Определение количественного содержания флавоноидов в надземной части шлемника байкальского

жүктеу/скачать 50.75 Kb.

бет	4/5
Дата	30.03.2022
өлшемі	50.75 Kb.
	#456534

1 2 3 4 5

opredelenie kolichestvennogo soderzhaniya flavonoidov v nadzemnoy (1)

S. baicalensis (1) и лютеолин-7-гликозида (2)

Таблица 3. Влияние типа экстрагента на выход БАС

Экстрагент	Содержание, %				λ_max, нм
Экстрагент	ЭВ*	ФI*	ФII*	Σ Ф*
Вода	28,30	6,02	1,76	7,78		291
EtOH-20%	40,91	9,46	2,52	11,98		288
EtOH-40%	31,02	11,41	2,89	14,30		286, 334, 661
EtOH-60%	36,14	17,37	4,94	22,31		284, 335, 602, 664
EtOH-70%	39,77	20,16	7,09	27,25		285, 335, 605, 664
EtOH-80%	36,48	15,37	5,28	20,65		287, 336, 537,607,664
EtOH-90%	25,23	6,97	2,94	9,91		285, 334, 395, 537, 609, 664
EtOH-95%	20,23	6,12	1,61	7,71		285, 330, 380, 537, 611, 664

* Здесь и далее в таблицах 4 и 5: ЭВ – экстрактивные вещества, ФI – флавоноиды в пересчете на скутеллярин (λ = 285
нм), ФII – флавоноиды в пересчете на лютеолин-7-гликозид (λ = 405 нм), Σ Ф – суммарное содержание флавоноидов.

Таблица 4. Влияние температуры экстракции, степени измельчения и соотношения сырье : экстрагент на выход БАС (%)

Температура экстракции, ºС	ЭВ	ФI	ФII	Σ Ф
20	12,27	20,36	1,81	22,17
40	18,18	21,60	3,77	25,37
60	18,18	21,52	3,81	25,33
80	19,09	21,58	5,35	26,93
100	44,43	21,80	7,13	28,93
Степень измельчения, мм	ЭВ	ФI	ФII	Σ Ф
0,25	35,46	9,22	6,86	16,08
0,50	38,98	15,62	7,08	22,70
1,00	39,21	20,66	7,90	28,56
2,00	40,91	27,44	8,52	35,96
3,00	38,07	25,66	7,72	33,38
5,00	37,80	20,84	6,80	27,64
7,00	35,78	5,84	6,52	12,36
Соотношение сырье : экстрагент	ЭВ	ФI	ФII	Σ Ф
1:10	8,86	2,98	1,46	4,44
1:20	22,27	8,13	2,86	10,99
1:30	27,50	11,00	2,90	13,90
1:50	34,09	12,70	3,12	15,82
1:70	43,86	15,40	4,52	19,92
1:100	44,09	17,75	6,08	23,83
1:150	40,23	17,00	4,76	21,76
1:200	36,14	14,86	3,28	18,14

Таблица 5. Влияние кратности и времени экстракции на выход БАС (%)

й контакт фаз

Время, мин	ЭВ	ФI	ФII	Σ Ф
15	13,18	8,20	1,48	9,68
30	25,00	17,00	4,40	21,40
45	25,45	18,33	4,56	22,89
60	25,68	19,25	4,86	24,11
75	25,65	19,30	4,24	23,54
90	25,67	19,25	3,68	22,93
105	25,67	19,13	3,54	22,67
120	25,60	19,00	2,98	21,98

й контакт фаз

Время, мин	ЭВ	ФI	ФII	Σ Ф
30	22,95	5,83	2,59	8,42
60	23,86	8,40	2,94	11,34
90	25,00	8,45	2,49	10,94
120	23,41	8,38	2,63	11,01

й контакт фаз

Время, мин	ЭВ	ФI	ФII	Σ Ф
30	4,32	2,14	0,66	2,80
60	4,38	1,86	0,51	2,37
90	4,38	1,86	0,51	2,37
120	4,38	1,14	0,39	1,53

