96
РАБОТА 26
Получение спиртовой вытяжки пигментов зеленого
листа и исследование химических свойств пигментов
Пигментная система хлоропласта представлена пигментами
двух типов - зелеными (хлорофиллы
а и
b) и желтыми (каротиноиды
и ксантофиллы).
По своей
химической природе хлорофиллы а и
b – сложные
эфиры дикарбоновой кислоты хлорофиллина (магнийпорфирины)
(см. рис. 7).
Пигменты легко извлекаются из сухих или свежих листьев по-
лярными растворителями (этиловым спиртом, ацетоном),
которые
разрушают связь хлорофиллов и ксантофиллов с липопротеидами
пластид и этим обеспечивают их полное экстрагирование.
Цель работы: получение спиртовой вытяжки из зеленых листь-
ев и ознакомление с некоторыми свойствами пигментов.
Объект исследований: листья крапивы (
Urtica dioica).
Ход работы. Несколько листьев крапивы размельчить и расте-
реть в фарфоровой ступке с небольшим количеством кварцевого пес-
ка и 5 мл этилового спирта. Для нейтрализации кислотности добавить
не
кончике скальпеля мел, дать содержимому ступки отстояться и,
сливая по стеклянной палочке жидкую фракцию, отфильтровать со-
держимое ступки в пробирку через сухой бумажный фильтр.
Оставшуюся в ступке массу повторно растереть с 5 мл спирта и
профильтровать через тот же фильтр.
Полученный фильтрат содержит набор всех пигментов, но из-за
количественного преобладания
хлорофиллов окрашен в темно-
зеленый цвет.
а) Разделение пигментов по Краусу.
Метод основан на разной растворимости пигментов в различных
органических растворителях - спирте и бензине. Отлить в пробирку
97
2-З мл спиртовой вытяжки и, добавив в неѐ двойное количество бен-
зина,
сильно взболтать, содержимое несколько раз. Дать отстояться.
Происходит расслоение спирта и бензина; в верхний бензиновый
слой переходят зелѐные
пигменты и каротины, а ксантофиллы оста-
ются в нижнем спиртовом слое, придавая ему золотистую окраску.
б) Омыление хлорофилла щѐлочью
К 2-3 мл спиртовой вытяжки пигментов добавить 1 мл. 20 %-
ного раствора щѐлочи и взболтать. После
смешивания экстракта со
щѐлочью пробирку помещают в кипящую водяную баню. Как только
раствор закипит, пробирку вынимают и охлаждают. К охлаждѐнному
раствору добавляют равный объѐм бензина и несколько капель воды
для лучшего разделения смеси. Затем содержание пробирки резко
встряхивают и дают ему отстояться.
В бензиновый слой перейдут каротин и ксантофилл, а в спирто-
вой раствор - натриевая соль хлорофиллиновой кислоты (зарисовать).
В выводах записать реакцию омыления хлорофилла, в результа-
те которой происходит отщепление спиртов - метилового и фитило-
вого, а двухосновная кислота хлорофиллин даѐт соль:
Достарыңызбен бөлісу: