Омела белая Viscum album Mistletoe
жүктеу/скачать 2.26 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- 2. Материалы и методы
- 2.2. Набор пациентов и скрининг статистика
- 2.3. Исследование Критериев Приемлемости
- 2.4. Дизайн исследования и результаты
- 2.5. Участники и процедур сбора данных
- 2.6. Аналитики План
1. ВведениеЕвропейский омелы (Viscum album Л.),  semiparasitic растениеводства на различных деревьев [1], был использован в фольклоре и как лекарственное растение в течение нескольких тысяч лет. В современную эпоху, впервые она была представлена как растительный экстракт препарат для лечения злокачественных заболеваний Штейнера [2]. Ряд исследований указывают иммуностимулирующее действие из омелы, на мононуклеарных клеток [3],- лимфоцитов [4-6], макрофагов [7], и NK-клеток [8, 9]. Омелы содержит ряд биологически активных компонентов, в том числе омелы лектинов (обзор в [10-16]) и viscotoxins [17, 18]. Омелы могут также иметь антиангиогенных свойства [1]. Омела лектинов стимулируют секрецию ряда цитокинов, в том числе IL-6, IL-12, IL-1 и TNF-α [19-21], может усилить цитотоксических NK-клеток деятельности, и может индуцированного апоптоза [22] и индукции FAS лиганда [23]. Некоторые из этих результатов были поддержаны микрочипов экспрессии генов [24]. Экстракт омелы снижает лейкопения в химиотерапии-мышей и стимулирует neutropoiesis циклофосфамида у мышей после химиотерапии [25]. В зависимости от дозы, способа, мл-1 мая upregulate синтез белка в нейтрофилов при низких дозах, а в больших дозах в результате апоптоза нейтрофилов через каспазы-зависимый механизм [26]. Смешанные результаты были доложены на омелы образования антител. In vivo образования антител и оказывает защитное действие против токсичности омелы лектинов для обычных соматических клеток [27]. Хотя мл антитела отсутствовали у пациентов без побочных эффектов [28]потенциальная роль мл-антитела для нейтрализации омелы лектин деятельности in vivo был обсужден [27, 29]. В совокупности, монтаж доклинические данные с омелой терапии предполагает, что строгие клинические испытания необходимы.
В фазы исследования у ВИЧ-инфицированных пациентов, получавших Viscum album Quercus Frischsaft (QuFrF) [30], ограниченное токсичность включает гриппоподобные симптомы, гингивит, эозинофилия, и незначительное повышение в сыворотке крови азота мочевины и креатинина. Природные омелы лектины были обнаружены в нормальном добровольцев 2 недель после однократной дозы инъекций. Лихорадка и гриппоподобные симптомы наблюдались [31]. Таким образом, препараты омелы видимому, хорошо переносится, и гуморальный ответ представляется надежной. Однако клиническая эффективность омелы в онкологии параметры остается неясным. В частности, в большой ретроспективное исследование омелы терапии в nonmetastatic больных раком молочной железы, меньше побочных явлений и увеличение продолжительности жизни наблюдались в омелы Групповой терапии в сравнении с обычной терапией в одиночку [32]. В сопоставимых ретроспективный дизайн исследования пациентов с раком поджелудочной железы, аналогичные клинические исходы наблюдались с меньшим числом побочных реакций и увеличение продолжительности жизни пациентов, получавших омела [33]. Несмотря на убедительные доклинические данные и эти отдельные отчеты о клиническая эффективность препаратов омелы, последние обзоры клинических испытаний по-прежнему Примечание методологические недостатки существующих опубликованных исследований по омела [34], а также противоречивые результаты на ответ опухоли и выживаемости на продление лечения с использованием различных препаратов омелы [35-38]. В ряде недавно опубликованных исследований подтверждают эту смешанную картину [39-42]. С сходящихся доклинические данные, свидетельствующие о иммуностимулирующее и антиангиогенных свойства омелы, в дополнение к нехватка хорошо спланированных клинических испытаниях безопасности и эффективности омелы, настоящее исследование ставило целью администрирования омелы на продвинутой стадии онкологических больных, в сочетании со стандартной, хорошо известно химиотерапии (GEM), hypothesizing, что гемцитабин и омелы могут безопасно вводить в комбинации для пациентов с прогрессирующим раком. Целью исследования было оценить следующее: (1) безопасность, токсичность, и максимально переносимой дозе (МПД) омелы/GEM комбинации у пациентов с развитой солидных раков (ASC), (2) восстановление нейтрофилов, (3) формирование омелы лектин антител (мл ab), (4) цитокинов в плазме (5) клинический ответ, и (6) GEM фармакокинетика в качестве показателя возможного взаимодействия омелы/GEM комбинированной схемы терапии.
