С. А. Корниенко А. В. Кривопалов
жүктеу/скачать 7.14 Mb. Pdf көрінісі
|
| Результаты
1. В приготовленной суспензии, ядра клеток, находящихся в разных стадиях митоза были неповрежденными, хорошо окрашенными и легко различимыми. Ядра клеток в поздней профазе или метафазе были большими, округлыми, размером 13- 15 мкм в диаметре или овальной формы (13мкм х 16 мкм). Ядра клеток в интерфазе составляли 7–8 мкм, некоторые до 10 мкм в диаметре. Как показали исследования, в тканях контрольных (не подвергавшихся воздействию) планарий значение мито- тического индекса (МИ) было одинаковым в разных областях тела планарий и со- ставило: 0,76 ± 0,07 (n = 3, где n — число повторных экспериментов) в предглоточ- ной, 0,67 ± 0,18 (n = 3) в окологлоточной и 0,70 ± 0,10 (n = 3) в хвостовой областях тела. Анализ распределения пролиферирующих клеток по фазам митоза показал, что наибольший вклад в значение МИ вносили профазы и метафазы. В группе кон- трольных животных число профаз составило от 47 до 56 %, метафаз — 26–29 %, анафаз 4–16 % и телофаз — 10–17 % от общего числа митозов, подсчитанных в разных зонах тела планарий. При этом число профаз и метафаз практически не от- личалось в предглоточной, окологлоточной и хвостовой зонах, а число анафаз и те- лофаз варьировало. При воздействии на планарий колхицином было обнаружено постепенное накопление митозов, отражающееся в увеличении значения МИ во всех областях тела планарий. В течение первых 12 часов инкубации с колхицином это увеличение было небольшим. Более существенное возрастание МИ происходило к 24 ч. Так, к 8 ч после добавления колхицина, число митозов составило в предглоточ- ной области 0,85 ± 0,14 (n = 4), в окологлоточной области — 0,80 ± 0,10 (n = 4), в хвостовой области тела — 0,83 ± 0,09 (n = 4). К 12 ч после воздействия МИ в предглоточной области имел значение 0,87 ± 0,18 (n = 4), в окологлоточной облас- ти — 1,05 ± 0,23 (n = 5), в хвостовой области тела — 1,23 ± 0,13 (n = 4). А к 24 ч после воздействия в предглоточной области МИ составил 1,93 ± 0,16 (n = 8), в окологлоточной области — 1,47 ± 0,12 (n = 5), в хвостовой области тела плана- рий — 1,53 ± 0,14 (n = 4). Анализ распределения клеток по фазам митоза показал, что их соотношение под воздействием колхицина также изменялось в период с 8 до 48 часов инкубации. Паразитологические исследования в Сибири и на Дальнем Востоке 68 Так, через 24 ч наблюдался существенный сдвиг соотношения клеток в сторону метафаз. После 24 ч инкубации с колхицином в предглоточной области тела число профаз 8,0 ± 2,9 % достоверно уменьшалось (p < 0,001), а число метафаз 90,2 ± 2,6 % возрастало по сравнению с контрольными животными (p < 0,001), которые не подвергались воздействию. Такую же динамику наблюдали и в других областях тела планарий, где число метафаз после воздействия колхицином составило в окологло- точной и хвостовой зонах по 92,5 ± 3,5 % соответственно. Таким образом, колхицин к 24 ч воздействия вызывал торможение большинства пролиферирующих клеток планарий. К 48 ч дальнейшего существенного увеличения числа митозов в тканях планарий не было обнаружено. Необходимо отметить, что после 24 ч инкубации с колхицином в тканях планарий все еще было выявлено небольшое количество ана- фаз и телофаз (вместе около 6–8 %), что может свидетельствовать о существовании у этих животных медленно циклирующих стволовых клеток, избегнувших за 24 ч колхициновой блокады. 2. При подсчете митотических клеток на тотальных препаратах контрольных планарий S. mediterranea наблюдали ритмические колебания суточной пролифера- тивной активности клеток с периодом около 4 часов. Распределение пиков митоти- ческой активности в течение 24 ч имело многовершинный характер с максимумом (151 ± 3,8), наблюдавшемся в 16 ч дня и абсолютном минимуме, отмеченном в 2 ч ночи (108 ± 4,5 клеток на мм 2 ). Предварительная инкубация животных с серотони- ном (1µМ, 3 сут) изменяла у животных суточный ритм пролиферации, сглаживая ритмические колебания, наблюдаемые у особей контрольной группы. При этом об- щее число митотических клеток также снижалось и составило 76 % от контроля. жүктеу/скачать 7.14 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|