Расторопши: семена ранней потенциальных
Флавоноид, силибинин, подавляет пролиферацию и стимулирует клеточный цикл арест Толстой кишке человека рак
жүктеу/скачать 2.54 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
- Результаты
- Выводы
- Flavonoid, silibinin, inhibits proliferation and promotes cell-cycle arrest of human colon cancer.
- MATERIALS AND METHODS
- RESULTS
- CONCLUSIONS
Флавоноид, силибинин, подавляет пролиферацию и стимулирует клеточный цикл арест Толстой кишке человека рак.Антиоксидантные экстракты из расторопши завод (Silybum marianum), как было показано, обладают антипролиферативным эффектами в несколько типов опухоли. Силибинин является основным активным компонентом, изолированные от сырого семени экстракт, силимарин. Он был использован в качестве пищевой добавки для hepatoprotection более 2000 лет. Силибинин было показано, чтобы быть безопасным в нескольких животных моделях и имеет серьезные неблагоприятные события в клинических исследованиях. Мы исследовали потенциал для этого нетоксичен flavolignan ингибировать пролиферацию человеческих толстой кишки рак. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:Три изученных клеточных линий, Фет, Гео, и HCT116, были изучены. МТТ клеточной жизнеспособности анализа было проведено с целью изучения влияния силибинин на распространение. Fluorescence-activated cell sorter (FACS) анализ был использован для определения влияния силибинин на клеточный цикл и апоптоз. 4', 6'-diamidine-2'-phenylindole (DAPI) окрашивание с конфокальной микроскопии был использован для морфологически подтвердить эти результаты. Поли-АДФ-рибоза-полимераза (PARP) расщепление и уровней экспрессии р21, р27, cyclins B1/D1, и CDK-2 были измерены. Циклооксигеназы-2 (ЦОГ-2) уровни также были измерены. Опыты проводились в трех экземплярах и сообщается в виде средних значений со стандартной ошибки. Значит, были противопоставлены с помощью дисперсионного анализа с Dunnet исправления для нескольких испытаний. Все статистические испытания была двусторонняя с уровнем значимости 5%. Результаты:МТТ открыл сильный дозозависимое ингибирующее действие. Лечение с 75 микрогр/мл приводило к 50% ингибированию клеточной жизнеспособности (СК-50) в Fet и Гео линии 72 ч. IC50 = дозе 40 мкг/мл был получен в HCT116, плохо дифференцированная клеточная линия, 72 ч. FACS анализ показал статистически значимые клеточного цикла, арест во всех клеточных линиях. G(2)-м этапе аресты в Fet и Гео клеточных линий (P < 0,001) и G1 арест в HCT116 (P = 0.005) отмечено не было. Тривиальный увеличивается в ранних апоптотических цены (от 2% до 3%) для Geo и HCT116 были отмечены на FACS-анализа, с помощью аннексина V-пропидия йодида техника (P < 0,05), но нет доказательств апоптоза было увидеть на Вестерн-блот для расщепления PARP или DAPI. Циклин B1/D1 и CDK-2 уровня были заторможены. Повышенная экспрессия ингибиторов клеточного цикла, p21 или р27, было отмечено, и не было никакого эффекта на экспрессия ЦОГ-2. Выводы:Силибинин значительно ингибирует пролиферацию посредством клеточного цикла, арест через ингибирования циклин-CDK активности промотора. Несмотря на свой антиоксидантный профиль, нет эффекта по экспрессия ЦОГ-2. Апоптоз не представляется значительно увеличивается в толстой кишке человека раковых клеточных линий Fet, Гео, и HCT116. Напротив, ингибирование клеточного цикла регуляторных белков, играет фундаментальную роль в силибинин, механизм действия, и это может служить основой для комбинированного использования с обычными химиотерапия. J Surg Res. 2007 Nov;143(1):58-65. Flavonoid, silibinin, inhibits proliferation and promotes cell-cycle arrest of human colon cancer.Hogan FS1, Krishnegowda NK, Mikhailova M, Kahlenberg MS. Author information