2. Материалы и методы2.1. Экстракт омелы качества и проверка КонтентаЦелый завод экстракт омелы (HELIXOR API (A), росли ели), много 021224 и много 0406, был использован и поставляемые Helixor, GmbH, Розенфельд, Германия. Исследование агента проведенный контент-анализ был компанией-производителем. Содержание продукта проверки был проведен анализ по ливерморской национальной лаборатории в Ливерморе, Калифорния, США. Проверки, анализа согласуются с производителя анализ и показали никаких признаков того, продукт загрязнения пестицидами, тяжелыми металлами, или лекарства по рецепту в списке. В Helixor экстракт омелы была проанализирована около 60 элементарного видов индуктивно-связанной плазмы/масс-спектрометрии (ICP-MS). Кроме того, Helixor экстракт омелы была проанализирована для различных пестицидов и нелегальных наркотиков, в том числе стимуляторов, наркотиков и транквилизаторов с помощью газовой хроматографии-масс-спектроскопия, ГХ-мс Жидкостной хроматографии-масс-Спектрометрия (LC-MS и LC-MS/MS) анализ Helixor омелы формулировка для наиболее распространенных онкологических препаратов был отрицательным. Helixor экстракт омелы была проанализирована с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) по ок/КК, протокол поставляемых Helixor. TLC результаты анализа представленных Helixor решения были очень похожи на тех, которые ожидаются от Helixor QA/QC протокола. Оба лота были протестированы параллельно до этого заключительного анализа выполнена на 14 февраля 2006 года. Много 021224, содержащиеся 3.4 (б 0,2) Для изучения, два лота омелы были изготовлены, как период включения в исследование длился более 2 лет. Начальная омелы много протестировали мл-я и мл-III стабильности в начале исследования, и на 6, 15, и 18 месяцев. Мл-я и мл-III концентрации остаются стабильными на протяжении 2 лет. 2.2. Набор пациентов и скрининг статистикаПротокол, обоснованного согласия, и набор пациентов материалы были рассмотрены и одобрены Национального института рака Institutional Review Board (IRB) на 15 июля 2002 года и по национальной морской медицинский центр IRB от 12 декабря 2002 года (исследование номер 02-на-0260). Всего 704 человек выразили заинтересованность в данном исследовании, и связались в течение этого пятилетнего исследования. Сорок четыре человека (6%) были зачислены на учебу после встречи, все исследования, критерии и подписание письменного информированного согласия. 2.3. Исследование Критериев ПриемлемостиУ пациентов с гистологически подтвержденным очищенных или неочищенных, дополнительно поджелудочной железы или немелкоклеточного рака легких (НМРЛ), или рецидивирующий или метастатическим колоректальным раком молочной железы имели право для участия в исследовании. Кроме того, участники исследования необходимы, чтобы быть способным и желающим администрировать ежедневных подкожных инъекций омелы самостоятельно или с посторонней помощью. 2.4. Дизайн исследования и результатыЦель данного двух этапе эскалации дозы фазе I клинических испытаний было соблюдать безопасность сочетание гемцитабин и подкожно вводят экстракт омелы в совокупности с передовыми солидных раков и ограниченные варианты лечения. Дизайн исследования и обоснование для этого два агента, повышение дозы препарата парадигмы, где-то опубликованы [43]. Вкратце, в I стадии фиксированной дозы гемцитабин (750 мг/м2) вводился внутривенно в 1-й день и день 8 3-недельный цикл с растущей омелы доза (1 мг, 5 мг, 10 мг, 20 мг, 50 мг, 100 мг, 200 мг и 250 мг/сутки подкожно). Как производитель рекомендует омелы дозирования от 50 до 200 мг, эта дозировка охватывает диапазон от 20% до 125%, рекомендованная доза, которая считалась разумный диапазон дозирования в ЛС, где есть приоритет для клинического использования, и нет никаких потенциальных дозирования данных в сочетании с камнем. В этап II) фиксированное омелы суточная доза (как определено в I стадии) вводили с гемцитабин в 20% дозы с шагом в дозе уровня (900, 1080, 1380 г. и 1560 мг/м2, отв., с максимальная доза-более чем на 50%, выше, чем рекомендованная доза-1000 мг/м2) [43]. В этом этапе исследования изучалась ли участников, способность терпеть гемцитабин бы быть по-разному влияет, одновременно вводят омелы инъекции. Зачисление 3 пациентов в дозе планировалось. 3 класс nonhematologic и 4 класса, гематологические события рассматривались ограничение дозы лекарственных препаратов (DLT). Если у трех пациентов, включенных в дозе уровне успешно завершено три цикла гемцитабин-омела схеме, без DLT, затем поступил пациенты были рандомизированы на следующий, более высокий уровень дозировки. Однако, если 1 DLT произошло, дополнительный 1-3 пациентов были добавлены когорту, что доза в течение максимум 6 пациентов в дозе уровне. Наступление 2 стримеры семейства dlt в один уровень дозировки было сочтено, максимально переносимой дозе (МПД).
