У большинства больных с острыми воспалительными процессами в челюстно-лицевой области наблюдается нейтрофильный лейкоцитоз с регенераторным сдвигом лейкоцитарной формулы.
При сниженной реактивности организма и развитии хронических форм воспаления не развивается лейкоцитоза, не происходит активации фагоцитарной активности нейтрофилов крови и чисто отмечается снижение показателя завершенности фагоцитоза.
Опыт I. Моделирование лейкоцитоза и лейкопении
Для опыта берут трех мышей. У одной мыши воспроизводят лейкоцитоз путем подкожного введения 0S2 мл 50% эмульсии скипидара в растительном масле. Через I -2 дня в месте введения развивается гнойное асептическое воспаление, сопровождающееся лейкоцитозом. Для получения экспериментальной лейкопении другой мыши за 3-4 дня до практического занятия подкожно вводят 0,1-0,2 мл бензола. Третья мышь-контрольная. Вместо мышей можно использовать для опыта крыс, которым для воспроизведения лейкоцитоза подкожно вводится 0,5 мл 50% эмульсии скипидара а растительном масле. Для получения лейкопении вводят 0,5 мл бензола.
На занятии мышей наркотизируют (гексенал, тиопентал натрия из расчета 1,0 мл 1% р-ра на 100 г массы), фиксируют, вскрывают грудную полость. Сердце надсекают и Собирают кровь на часовое стекло. В смеситель для лейкоцитов набирают кровь до метки 0,5 и заполняют его 3% раствором уксусной кислоты до метки 11. Смеситель встряхивают в течение 1 -2 мин. Первую каплю из смесителя сбрасывают, а следующую вносят в предварительно подготовленную камеру ГЬряева. Подсчет лейкоцитов производят в 25 больших квадратах под малым увеличением микроскопа (об. X 8). Полученное число умножают на 200.
Результаты подсчета лейкоцитов сравнивают, анализируют, делают выводы.
Опыт 2. Изменение лейкоцитарной формулы и определение индекса ядерного сдвига у больных воспалительными процессами челюстно-лицевой области
Подсчет лейкоцитарной формулы в мазках крови окрашенных по Романовскому производят под микроскопом с иммерсионной системой (об. X 90). Следует иметь в виду, что различные форменные элементы распределяются в мазке неравномерно. Более тяжелые клетки (моноциты и нейтрофилы) располагаются по периферии мазка, а более легкие (лимфоциты) - в центре. Кроме того, наименее деформированные формы сосредоточены в тонкой части мазка. Поэтому предметное стекло передвигают по ломаной линии, захватывая периферические и центральные зоны мазка, преимущественно в тонкой его части (ближе к концу предметного стекла). Обозначив отдельные виды лейкоцитов начальными буквами, сосчитывают 200 лейкоцитов и вычисляют процентное соотношение отдельных их видов. По степени зрелости раздельно считают только клетки нейтрофильного ряда (промиелоциты, миелоциты, юные, палочкоядерные и сегментоядерные).
Определяют характер изменения лейкоцитарной формулы. Затем производят расчет индекса ядерного сдвига по приведенной выше формуле. На основании анализа лейкоцитарной формулы и индекса ядерного сдвига делают выводы.
Занятие 4. ЛЕЙКОЗЫ
Лейкоз - заболевание системы крови опухолевой природы, в основе которого лежит образование клона малигнизированных кроветворных клеток.
Лейкозы делятся на 2 основные группы: острые и хронические. К острым относятся лейкозы, при которых основная масса опухолевых клеток представлена бластами; при хронических - основная масса опухолевых клеток сохраняет способность дифференцироваться до созревающих и зрелых форм. Деление лейкозов на острые и хронические не обусловлено продолжительностью болезни, а определяется степенью нарушения дифференцировки малигнизированных клеток.
Источником образования лейкозного клона клеток, как правило, являются миелоидная или лимфоидная ткани. Соответственно развивается миелоидный или лимфондный лейкоз. Причинами возникновения лейкозов является нарушение хромосомного аппарата под влиянием мутагенных факторов (ионизирующее излучение, химические мутагены, вирусы). При лейкозе происходит расселение лейкозных клеток-потомков одной, первоначально мутированной клетки.
