Модуль «фармацевт-токсиколог» учебно-методический комплекс
жүктеу/скачать 4.88 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Контрольные вопросы
| Литература
Основная: Токсикологическая химия: метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие + СD/ под ред. Н.И. Калетиной. – М., 2008. – 1016 с. Переплет. Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т.В. Плетеневой. – 2-ое изд. – М., 2008. – 512 с. Переплет. Лужников Е.А. Клиническая токсикология Е.А. Лужников.-М.,"Медицина", 1994. –189 с. Крамаренко В. Ф. Токсикологическая химия / В. Ф. Крамаренко. - Киев, «Высшая школа», 1989.- 272 с. Контрольные вопросы: Методы определения оксида углерода (II) в биообъектах. Подготовка проб к анализу Предварительные методы исследования (химические) Обнаружения в трупной крови карбоксигемоглобина с использованием химических методов анализа Обнаружения в трупной крови карбоксигемоглобина с использованием физико-химических методов анализа ПРИЛОЖЕНИЕ Cпектроскопический метод обнаружения оксида углерода (II) в крови (Крамаренко В.Ф. Токс.химия.- Выша школа.-Киев.-1989.-С.415-424) В крови лиц, отравленных оксидом углерода (II), не весь гемоглобин превращается в карбоксигемоглобин. Смерть наступает значительно раньше, чем достигается полное превращение оксигемоглобина в карбоксигемоглобин. Карбоксигемоглобин можно обнаружить в крови спектроскопом, который является прибором для визуального спектрального определения ряда веществ, в том числе и карбоксигемоглобина. При рассматривании крови спектроскопом наблюдаются линии и полосы, позволяющие сделать вывод о наличии или отсутствии карбоксигемоглобина. Подлежащую исследованию кровь разбавляют водой до тех пор, пока не будет получен раствор, имеющий светло-розовую окраску. При спектроскопическом исследовании этого раствора четко видны соответствующие спектральные полосы. Спектр оксигемоглобина крови ОНb имеет две полосы поглощения между линиями Фраунгофера D и Е при длинах волн 577—589 и 536—556 нм. Спектр карбоксигемоглобина СОНb имеет две полосы поглощения при длинах волн 564—579 и 523—536 нм. После прибавления одного объема свежеприготовленного раствора сульфида аммония (NH4)2S или других восстановителей (дитионит натрия Na2S2O4-21-0 и др.) к четырем объемам водного раствора исследуемой крови оксигемоглобин (ОНb) превращается в дезоксигемоглобин Нb, в спектре которого имеется одна широкая полоса поглощения при 543—596 нм. Карбоксигемоглобин не восстанавливается сульфидом аммония и другими восстановителями. Поэтому после прибавления восстановителей полосы поглощения карбоксигемоглобина не исчезают. Таким образом, после прибавления раствора сульфида аммония к крови, содержащей окси- и карбоксигемоглобин, сохраняются две полосы поглощения карбоксигемоглобина, но исчезают полосы поглощения оксигемоглобина, а вместо них появляется широкая полоса поглощения дезоксигемоглобина. По наличию соответствующих полос поглощения в спектре крови делают вывод об отравлении оксидом углерода (II). Спектральный метод оправдывает себя при исследовании крови, содержащей 10—30 % карбоксигемоглобина. Оптические методы (Калетина Н.И.-Метаболизм и определение токсикантов.-М.-2007.-С.-753-759 ) Объектами исследования на СО являются главным образом кровь пострадавшего и воздух производственных или жилых помещений, содержащий СО. Диагностическое значение имеет определение НbСО в крови, взятой непосредственно на месте происшествия, так как при оказании пострадавшему первой помощи происходит частичная элиминация угарного газа и снижается содержание НbСО в крови. Спектрофотометрический метод определения СО наиболее распространен, потому что все гемоглобиновые структуры имеют абсорбцию в определенной части спектра. Количественное определение в крови НbСО спектрофотометрическим методом При добавлении восстановителя (натрия тиосульфата) к исследуемой крови окси- и метгемоглобин количественно образуют восстановленную форму гемоглобина. Последняя имеет спектр поглощения, представленный на рис. 1. СО имеет большее сродство к гемоглобину, чем кислород, поэтому комплекс НbСО не можег быть разрушен тиосульфатом натрия. Таким образом, после обработки тиосульфатом натрия комплекс НbСО проявляется характерным спектром с двумя максимумами поглощения (рис. 8-16, А). Максимальная разница оптической плотности между спектрами А и Б отмечается при длине волны 540 нм, тогда как при длине волны 579 нм оптическая плотность практически одинакова. Процентное содержание СО в крови (см. рис. 1. А) может быть вычислено по формуле, исходя из значения оптической плотности «здоровой», не содержащей НbСО крови (см. рис. 1. Б), и исследуемого образца (см. рис. 1. В) после добавления тиосульфата натрия: Рис. 1. Уф-спектры НЬСО (А), восстановленного гемоглобина (Б) и крови паписта при отравлении угарным газом ( В). Интерпретация результатов • Содержание СО в крови < 5%: норма; для курящих до 10%. • Содержание СО в крови 10—20%: интоксикация легкой степени. • Содержание СО в крови 20—30%: интоксикация средней степени. • Содержание СО в крови 30—40%: интоксикация средней степени, но возможен коллапс. • Содержание СО в крови 40—50%: интоксикация средней степени, выраженные расстройства дыхания и функций сердечно-сосудистой системы, часто коллапс, возможна смерть. • Содержание СО в крови 50—60%: интоксикация сильной степени — кома, судороги, возможна смерть. • Содержание СО в крови 60—90%: смерть Газохромотографический метод Газовая хроматография является достаточно простым и прямым методом определения общего количества СО в крови. Высвобождение СО из НbСО крови достигается обычно добавлением растворов натрия карбоната или некоторых других веществ. Газовая фаза вводится в хроматограф, снабженный детектором по теплопроводности. Концентрация СО определяется по калибровочному графику после расчета площади пика. Результаты метода достоверны при концентрации НbСО 30—100%. Ошибка при использовании метода составляет 10%. Другой вариант газохроматографического определения СО в крови основан на переведении его в метан или С02 за счет каталитического восстановления водородом или окисления на силикагеле с пятиокисью йода. В первом случае после высвобождения СО из крови в реакторе-дозаторе гелием газовую смесь мгновенно выталкивают из реактора в хроматографическую колонку, где СО каталитически восстанавливается водородом до метана и регистрируется ПИД. Во втором случае С02 и СО разделяются на одной колонке с силикагелем, а затем в ячейке с пятиокисью йода СО окисляется до СО, и последний регистрируется детектором. Разница величин интенсивности пиков до и после окисления позволяет установить концентрацию СО. жүктеу/скачать 4.88 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|