине волны 540 нм, тогда как при длине волны 579 нм оптическая плотность практически одинакова. Процентное содержание СО в крови (см. рис. 1. А) может быть вычислено по формуле, исходя из значения оптической плотности «здоровой», не содержащей НЬСО крови (см. рис. 1. Б), и исследуемого образца (см. рис. 1. В) после добавления тиосульфата натрия:
Рис. 1. Уф-спектры НЬСО (А), восстановленного гемоглобина (Б) и крови паписта при отравлении \ 1 арным I азом ( В).
Интерпретация результатов
• Содержание СО в крови < 5%: норма; для курящих до 10%.
• Содержание СО в крови 10—20%: интоксикация легкой степени.
• Содержание СО в крови 20—30%: интоксикация средней степени.
• Содержание СО в крови 30—40%: интоксикация средней степени, но возможен коллапс.
• Содержание СО в крови 40—50%: интоксикация средней степени, выраженные расстройства дыхания и функций сердечно-сосудистой системы, часто коллапс, возможна смерть.
• Содержание СО в крови 50—60%: интоксикация сильной степени — кома, судороги, возможна смерть.
• Содержание СО в крови 60—90%: смерть
Судебно-медицинская оценка результатов количественного определения карбоксигемоглобина и карбоксимиоглобина
• Содержание НbСО в крови зависит прежде всего от концентрации СО во вдыхаемом воздухе и времени его воздействия.
• Концентрация НbСО тем выше, чем выше парциальное давление СО в альвеолярном воздухе по сравнению с парциальным давлением О,.
• За один и тот же промежуток времени при прочих равных условиях СО поступает в организм тем больше, чем больше минутный объем дыхания.
• Соответствие между концентрацией НЬСО и тяжестью отравления имеется не всегда. Это особенно отчетливо проявляется при групповых отравлениях.
• Смертельная концентрация НbСО в крови составляет в среднем около 60%, но может колебаться от 40 до 80% и более, что обусловлено влиянием внешних условий и особенностями организма.
• Тяжесть острого отравления СО усиливается при низком барометрическом давлении, повышенной влажности, высокой или низкой температуре воздуха, усиленной мышечной работе.
• При смертельном отравлении порог насыщения НbСО у пожилых людей ниже. У женщин отравление протекает легче, чем у мужчин. Беременные женщины более чувствительны, чем небеременные. Лица, подвергавшиеся хроническому воздействию СО, тяжелее переносят острое отравление.
• Острое отравление проходит тяжелее у лиц, страдающих заболеваниями легких, сердца, нарушениями кровообращения, неврастенией, ожирением, анемией, перенесших черепно-мозговую травму, во время инфекционных заболеваний.
• Данные о влиянии алкогольной интоксикации на тяжесть отравления СО противоречивы.
• При сочетанном отравлении СО и оксидами азота, СО,, парами бензина, НСN (например, в результате пожара или технологического процесса) к смертельному исходу может привести относительно невысокая концентрация НbСО.
• Необходимо учитывать очень разную чувствительность отдельных лиц к действию СО. При групповых отравлениях у некоторых лиц, находящихся в коматозном состоянии, содержание НЬСО бывает гораздо ниже, чем у лиц, перенесших тяжелое отравление и при этом чувствующих себя удовлетворительно.
• Изредка встречаются атипичные формы отравления, протекающие с быстрой потере)! сознания или тяжелыми расстройствами дыхания и сердечной деятельности (СО в крови 30%).
• Количественное содержание НbСО в крови, по-видимому, может зависеть от того, из какого участка кровеносной системы взята для исследования кровь. При вскрытии трупа кровь для исследования надлежит брать из правого предсердия (при наличии в нем крови) или бедренной вены либо из другого магистрального сосуда, а также из грудной или брюшной полости (при наличии излившейся в нее крови).
• В некоторых случаях целесообразно измерять содержание НbСО в гематомах и кровоподтеках, так как оно может служить одним из признаков определения времени их возникновения. Считают, что гематомы, в которых содержание НbСО менее 10%. возникли до воздействия СО. Если содержание НbСО в них превышает 20%, то образование гематом связано с отравлением СО.
• В воздухе промышленных городов постоянно содержится СО, вследствие чего в крови жителей обычно находится некоторое количество НbСО. Между концентрацией НbСО и степенью загрязнения воздушной среды СО отмечена прямая зависимость. Например, в крови регулировщиков уличного движения содержание НbСО может достигать 22%.
• При освидетельствовании лиц, перенесших отравление СО, нужно иметь в виду, что при интоксикации средней степени в течение первого часа выделяется около половины поступившего в организм СО. Полное освобождение организма от СО наступает спустя 10—12 ч, но может затягиваться и до 24 ч.
• При обнаружении в крови трупа менее 60% НbСО необходимо проанализировать патологоанатомические данные и обстоятельства отравления, чтобы обосновать заключение о причине смерти.
• При повышении поступления СО в организм соответственно увеличивается содержание СО в тканях.
• Необходимость в исследовании скелетных мышц трупа или его частей возникает в очень редких случаях (например, при гнилостных изменениях резко обескровленных частей трупа), потому что для определения НbСО спектрофотометрическим методом необходим всего 1 мл крови из свежего или хранившегося до 10 дней биологического материала
Достарыңызбен бөлісу: |