Функциональные нарушения при повреждении клетки зависят в значительной мере от степени разрушения клеточных органелл. При незначительном их повреждении функция клетки может не нарушаться, т. к. сохранившаяся масса ультраструктур способна обеспечить функцию на достаточном уровне. В тех случаях, когда повреждение клетки более значительно, включается система ее компенсаторно-приспособительных реакций, направленных на ликвидацию этих нарушений. Структурно это выражается в интенсификации воспроизведения специфических органелл клетки. При относительно кратковременном действии патогенного фактора и неглубоких структурных изменениях клетки, строение и функция ее быстро восстанавливаются за счет внутриклеточной репаративной регенерации. Если же патогенное воздействие оказывается достаточно сильным, могут наступить некротические изменения части клетки (парциальный некроз) или тотальное необратимое повреждение клетки.
Занятие. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ОСТРОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ КЛЕТОК
Цель занятия: наблюдать функциональные проявления острого повреждения клетки.
Опыт 1. Дегрануляция тучных клеток капсулы слюнной железы при повреждении
А
Крысу наркотизируют внутрибрюшинным введением 2% раствора гексенала (0,3—0,5 мл на
100 г массы), фиксируют за конечности на операционном столике на спине, голову закрепляют при помощи лигатуры, за верхние резцы. Делают срединный разрез на шее и отпрепаровыва-ют подчелюстные железы. Под капсулу одной железы вводят 0,5 мл дистиллированной воды или \% раствора соляной кислоты — (опыт), под капсулу другой — 0,5 мл физиологического раствора (контроль). Через 1—2 мин отрезают кусочки отслоившихся капсул, помещают их на предметное стекло в 0,1% раствор нейтрального красного. Через 5 мин при помощи фильтровальной бумаги удаляют краситель, добавляют 1—2 капли физиологического раствора и накрывают препараты покровными стеклами. Рассматривают препараты капсул слюнных желез под малым увеличением микроскопа (об. X 8), находят тучные клетки, которые преимущественно располагаются около микрососудов. Обращают особое внимание на состояние тучных клеток - интактные или дегранулированные. В препаратах сосчитывают по 25—50 тучных клеток; вычисляют в процентах количество дегранулированных и интактных клеток в опыте и контроле (рис. 6). Зарисовывают тучные клетки, анализируют результаты и делают выводы.
Опыт 2. Повышение сорбционных свойств поврежденных клеток
Лягушку обездвиживают разрушением спинного мозга, помещают на дощечку, вскрывают грудную полость и берут шприцом из сердца 0,3—0,5 мл крови в градуированную пробирку с 1—2 каплями антикоагулянта (3,8% цитрат натрия). Кровь разводят в 10 раз физиологическим раствором и приливают 3—5 мл 0,05% раствора метиленовой (или трипановой) сини. Отливают в другую пробирку половину полученной смеси и добавляют в нее 5 капель 1—2% соляной кислоты. Через 4 мин пастеровской пипеткой наносят по капле смеси из каждой пробирки в камеру Горяева и рассматривают под микроскопом. Вследствие повышения сорбционных свойств ядра поврежденных клеток окрашиваются в синий цвет. Сосчитывают по 100 клеток и вычисляют количество поврежденных клеток (в процентах) в контроле и опыте. Зарисовывают, анализируют результаты и делают выводы.
Опыт 3» Нарушение функций ресничек мерцательного эпителия слизистой оболочки
Лягушку обездвиживают разрушением спинного мозга, отрезают нижнюю челюсть, животное фиксируют на препаровальной дощечке на спине. На слизистую оболочку неба помещают волоконце шелковой нити и в течение 2—3 мин наблюдают за его перемещением к пищеводу, что происходит за счет направленных движений ресничек мерцательного эпителия.
Затем слизистую неба смазывают \ —2% раствора соляной кислоты и через несколько минут вновь помещают волоконце шелковой нити. После повреждения слизистой оболочки кислотой перемещения нити не происходит в результате прекращения движения ресничек мерцательного эпителия.
Опыт 4. Сорбционные свойства поврежденной ткани
У обездвиженной лягушки выделяют обе икроножные мышцы, одну из них повреждают (пламенем, 96% спиртом или эфиром). Обе мышцы помещают в бюксы с 5 мл 0,02% раствора нейтрального красного и инкубируют в течение 30 мин при температуре 370С. Извлекают мышцы, промывают водой, обсушивают фильтровальной бумагой, сравнивают окраску поврежденной й интактной мышц, делают выводы.
Опыт 5. Сорбционные свойства тканей зуба при повреждении
Крысу наркотизируют внутрибрюшинным введением 2% раствора гексенала, фиксируют за конечности на операционном столике, и, открыв рот, обнажают резцы. При помощи бормашины или напильничка повреждают эмаль одного нижнего резца, второй служит контролем. На резцы наносят 1% раствор метиленовой сини, через 3—5 мин краску смывают и отмечают прокрашивание поврежденного участка зуба.
Зарисовывают и делают выводы.
Достарыңызбен бөлісу: |