Silibinin, a natural flavonoid, modulates the early expression of chemoprevention biomarkers in a preclinical model of colon carcinogenesis

Abstract

Силибинин является активной составляющей, извлеченные из благословенной расторопша пятнистая (Silybum marianum). В предыдущем исследовании мы показали, что силибинин лечения индуцированной генерации активных форм азота (RNS), которые были связаны с активными формами кислорода (АФК), и причиной апоптоза и аутофагии в клетках HeLa. Еще одно исследование сообщило, что силибинин лечения ослабленных апоптотической влияние нитропруссида натрия (SNP) путем генерации АФК в феохромоцитомы крысы PC12 клеток [ 1 ]. Для выяснения отношений между RNS и окись азота (NO) в клетках HeLa, мы выбрали SNP как нет донора, подавляют жизнеспособность клеток. Мы обнаружили, что силибинин лечения не снижают цитотоксичность NO путем снижения АФК-индуцированных RNS уровнях; наоборот, силибинин лечение усиливает цитотоксичность нет. Предварительная обработка с не старьевщик PTIO сохранили жизнеспособность SNP - или силибинин-обработанных клетках. Buthionine sulfoximine (BSO) лечение также используется для разрушающим уровень глутатиона (GSH) и впоследствии повышать цитотоксичность нет. Предварительная обработка с BSO усиленной SNP-индуцированное снижение жизнеспособности клеток, но не было такого эффекта на силибинин-обработанных клетках. Эти результаты привели нас к исследовать вопрос о том силибинин лечения может вызвать истощение GSH. JNK и р53 было показано, посредником истощение GSH [ 2 , 3 ], и ранее мы продемонстрировали существование ROS-JNK-p53 цикла в силибинин-обработанных клеток HeLa [ 4 ]. Таким образом, мы предположили, что р53 играет важную роль в силибинин-индуцированной истощение GSH. Выяснение роли р53 в этом процессе, клетках А431 были использованы, потому что они, естественно, лишены функционального р53 (p53His273 мутации). К нашему удивлению, силибинин лечения не ниже уровня GSH в клетках А431, но относительно повышенные ГШ уровне. В отличие от рос уровень, уровень не был еще-регулируется силибинин лечение в клетках А431. В совокупности, эти результаты подтверждают идею о том, что силибинин-индуцированной истощение GSH, который опосредуется р53, усиливает цитотоксичность NO в клетках HeLa.

P53-mediated GSH depletion enhanced the cytotoxicity of NO in silibinin-treated human cervical carcinoma HeLa cells.

Fan S¹, Yu Y, Qi M, Sun Z, Li L, Yao G, Tashiro S, Onodera S, Ikejima T.

Author information

• 
  ¹China-Japan Research Institute of Medical and Pharmaceutical Sciences, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China.
  

Abstract

Silibinin is an active constituent extracted from the blessed milk thistle (Silybum marianum). In a previous study, we demonstrated that silibinin treatment induced the generation of reactive nitrogen species (RNS), which were associated with reactive oxygen species (ROS), and caused apoptosis and autophagy in HeLa cells. Another study reported that silibinin treatment attenuated the apoptotic effect of sodium nitroprusside (SNP) by generating ROS in rat pheochromocytoma PC12 cells [ 1 ]. To clarify the relationship between RNS and nitric oxide (NO) in HeLa cells, we chose SNP as a NO donor to inhibit the cell viability. We found that silibinin treatment did not reduce the cytotoxicity of NO by reducing the ROS-induced RNS levels; conversely, silibinin treatment enhanced the cytotoxicity of NO. Pre-treatment with the NO scavenger PTIO preserved the viability of SNP- or silibinin-treated cells. Buthionine sulfoximine (BSO) treatment was also used to deplete the level of glutathione (GSH) and subsequently enhance the cytotoxicity of NO. Pre-treatment with BSO enhanced the SNP-induced reduction of cell viability but had no such effects in the silibinin-treated cells. These results led us to investigate whether silibinin treatment could induce the depletion of GSH. JNK and p53 have been shown to mediate the depletion of GSH [ 2 , 3 ], and we previously demonstrated the existence of a ROS-JNK-p53 cycle in silibinin-treated HeLa cells [ 4 ]. Thus, we speculated that p53 also plays a crucial role in the silibinin-induced GSH depletion. To elucidate the role of p53 in this process, A431 cells were used because they are naturally devoid of a functional p53 (p53His273 mutation). To our surprise, silibinin treatment did not lower the GSH level in A431 cells but rather elevated the GSH level. Unlike the ROS level, the NO level was still up-regulated by silibinin treatment in A431 cells. Cumulatively, these findings support the idea that the silibinin-induced GSH depletion, which is mediated by p53, enhances the cytotoxicity of NO in HeLa cells.

В flavonolignan силибинин потенцирует TRAIL-индуцированного апоптоза в человеческой аденокарциномы толстой кишки и в производных TRAIL-резистентных метастатических клеток.

Силибинин, flavonolignan, является основным активным компонентом расторопши завод (Silybum marianum) и было показано, обладают противоопухолевыми свойствами. TNF-related apoptosis-индуцирующий лиганд (TRAIL) - это перспективный анти-рак агент, который селективно индуцирует апоптоз в раковых клетках. Однако, устойчивость к TRAIL-индуцированному апоптозу является важной и часто встречающейся проблемой в рак лечение. В этом исследовании мы исследовали влияние силибинин и след в in vitro модели человеческой толстой кишки рак прогрессии, состоящей из первичной кишки опухолевых клеток SW480) и их производные TRAIL-резистентных метастатических клеток (SW620). Мы показали, методом проточной цитометрии, силибинин и след синергически индуцированная гибель клеток в двух клеточных линий. -Регулирование смерть рецептора 4 (DR4) и DR5, силибинин было показано методом от-ПЦР и методом проточной цитометрии. Человеческий рекомбинантный DR5/Fc chimera белок, который имеет доминантно-негативное влияние со стороны конкурирующих с эндогенным рецепторов отменен клеточной гибели, индуцированной силибинин и тропы, демонстрируя активации рецептора смерти путь. Синергетический активации каспазы-3, -8 и -9, силибинин и след был показан колориметрических анализов. Когда ингибиторы каспаз были использованы, гибель клеток была заблокирована. Кроме того, силибинин и след потенцированные активации митохондриального пути апоптоза и вниз регулируется анти-апоптотических белков Mcl-1 и XIAP. Участие XIAP в сенсибилизации двух клеточных линий, чтобы тропа была продемонстрирована с помощью XIAP ингибитор embelin. Эти результаты демонстрируют синергическое действие силибинин и тропы, предполагая, химические и терапевтический потенциал, которые должны быть дополнительно изучены.

poptosis. 2012 Aug;17(8):797-809. doi: 10.1007/s10495-012-0731-4.

жүктеу/скачать 2.54 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: