Расторопши: семена ранней потенциальных

Обсуждение

Окислительный стресс относится к дисбалансу между прооксидантные и антиоксидантные факторы, которые находятся под контролем нескольких компонентов. Окислительный стресс может привести к разрушению клеток. АФК играют ключевую роль в окислительном стрессе и образуются как побочные продукты клеточного метаболизма, главным образом, в митохондриях [20]. Повышенный уровень митохондриальных АФК, как было показано, чтобы быть достаточным, чтобы вызвать апоптоз [21]. В настоящем исследовании апоптоза эффекты SIL в клетки HepG2 были связаны с быстрым ростом уровня внутриклеточных АФК. Кроме того, SIL-индуцированных АФК поколения было связано со значительным опустошении внутриклеточного GSH, который является основным небелковых клеточного антиоксиданта, который может устранить внутриклеточных АФК [2], [22]. Степень воздействия ROS и возмущения в ГШ окислительно-восстановительного баланса играют важную роль в определении того, клетки претерпевают pro-выживание или pro-смерть ответов [3]. Опухолевые клетки значительно более чувствительны к изменениям в уровне ГШ, потому что опухолевые клетки имеют повышенный уровень базальной АФК-опосредованных сигналов, которые приводят к увеличению темпов роста, метаболизма и пролиферации. Следовательно, опухолевые клетки могут быть более уязвимы к развитию окислительного стресса [20]. В настоящем исследовании, T-AOC был заметно снизилась в SIL-обработанных клеток HepG2. SIL могут быть исчерпаны в суммарной клеточной антиоксидантной способностью и повышенной Роси уровней выше определенной пороговой величины, которые, возможно, внесли свой вклад в индукцию апоптоза в клетки HepG2.

Исследования показали, что компоненты Notch пути являются надэкспрессироанных в ГЦК прогрессии, как это наблюдается для других генов, которые, как известно, участвуют в выживание раковых клеток [16], [23], [24]. АН и его коллеги обнаружили, что Notch1 и Notch4 являются маркерами плохого прогноза при гепатоцеллюлярной карциномы [16]. Укроп и коллеги подтвердили, что учредительные Notch2 сигнализации индуцирует печеночных опухолей у мышей [23]. Downregulating Notch1 может быть эффективным подходом к инактивации Улитка/E-кадгерина, регулируя циклооксигеназы-2, что приводит к ингибированию ГЦК клеточной инвазии и миграции [24]. Гиперэкспрессия из ключевых фактора транскрипции RBP-Jκ и вниз по течению целевой Hes1 также сообщалось ранее, в ГЦК [15], [25]. Наши результаты указывают на то, что SIL лечения уменьшились NICD, RBP-Jκ, и Hes1 в клетки HepG2. В сочетании с Notch1 siRNA in vitro или двойной антитромбоцитарной терапии in vivo, силибин уменьшение жизнеспособности ГЦК ячеек и/или ингибирует рост опухоли. Кроме того, рекомбинантные Jagged1 белок (известный Notch лиганда in vitro) эффективно гасит противоопухолевая активность SIL. Эти данные свидетельствуют о том, что противоопухолевая активность SIL в ГЦК ячеек, оказываемое частично через ингибирование Notch сигнального пути.

Способность индуцировать клеточный апоптоз является важным свойством многих кандидата противоопухолевых препаратов [21]. Апоптоз-это жестко регламентированный процесс, который включает по крайней мере один из каспазы-зависимых сигнальных путей, то есть, гибель клеток рецепторного пути или митохондриального пути. В митохондриального пути, разнообразные сигналы смерти, вызывают высвобождение и транслокации несколько про-апоптотических белков из митохондрий в цитозоль. Среди многочисленных факторов, известных модулировать апоптоз раковых клеток, белков Bcl2 семьи считаются основных регуляторов апоптоза. Bcl2 является анти-апоптозного белка, в то время как Bax является решающим pro-apoptotic и тумор-супрессорных белков. Соотношение анти-апоптотических pro-apoptotic молекул, таких как Bcl2/Bax соотношение, указывает порог чувствительности клеток к индукции апоптоза через внутренние пути [20]. Активация каспаз является поворотным этапом процесса апоптоза и срабатывает по сигналам от смерти факторов, митохондриальных изменений или повреждения ДНК вследствие внешних и/или внутренних оскорбления [26]. Независимо от того, апоптоз, опосредованный через клеточную смерть рецепторному пути или митохондриального пути, оба пути в конечном итоге активировать caspase3, который в свою очередь индуцирует фрагментации ДНК, характерные морфологические изменения, связанные с апоптотических клеток. Caspase3 активации указывает на то, ключевым и необратимой точки в индукции апоптоза [27]. Наши результаты показали, что SIL лечения не только downregulated белка Bcl2 выражения но также upregulated экспрессии белка Bax и caspase3 деятельности в клетки HepG2. Эти результаты показали, что SIL-индуцированного апоптоза произошло через митохондриальный путь и проверены результаты предыдущих исследований, которые показали, что ингибирование Notch сигнализации связана с индукцией митохондриального пути апоптоза в раковых клетках человека [28], [29].

Результаты настоящего исследования также показывают, что жизнеспособность клеток HepG2 была снижена за счет использования Notch1 siRNA (in vitro) или двойной антитромбоцитарной терапии (in vivo) в сочетании с SIL лечения. Эти перемены были связаны с уменьшается в NICD, RBP-Jκ, Hes1, и Bcl2 выражения, а также с увеличением экспрессии Bax. Эти результаты показывают, что ингибирование Notch сигнализации может быть роман означает повышения эффекты химиотерапии и задержки хемостойкость в больных раком. Кроме того, Notch1 siRNA или двойной антитромбоцитарной терапии в сочетании с SIL дальнейшего лечения подавляется экспрессия циклина D1 и survivin, два pro-survival факторы, которые являются мишенями для Notch1 и были зарегистрированы играть роль в сенсибилизации к противораковых препаратов [15], [30], [31]. Эти результаты позволяют предположить, что ингибирование Notch сигнализации может информировать ГЦК ячеек SIL лечения, предотвращая активацию pro-survival пути. Концентрация двойной антитромбоцитарной терапии (10 мг/кг), что не влияет на объем опухоли значительно (по сравнению с контрольной группой), был выбран на основе наших предварительных экспериментов. Как и ожидалось, двойной антитромбоцитарной терапии только в лечении, значительно снизилась NICD выражении (по сравнению с контрольной группой); однако, двойной антитромбоцитарной терапии одни только слегка затронуты Циклин D1, Bcl2 и Bax экспрессии генов, в то время как SIL имел очень мощное воздействие на опухоль подавление и на экспрессию этих белков. Эти результаты указывают на то, что Notch сигнализации-это не единственный путь, приводящий функцией SIL.

В заключение, эти эксперименты позволяют механистической доказательств того, что ПАЗ путь заблокирован, в ГЦК-клеток в ответ на SIL лечения. Подавление Notch сигнальной знакомит ГЦК ячеек SIL лечения, и регуляция Notch сигнальной desensitizes ГЦК ячеек SIL лечения. Кроме того, это потенцирование chemosensitivity насечкой торможение может быть связано с экспрессирован pro-survival пути. Поэтому мы предлагаем, что ингибирование Notch сигнализации может быть новая стратегия, которая может быть использована для предотвращения индукции рака механизмами выживания в расширенном ГЦК.