Anti-oxidative extracts from the milk thistle plant (Silybum marianum) have been shown to have antiproliferative effects in several tumor types. Silibinin is the primary active component isolated from the crude seed extract, silymarin. It has been used as a dietary supplement for hepatoprotection for over 2000 years. Silibinin has been shown to be safe in multiple animal models and has had no significant adverse events in human studies. We investigated the potential for this nontoxic flavolignan to inhibit proliferation of human colon cancer. MATERIALS AND METHODS:Three well-characterized cell lines, Fet, Geo, and HCT116, were studied. The MTT cell-viability assay was performed to study the effect of silibinin on proliferation. Fluorescence-activated cell sorter (FACS) analysis was used to determine the effects of silibinin on cell cycle and apoptosis. 4', 6'-diamidine-2'-phenylindole (DAPI) staining with confocal microscopy was used to morphologically confirm these results. Poly ADP-ribose polymerase (PARP) cleavage and expression levels of p21, p27, cyclins B1/D1, and CDK-2 were measured. Cyclooxygenase-2 (COX-2) levels were also measured. The experiments were performed in triplicate and reported as mean values with standard errors. Means were contrasted using analysis of variance with Dunnet's correction for multiple testing. All statistical testing was two-sided with a significance level of 5%. RESULTS:The MTT assay revealed a strong dose-dependent inhibitory effect. Treatment with 75 microg/mL resulted in 50% inhibition of cell-viability (IC-50) in Fet and Geo lines at 72 h. An IC50 dose of 40 ug/mL was obtained in HCT116, a poorly-differentiated cell line, at 72 h. FACS analysis demonstrated statistically significant cell-cycle arrest in all cell lines. G(2)-M phase arrests in Fet and Geo cell lines (P < 0.001) and a G1 arrest in HCT116 (P = 0.005) were noted. Trivial increases in early apoptotic rates (2% to 3%) for Geo and HCT116 were noted on FACS analysis via annexin V-propidium iodide technique (P < 0.05), but no evidence for apoptosis was seen on Western blot for PARP cleavage or DAPI. Cyclin B1/D1 and CDK-2 levels were inhibited. Increased expression of cell cycle inhibitors, p21 or p27, was noted, and there was no effect on COX-2 expression. CONCLUSIONS:Silibinin significantly inhibits proliferation through cell-cycle arrest via inhibition of cyclin-CDK promoter activity. Despite its antioxidant profile, there is no effect on COX-2 expression. Apoptosis does not appear to be greatly increased in human colon cancer cell lines Fet, Geo, and HCT116. Rather, inhibition of cell cycle regulatory proteins plays a fundamental role in silibinin's mechanism of action, and this may serve as a basis for combined use with conventional chemotherapeutics. Гепатопротекторное действие силимарина. Использование лекарственных растений в лечении заболеваний сообщается с исконных времен. В случае заболеваний печени, несколько видов, таких как Silybum marianum), Phyllanthus niruri, и Panus giganteus (Berk.) было показано, улучшить поражений печени. Силимарин-это природное соединение, полученных от видов Silybum marianum, который широко известен как расторопша пятнистая. Это растение содержит не менее семи flavoligands и флавоноид препарата. В гепатопротекторной и антиоксидантной активностью силимарина обусловлено его способностью ингибировать свободные радикалы, возникающие от метаболизма токсичных веществ, таких как этанол, ацетаминофен, и четыреххлористый углерод. Генерация свободных радикалов, как известно, повреждения клеточных мембран и вызывают липопероксидации. Силимарин повышает уровень глутатиона печени и может способствовать антиоксидантной защиты печени. Кроме того, было показано, что силимарин увеличивает синтез белка в гепатоцитах путем стимуляции РНК-полимеразы I деятельности. Предыдущие исследования на людях сообщили, что силимарин лечение вызвало незначительное увеличение выживаемости пациентов с циррозом печени алкоголизм по сравнению с необработанными контролями. World J Hepatol. 2014 Mar 27;6(3):144-9. doi: 10.4254/wjh.v6.i3.144. жүктеу/скачать 2.54 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|