-
Вид животных
|
Кол-во голов
|
Антигены
|
Гипериммунные сыворотки
|
Опр. активность
|
Методы
|
КРС
|
5
|
Вирусов ИРТ
|
25600+6000
|
ИФА
|
КРС
|
5
|
ПГ-3
|
1:12800+2000
|
ИФА
|
Овцы
|
63
|
Бешенство
|
1:480+7
|
РСК
|
КРС
|
5
|
РС
|
1:12800+2000
|
ИФА
|
КРС*
|
5
|
Ящура тип А22
|
3,2+0,1 lg
|
РН
|
Овцы
|
45
|
хламидиоза
|
1:256-1:1024
|
РСК
|
Примечание:*- с вирусом ящура изучали иммуногенную активность вакцин с масляным адъювантом при ревакцинации животных.
Полученные данные позволили получать высокоэффективные специфические гипериммунные сыворотки для изготовления диагностикумов с использованием отобранных адъювантов на разных видах животных без заметных клинических изменений.
2.2.12. Способы получения лечебной ассоциированной гипериммуной сыворотки против пастереллеза, гемофилеза и стрептококкоза свиней с использованием различных видов животных
В последние ноды за рубежом изготавливается целый ряд вакцинных и сывороточных препаратов против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза, в том числе и ассоциированных.
В нашей стране сывороточные препараты против гемофилеза, пастереллеза и стрептококкоза не разработаны.
Значительный экономический ущерб, наносимый свиноводству гемофилезом, пастереллезом и стрептококкозом, и отсутствие эффективных специфических средств лечения и профилактики этих заболеваний послужило основанием для выполнения работы по разработке нового препарата – гипериммунной сыворотки против гемофилеза, пастереллеза и стрептококкоза свиней.
Исследования по отработке схемы гипериммунизации и получению опытных партий сывороток против гемофилеза, пастереллеза и стрептококкоза свиней проводили на Армавирской биофабрике.
Для этого были сформированы пять групп свиней по пять голов в каждой.
Гипериммунизацию свиней проводили путем внутримышечных инъекций возрастающих доз инактивированных концентрированных гемофилезного, пастереллезного и стрептококкозного антигенов с интервалом в 2-3 дня. При этом антигены вводили раздельно в разные участки тела животного. Через 7-10 дней у свиней брали кровь, получали сыворотку и определяли ее активность в реакции агглютинации (РА). Были испытаны пять схем, отличающихся дозой антигенов и количеством инъекций (таблица 13).
Как показывает таблица 11 (схема 1) гипериммунизация свиней путем 10-ти внутримышечных инъекций в возрастающих дозах инактивированного концентрированного пастереллезного и гемофиллезного антигенов в общем количестве по 1000 млрд. микробных тел (м.т.) каждого антигена, стрептококкового – в общей дозе 1255 млрд.м.т. позволяет получить сыворотку с титрами антител в РА: к P. multocida A, D – 1:400, B – 1:800, к H. pleuropneumoniae 5870 – 1:320, ГУ – 19 – 1:640, к Str. suis Касли – 1:200.
Увеличение числа инъекций больше 10-ти и количества антигенов пастереллезного и гемофилезного больше 1000 млрд.м.т., стрептококкового больше 1255 млрд.м.т. (схема 2, 3) не привело к дольнейшему повышению титра антител сыворотки в РА.
Увеличение количества антигенов и числа инъекций нецелесообразно, так как оказывает дополнительную нагрузку на иммунную систему продуцентов и не выгодна с экономической точки зрения.