й контакт фаз

Время, мин	ЭВ	ФI	ФII	Σ Ф
30	0,18	0,14	-	0,14
60	0,18	0,14	0,08	0,22
90	0,19	0,16	0,08	0,24
120	0,20	0,14	0,08	0,22

Оптимальными выбраны следующие параметры экстракции: экстрагент – 70%-ный этиловый спирт, температу- ра экстракции – 100 ºС, степень измельчения – 2 мм, 1 и 2-й контакты фаз – 1 : 100 по 60 мин, 3-й контакт фаз 1 : 50 по 30 мин. Трехкратная экстракция в данных условиях позволяет извлечь до 99% флавоноидов и экстрактивных веществ; во время 4-й экстракции извлекается не более 0,5% экстрактивных веществ и 0,7% флавоноидов.

Оценку правильности разработанной методики проводили с использованием общепринятых эксперимен- тов: способом «введено – найдено», методом независимых и параллельных определений. При исследовании методики способом «введено – найдено» установлено, что относительная ошибка не превышает 1,5% (табл. 6). Средняя ошибка из трех измерений для трех образцов находится в достаточно узких пределах – 0,02– 0,83% (табл. 7). Таким образом, можно утверждать то, что анализируемый компонент определяется с доста- точной точностью, т.е. результаты анализа можно считать правильными. Отклонение от среднего в экспе- рименте из трех независимых определений не превышает 2%, что свидетельствует об удовлетворительной

воспроизводимости методики.
Метрологические характеристики разработанной методики приведены в таблицах 8 и 9. Установлено, что относительная ошибка определения не превышает 4%.
На основании проведенного количественного анализа установлено, что содержание флавоноидов в надземной части S. baicalensis находится в следующих пределах: в пересчете на скутеллярин – 8,24–27,88%, в пересчете на лютеолин-7-глюкозид – 2,18–6,63%, общее содержание флавоноидов – 10,81–33,65%.
Полученные результаты использованы при разработке ФСП «Надземная часть шлемника байкальского». Показателями качества установлены следующие нормы: содержание флавоноидов в пересчете на скутелля- рин должно быть не менее 8%; в пересчете на лютеолин-7-гликозид – не менее 2%; суммарное содержание флавоноидов – не менее 10%.
Таблица 6. Результаты эксперимента способом «введено – найдено»

Содержание флавоноидов в аликвоте, мкг	Введено, мкг	Должно быть флавоноидов, мкг	Найдено флавоноидов, мкг	Ошибка
				абс., мкг	отн., %

В пересчете на скутеллярин

254	65	319	317	–2	0,62
254	130	384	387	+3	0,78
254	195	449	446	–3	0,67
254	260	514	518	+4	0,78
254	325	579	584	+5	0,86

В пересчете на лютеолин-7-гликозид

157	40	197	196	–1	0,51
157	80	237	239	+2	0,84
157	120	277	274	–3	1,08
157	160	317	318	+1	0,32
157	200	357	359	+2	0,56

Таблица 7. Результаты эксперимента методом независимых определений

№ пробы

Повторность

Флавоноидов, %

Среднее, %

Отклонение от среднего, %

В пересчете на скутеллярин

1	1 / 2 / 3	22,42 / 18,51 / 20,22	20,38	0,83 / 0,76 / 0,07
2	1 / 2 / 3	18,23 /18,33 / 20,07	18,88	0,27 / 0,22 / 0,49
3	1 / 2 / 3	19,63 / 18,20 / 20,92	19,58	0,02 / 0,56 / 0,55

В пересчете на лютеолин-7-гликозид

1	1 / 2 / 3	6,99 / 7,93 / 7,55	7,49	0,20 / 0,17 / 0,02
2	1 / 2 / 3	7,28 / 7,41/ 9,65	8,11	0,34 / 0,29 / 0,63
3	1 / 2 / 3	10,48 / 11,26 / 9,86	10,53	0,02 / 0,29 / 0,27

Таблица 8. Метрологические характеристики разработанной методики (n = 10, P = 0,95, t(p, f) = 2,26)

ЦП

жүктеу/скачать 50.75 Kb.

Достарыңызбен бөлісу:

1 2 3 4 5