ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ ОБЩЕФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ СОЕДИНЕНИЯ РУ-1205

Фармакологические исследования новых соединений включают изучение не только специфической активности, но и их общефармакологических и токсикологических свойств. При изучении общефармакологических свойств проводят оценку влияния нового соединения на функциональное состояние жизненно важных органов и систем в терапевтических дозах [Васильев А.Н., 2012].

Однако проявления различных токсических эффектов в дозах, меньших, чем ЛД₅₀ возможно до наступления гибели животных. Таким образом, целесообразным является использования схемы многотестового наблюдения по Ирвину [Irwin S., 1964] для определения доз, с которых начинают возникать неблагоприятные эффекты.

Острую токсичность субстанции вещества РУ-1205 и лекарственных форм на ее основе изучали на 2-х видах половозрелых животных (мышах и крысах) с использованием внутрибрюшинного, перорального и подкожного путей введения. Наблюдения за животными вели в течение 2-х недель. В результате проведенных исследований был рассчитан показатель острой токсичности для субстанции РУ-1205 (табл. 6.1), точные значения ЛД₅₀ для лекарственных форм исследуемого соединения не были установлены, так как был достигнут максимально возможный объем введения.

В клинике отравления мышей и крыс обоего пола превалируют симптомы поражения ЦНС: седация, заторможенность, снижение локомоторной активности, угнетение болевой, тактильной и звуковой чувствительности. При этом клинические проявления интоксикации у крыс и мышей при однократном введении токсических доз происходили в интервале 4-5 минут после введения, что указывает на высокую скорость абсорбции действующего вещества из места введения.

Таблица 6.1

В контрольной серии экспериментов при изучении синдрома отмены в условиях провокации налоксоном признаков зависимости не отмечалось.

На фоне хронического введения морфина налоксон вызывал прыжковую активность, «барабанный бой» и птоз у 100% животных. В 40% случаев отмечались встряхивания и диарея и у 20% морфин-зависимых животных стук зубами. Кроме того наблюдалась потеря в весе через 2 часа после максимальной дозы морфина на 10,3%. В группе мышей, получавших буторфанол, также регистрировались признаки зависимости: прыжки и тремор у 100% животных. Изменений массы мышей, получавших буторфанол не наблюдалось. Таким образом, при хроническом введении буторфанола было выявлено более легкое течение синдрома отмены по сравнению с таковым у группы морфина. В группе мышей, получавших вещество РУ-1205, признаков зависимости не наблюдалось (рис 6.1).

А. Б.

Рис.6.1. Влияние соединений РУ-1205, морфина и буторфанола на развитие синдрома отмены.

А – тест на зависимость при хроническом введении; Б - влияние морфина, буторфанола, соединения РУ-1205 на изменение массы тела животных в условиях хронического введения веществ.

Примечание: * –статистически значимо по отношению к контрольной группе животных (p≤0,05); # - – статистически значимо по отношению к группе животных, до введения налоксона (p≤0,05).

6.3. Изучение общефармакологических свойств соединения РУ-1205 с использованием схемы многотестового наблюдения по Ирвину.

В ходе экспериментального исследования после введения изучаемых доз соединения РУ-1205 нарушений вегетативной функции у животных выявлено не было. Поведенческие реакции (агрессивность, пугливость, настороженность) на всем протяжении тестирования статистически значимо не менялись. Нервно-мышечная возбудимость мышей оставалась в пределах нормы на протяжении всего наблюдения. Тремор, парезы, подергивания, судороги, синдром Штраубе не были отмечены ни в одной из групп животных. Положение тела в пространстве и реакции животных на звуковые и тактильные стимулы сохранялись после введения всех изучаемых доз. Нарушений со стороны вегетативной нервной системы в виде дефекации, уринации, пилоэрекции, птоза обнаружено не было. В течение всего времени наблюдения состояние рефлексов у животных, получавших соединение РУ-1205 в дозах 0,1-25 мг/кг не изменялось (табл. 6.2). В дозах 50 и 100 мг/кг снижался ипсилатеральный рефлекс. Незначительное угнетение слухового рефлекса происходило лишь при введении соединения РУ-1205 в дозе 100 мг/кг. Угнетения роговичного рефлекса в диапазоне изучаемых доз выявлено не было.

Способность мышей к удержанию всеми лапами на проволоке (мышечная координация) сохранялась при введении соединения РУ-1205 в дозах до 25 мг/кг (табл. 6.3). Исследуемое вещество в дозах 50 и 100 мг/кг изменяло мышечную координацию мышей, однако, данные не являлись статистически значимыми по отношению к контрольной группе животных.

В ходе исследования было выявлено, что соединение РУ-1205 при внутрибрюшинном введении в дозах 0,1 и 1 мг/кг не оказывало влияния на длительность удержания мышей на вращающемся стержне по сравнению с группой контроля (табл. 6.4). Данный показатель для них составил180,0±0,0 сек. Через 60 минут после введения исследуемого соединения в дозах 10, 25, 50 и 100 мг/кг происходило уменьшение времени удержания животных на стержне на 24,2%; 35,3%; 44,8% и 65,8%, соответственно.

Ректальная температура статистически значимо не менялась при введении соединения РУ-1205 в дозах до 25 мг/кг (табл. 6.5). В дозе 50 мг/кг изучаемое вещество снижало температуру в среднем на 7,3%. У животных, получавших соединение РУ-1205 в дозе 100 мг/кг отмечалось снижение ректальной температуры на 14% (ниже 32⁰С).

При изучении влияния исследуемого вещества на частоту дыхания было выявлено, что при внутрибрюшинном введении соединение РУ-1205 в диапазоне изучаемых доз статистически значимо не изменяло частоту дыхания у мышей (табл. 6.6). Характер двигательной активности животных исследовали в тесте «открытое поле». В контрольной группе животных уровень горизонтальной двигательной активности составил 15,2±4,4 пересеченных квадратов, число вертикальных стоек 4,0±1,1 и число обследованных норок 1,2±0,6 (табл.6.7). Статистически значимое снижение двигательной активности при введении соединения РУ-1205 наблюдалось в дозах превышающих 25 мг/кг.

Таблица 6.5

Таблица 6.6

В результате проведенного исследования было выявлено, что субстанцию и лекарственные формы соединения РУ-1205 по показателям острой токсичности можно отнести к классу малотоксичных соединений.

Одной из наиболее изучаемых проблем функциональных изменений опиоид-опосредованных реакций в ответ на действие анальгетиков является изучение их влияния на развитие синдрома отмены. В результате проведенного исследования было показано, что тестируемое вещество РУ-1205 не вызывает признаков синдрома отмены при хроническом введении.

При изучении общефармакологических свойств соединения РУ-1205 по Ирвину было выявлено, что тестируемое вещество при однократном внутрибрюшинном введении в дозах до 25 мг/кг не вызывает значительных изменений функционального состояния вегетативной нервной системы и эмоционального статуса экспериментальных животных. В дозах 50 и 100 мг/кг наблюдалось незначительное угнетение ипсилатерального и слухового рефлекса, снижение ректальной температуры, снижение длительности удержания на вращающемся стержне, горизонтальной и вертикальной двигательной активности.