При остром миелобластном лейкозе источником опухолевого процесса является клетка -предшественница миелопоэза. Источником бластных клеток при остром лимфобластном лей-
козе является клетка-предшествеиница лимфоцитопоэза. При хроническом лимфолейкозе
лейкозные клетки представлены в большинстве случаев В-лимфоцитами, хотя встречают и Г-клеточные лимфолеЙкозы. Имеются также лейкозы, при которых лейкозные клетки относятся к В- и I -лимфоцитам.
Лейкозные клетки являются функционально неполноценными; для клеток миелоидного
ряда характерно снижение миграционной способности, фагоцитарной активности, выделения факторов неспецифической гуморальной защиты; для клеток лимфоидного ряда функциональная недостаточность проявляется в снижении гуморального (антителогенез) и клеточного
иммунитета.
Острый лейкоз наиболее часто протекает на фоне умеренного лейкоцитоза или лейкопении, тогда как хронический часто сопровождается очень высоким лейкоцитозом. В крови появляются властные клетки и малодифференцированные формы, а также атипичные клетки крови.
Морфологически атиличность выражается в полиморфизме и асинхронности развития ядер и
цитоплазмы, изменении размеров клетки, размеров и формы ядра, нуклеол и т. д.
У лейкозных больных развиваются значительные изменения в тканях полости рта, аналогичные тем, которые встречаются в других органах. Это - лейкемическая инфильтрация десен, языка, неба, слюнных желез, миндалин, вызывающая их гипертрофию, язвенно-некротические и воспалительные процессы, геморрагии, особенно на слизистой оболочке. Вследствии лейке-мической инфильтрации челюстей активируется процесс резорбции костной ткани, в первую очередь в альвеолярных костях. При остром лейкозе патологические изменения в полости рта могут развиваться уже в начале заболевания и протекают очень активно. Эти изменения зависят также от вторично развивающейся анемии и тромбоцитопении.
Цель занятия: изучить мазки периферической крови больных различными формами лейкоза и гистохимические особенности лейкозных клеток пои острых лимфо- и миелолейкозах
Опыт 1. Изучение мазков периферической крови больных лейкозами
Мазки периферической крови больных острыми лейкозами, хроническими миело- и лимфо-лейкозами, окрашенные по Романовскому, студенты изучают под микроскопом с иммерсионной системой (об. X 90) и зарисовывают характерную картину крови.
Обращают внимание, что при остром лейкозе в периферической крови содержится значительное количество бластных клеток, почти полностью отсутствуют созревающие и дифференцированные формы.
При хроническом лимфолейкозе в мазках крови преобладают зрелые лимфоциты, переходные формы (типа пролимфоцита), встречаются единичные бластные клетки; можно обнаружить типичные клетки (тени) лимфолиза - клетки Боткина-Гумпрехта.
При хроническом миелолейкозе в мазках периферической крови присутствуют все морфологически дифференцированные клетки гранулопитарного ряда (промиелоциты, миелоциты, юные, палочкоядерные, сегментоядерные, встречаются единичные миелобласты), однако преобладают зрелые формы. Часто отмечается увеличение числа эозинофилов и базофилов (базо-фильно-эозинофильные ассоциации). Зарисовывают картину периферической крови при различных формах лейкоза, делают выводы.
Опыт 2. Цитохимическая характеристика клеток при острых лимфо- и миелолейкозах
Бластные лейкозные клетки при острых лейкозах не могут быть дифференцированы при обычной окраске мазков крови по Романовскому. Поэтому применяют цитохимические метоэ^ ды, которые позволяют выявить особенности химического состава и ферментативной активности бластных клеток лимфоидного и миелоидного ряда. Применяют методы, позволяющие выявить гликоген (окраска по Шабадашу), липиды (окраска Суданом III) по методу Гольдма-на, миелопероксидазу (по методу Грэхема - Кнолля). Гликоген распределен в цитоплазме в виде глыбокили диффузно. Глыбки вишнево-фиолетового цвета, по интенсивности которого можно судить о содержании гликогена. Липиды выявляются в виде оранжевых зерен, миелопероксида-за определяется в цитоплазме в виде коричневых гранул.
На занятии студенты изучают готовые мазки периферической крови больных острыми лейкозами.
Для бластных клеток при остром лимфолейкозе характерно отсутствие миелопероксидаэы и липидов, положительная реакция на гликоген, который располагается в цитоплазме в виде крупных глыбок. При межобластном лейкозе выявляется положительная реакция на миелопе-
Достарыңызбен бөлісу: |