Первичные результаты исследования были MTD и DLT сочетания режима и плазмы фармакокинетику гемцитабина самостоятельно и в сочетании с экстракт омелы. Вторичные результаты исследования были нейтрофилов восстановления, стимулирование отдельных плазменные уровни цитокинов (IL-6, IL-12, IFNγи TNF-α), время производства и циркулирует в плазме в омелы лектин-1 (мл-1) и омелы лектин-3 (мл-3) антител, измеряемого как IgG1-4 подклассы, и опухоль ответ. 2.5. Участники и процедур сбора данныхУчастниками были оценены и лечение в гематологии-онкологии в клинике национального военно-морского медицинского центра по изучению следователей и NCI товарищей. До подписания информированного согласия, исследование следователи проинформировал участников о целях и методах исследования и объяснил, где исследование было проведено в сроки этапе и повышение дозы препарата. После зачисления на обучение, для одного исследования следователи поручил участника исследования, так и членов семьи о том, как управлять ежедневных подкожных омелы инъекции, уделяя особое внимание вращающихся узлов впрыска и избежать закачки в том же районе. Каждый участник (или члена семьи) продемонстрировали успешные подкожного введения экстракт омелы и был снабжен учебных принадлежностей (т.е., стерильные шприцы, спиртовые тампоны, и контейнеры для острых инструментов). Участники были проинформированы, что локализованные кожные реакции, включая дискомфорт в месте введения, покраснение и зуд кожи, были, как правило, сообщалось и консультации, чтобы информировать сотрудников исследования при любых кожных реакций или других неблагоприятных событий. Лабораторные показатели наблюдались в два раза в неделю, и клинические на изучение оценки были проведены в каждом цикле. Кт проводили исходно, и каждые 3 цикла. Нежелательные явления были еженедельного мониторинга по изучению следователи с помощью ToxGrade, программным обеспечением, созданным для данного исследования, использование общей терминологии, критерии неблагоприятного события (CTCAEv3) руководящие принципы. Данные исследования были отслежены в базе данных контролируется EMMES Corporation (Rockville, MD, США). Независимый мониторинг исследования была предоставлена EMMES и Кай (как в Rockville, MD, США). 2.6. Аналитики ПланОсновная цель этой фазы исследования было изучение безопасности и токсичности омелы/GEM лечения. Как таковой, неблагоприятные события (либо клинических событий, в то время как на исследовании, относятся к омелы или гемцитабин на основе опубликованных данных о последствиях соответствующих агентов [44] Номинальная как не связанные, по-видимому, связано, скорее всего, связан, или определенно связанные), количество доз ограничения токсичности, и клинического ответа (определить как прогрессив/стабильный болезни или частичного ответа на время пациентов оценивается как каждые 3 цикла и/или когда пациенты были сняты исследования на прогрессирование болезни, используя RECIST критериев) выводятся с соответствующей описательной статистики, 44 участников исследования. Вторичный анализ включал используется Kaplan-Meier [45] для оценки времени от включения в исследование до смерти. Выживаемости без прогрессирования и время до прогрессирования первоначально рассматривались но было трудно количествах, чтобы оценить из-за отсутствия точного измерения прогресса и оценки смещения, даже когда строгое определение используется (U.S. Food and Drug Administration см. страницу сайта FDA и CBER. Руководящие указания для отрасли конечные точки клинических испытаний для утверждения противоопухолевых лекарственных средств и биопрепаратов Май 2007 г.), и таким образом, время до прогрессирования заболевания их анализ не входит в этот документ. Исследовательский целью исследования было изучить потенциальные тенденции омелы и гемцитабин эскалации на функционирование иммунной. В априори гипотезу о том, что АНК значения увеличится в течение курса лечения; однако каждая группа будет оцениваться был небольшой размер выборки. В Jonckheere-Terpstra тенденция test [46] был использован для изучения абсолютное число нейтрофилов (АНК) тенденций во времени и между различными уровнями гемцитабин и омелы процедуры. Это непараметрические статистические подход аналогичен Крускала-Уоллиса и имеет больше власти, чем Крускала-Уоллиса, когда есть априори для заказа населения, из которых отбираются пробы. Pharmokinetics анализ, использованные площадь под Кривой анализ и его концентрацией в плазме (CP, нмоль/мл), от 20 до 25 минут после инфузии, сравнивая между 1 цикл (гемцитабин в одиночку) и 3 цикла (гемцитабин плюс омела) с помощью тест уилкоксона ранге. |