Сабақ 3 Зертханалық сабақ тақырыбы: Микроағзаларды микроскопиялық зерттеу және анықтау
жүктеу/скачать 30.82 Kb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Окраска волютина по методу Омелянского.
- Задание № 2.
- Задание № 3.
- Окраска гликогена и гранулезы.
- Задание № 4.
| Ход работы
Задание № 1. Обнаружить включения полифосфатов (волютин) в клетках дрожжей. Волютин в клетках грибов и дрожжей локализован в вакуолях, у бактерий и актиномицетов в цитоплазме. Является запасным фосор- и азотсодержащим веществом, производным нуклеиновых кислоты. Характерное свойство – метахромозия, т. е. способность приобретать иной цвет, чем окрашивающие его вещества. Окраска волютина по методу Омелянского. На предметном стекле готовят тонкий мазок из культуры микроорганизма, высушивают на воздухе, фиксируют на пламени, окрашивают карболовым фуксином 30-40 с и промывают водой. Дифференцируют, погружая его в склянку с 1%-ным раствором серной кислоты на 20-30 с и немедленно промывают водой. Серная кислота обесцвечивает цитоплазму, а зерна волютина остаются окрашенными фуксином. Препарат докрашивают метиленовым синим (1:40) 20-30 с, промывают водой, высушивают на воздухе и микроскопируют. На препарате зерна волютина окрашены в красный цвет, цитоплазма клетки – в голубой (рис. № 1, 2 приложения). Задание № 2. Обнаружить липидные гранулы в клетках дрожжей. Резервные липиды у дрожжей и мицелиальных грибов представлены нейтральным жирами; у бактерий эту функцию выполняет оксимасляная кислота. Окраска жировых включений. К капле водной взвеси микроорганизмов на предметном стекле добавляют каплю раствора судана III, накрывают покровным стеклом и микроскопируют, пользуясь объективом ВИ-40. Судан III растворяется в жировых включениях бактериальной клетки, окрашивая их в оранжево-красный цвет. Цитоплазма клетки остается бесцветной. Задание № 3. Обнаружить гликогеноподобные полисахариды в клетках дрожжей. Запасные вещества углеводной природы в клетках бактерий накапливаются в виде гранул. Гранулеза – крахмалоподобное вещество, при взаимодействии с реактивом Люголя окрашивающееся в синий цвет; гликоген – полисахарид окрашивающийся в таких же условиях в красно-коричневый цвет. Гранулеза встречается только в клетках прокариот. Окраска гликогена и гранулезы. К капле суспензии микроорганизма на предметном стекле добавляют каплю слабого раствора Люголя, накрывают пок ровным стеклом и микроскопируют, пользуясь объективом ВИ-40. Задание № 4. Обнаружить капсулы бактериальной клетки методом негативного контрастирования (у Azotobacter). жүктеу/скачать 30.82 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|