Розмарин и рак Rosmarinus officinalis & cancer Научные исследования

Обсуждение

Наши ЯМР исследования определены β-катенин, как прямой молекулярной мишенью CA. Три линии доказательств, утверждают, что наблюдаемые in vitro влияние сертификации на R4 мог объяснить его in vivo воздействие на β-катенин. Во-первых, СА-индуцированного снижения клеточной β-катенин уровнях относительно быстрое и зависит от дозы, в соответствии с прямым ответом. Во-вторых, СК₅₀s клеточной реакции CA перекрытия его K_я для вмешиваясь HD2-ARD привязки, его K_d для привязки к R4, и они находятся в пределах диапазона концентрации CA, которые способствуют in vitro агрегация R4. В-третьих, и самых важных, удаление H1 исключает CA реакции R4 in vitroи, что β-катенин in vivo. Эта превосходная корреляция между in vitro и in vivo эффекты CA согласуется с последним, отражая бывшего, который мы должны принять, чтобы быть ниже-учитывая, что ЦС может иметь дополнительные клеточные мишени, которые могут повлиять на β-катенин стабильности и выходы.

Наши биофизические данные позволяют предположить, что H1 содержит, или способствует, CA-связывающий участок R4, и, что ЦС действует через H1 обострить внутреннюю тенденцию ARD-N-terminus агрегировать. Учитывая, что H1 является внутренне неструктурированные19, и наши доказательства от AUC для CA-индуцированной R4 изменение формы, возможно, что ЦС, на привязку к ARD-N-terminus, индуцирует конформационные изменения H1, который способствует агрегации. Действительно, CA может исправить H1 в конформации, что несовместимо с его складывания в спиральную структуру, необходимую для размещения HD2 (ref. 18; Доп. Фиг. S3), что бы объяснить, почему ЦС мешает HD2-ARD привязки. Напомним также, что ЦС не мешает ARD привязки к nTCF (преимущественно с участием остатков ниже R4 (ref. 34)), что также подтверждает тезис о том, что СА-индуцированного возмущения ограничены ARD-N-terminus.

В свете нашего in vitro замечания, мы предлагаем метастабильных H1 также предрасполагает β-катенин к низкой степени агрегации in vivo и что это усугубляется CA, которые могли бы выделить β-катенин для proteasomal деградации27,35 (фиг. 8). Эта модель может объяснить, почему фосфорилированных пула β-катенин (который в эпителиальных клетках включает junctional β-катенин)36,37 является огнеупорной.: CA: это β-катенин бассейн находится в комплексе с E-кадгерина, высоким сродством лиганда (с K_d ~в 100 раз ниже K_я для CA ингибирование)38 , что дает спиральную структуру на H1, и защищает его от CA торможения. Отметим также, что β-катенин связывается с Е-кадгерина co-поступательно39,40, что бы оградить его от H1-опосредованной CA эффекты от его de novo синтез.

Согласно нашей модели, H1 представляет собой Ахиллесову Пяту " β-катенин, который, в отсутствие лигандов, которые стабилизируют его структуру в спиральную конформацию,18,22,23, выделяет его для proteasomal оборота в клетки путем стимулирования локализованных структурных возмущений, которые способствуют низкой степени агрегации. В частности, бесструктурной H1 также находится в β-катенин других видов (Дополнительная Таблица S5), так что эта Ахиллесова пята-видимому, сохраняется. Возможно, эта функция служит в качестве последнего средства мечения механизм для предотвращения случайной активации β-катенин, если не связывать его негативных регуляторов. Действительно, H1-зависимых proteasomal деградации β-катенина может быть особенно важно, когда его негативные регуляторы ограничение скорости, или отсутствует-например, в колоректальных раковых клеток при дисфункциональных APC, и низкий E-кадгерина уровни37. Это может оказать онкогенных β-катенин особенно уязвимы и подвержены деградации, свойства, общие с другими онкогенов, стабильность которого зависит от шапероны, такие как HSP90 (refs 41,42).

BCL9 семейные белков трансфер в и из ядра43, и может, таким образом, передать β-катенин от цитоплазмы, хроматина, привязанный Pygo в ФТС-целевых генов44. Интересно, что избыток BCL9 защищает unphosphorylated β-катенин против CA-индуцированной деградации, возможно, путем поощрения спиральную структуру H1. BCL9, таким образом, может иметь шаперон-подобных ('пасут') роль в защите онкогенных β-катенин против H1-зависимой деградации. Отметим, что BCL9 является меньшим сродством лиганда β-катенин, по сравнению с Е-кадгерина, и может, таким образом, должны присутствовать на высоких уровнях, чтобы позволить себе защиту. BCL9 белки надэкспрессироанных в клеток колоректального рака и карциномы12,13,14,15 и, таким образом, может быть эффективным в защите онкогенных β-катенин против H1-зависимой деградации.

β-Катенин-это непривлекательный лекарственной мишенью, потому что его широкое взаимодействие поверхностей с ФТС и негативных регуляторов4. Наши открытия, Ахиллесова пята у его N-конца, и H1-зависимые составные дестабилизирующих онкогенных β-катенин, открыть возможности для нового экрана конструкций, таких как ингибирование R4 взаимодействие с другими 'пасут' лигандов β-катенин-аналог перспективной стратегии, направленной на подавление онкоген взаимодействий с их стабилизации шаперона HSP9042. Действительно, как свидетельствуют последние исследования с c-Myc45 обеспечение адресности внутренне неупорядоченных участков белков, таких как H1 формируется стратегия поиска лекарств46.