Таблица 11
Активность в РА сывороток против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней, полученных разными способами
-
|
Схема
|
1
|
2
|
3
|
4
|
5
|
1
|
2
|
3
|
4
|
5
|
6
|
Количество инъекций
|
10
|
11
|
12
|
8
|
7
|
Количество (млрд.микробных тел)
Пастереллы
Гемофилы
Стрептококки
|
1000
1000
1255
|
1220
1220
1475
|
1470
1470
1725
|
645
800
1000
|
510
700
800
|
1
|
2
|
3
|
4
|
5
|
6
|
Активность сыворотки в РА
P. multocida A
В
D
H. pleuropneumoniae 5870
ГУ-19
Str. suis Касли
|
1:400
1:800
1:400
1:320
1:640
1:200
|
1:400
1:800
1:400
1:320
1:640
1:200
|
1:400
1:800
1:400
1:320
1:640
1:200
|
1:400
1:800
1:400
1:320
1:640
1:200
|
1:200
1:400
1:200
1:160
1:160
1:100
|
Уменьшение числа инъекций до 8-ми (схема 4) при уменьшении общего количества вводимых антигенов: пастереллезного до 645 млрд.м.т., гемофилезного – до 800 млрд.м.т., стрептококкового – до 1000 млрд.м.т., не привело к снижению титра антител в сыворотке.
Уменьшение числа инъекций до 7-ми (схема 5) при уменьшении общего количества вводимых антигенов пастереллезного – до 510 млрд.м.т., гемофилезного – до 700 млрд.м.т., стрептококкового – до 800 млрд.м.т. привело к снижению титров антител в полученной сыворотке в 2 раза.
Таким образом, сравнительная оценка 5-ти схем гипериммунизации свиней для получения сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней позволило предложить схему гипериммунизации путем 8-10-ти инъекций антигенов в общей дозе пастереллезного – 645-1000 млрд.м.т., гемофилезного – до 800-1000 млрд.м.т. и стрептококкового – 1000-1255 млрд.м.т. с интервалом в 2-3 дня. В виду разной реактивности продуцентов целесообразно проводить гипериммунизацию по циклам: 1-й цикл - 8 инъекций, 2-й цикл – 2 инъекции. Животных, давших активную сыворотку после 1-го цикла, переводят в эксплуатационную группу, остальных подвергают второму циклу гипериммунизации, что экономически оправдано.
Предложенный способ апробирован с положительными результатами в производственных условиях на Армавирской биофабрике.
Разработку способа получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней, включающего приготовление антигена из инактивированных и концентрированных культур Pasterella multocida серовариантов А, В и Д и Haemophilus pleuropneumoniae сероваров I и II, Streptococcus suis серовара II (штамм Касли), грундиммунизацию и гипериммунизацию возрастающими дозами антигена с последующим крововзятием и выделением целевого продукта, отличающегося тем, что в качестве продуцентов использовали волов, при этом гипериммунизацию проводили 7-10-кратными внутримышечными инъекциями в общей дозе каждого антигена 1800-2400 миллиардов микробных тел с интервалом 2-3 дня, а грундиммунизацию осуществляют подкожно в разные участки тела двукратно сначала по 10-15 млрд микр. тел, а через 14 дней по 20-25 млрд микр. тел с добавлением 10 см3 гидроокиси алюминия. Промышленные серии лечебных сывороток на волах имели следующую активность, гарантирующую высокую лечебную эффективность.
Титры антител зависели от антигена и индивидуальных особенностей продуцентов. Средние титры антител в РА в отношении H. Pleuropneumoniae (шт. 5870 и ГУ-19) и Str. suis (Касли) составили 1:474 (1:80-1:640); 1:640 (1:320-1:1280) и 1:200 (1:100-1:400), соответственно.
Наибольший титр в РПГА наблюдался в сыворотках в отношении П. мультоцида серовариантв В 1:700 (1:320-1:1600). Титры антител в отношении П. мультоцида серовариантоа А и Д были 1:130 (1:40-1:256) и 1:139 (1:64-1:240), соответственно.
В процессе эксплуатации 10 продуцентов было получено 3 сыворотки-сырца, которые были объеденены в одну опытную серию объемом 75 л.
В таблице 12 представлены титры антител в РА и РПГА опытной серии сыворотки в сравнении с показателями ТУ.
Достарыңызбен бөлісу: |