Строение клеточной стенки грамотрицательных и грамположительных бактерий

1. На фиксированный мазок положить кусочек фильтровальной бумаги и нанести с избытком 
основной краситель (1-2 мин) 
2. Слить краситель, промыть препарат водой, нанести раствор Люголя. (1-2 мин) 
3. Слить раствор Люголя, препарат поместить в спирт (или налить спирт на препарат). (30-60 сек) 
4. Тщательно промыть дистиллированной водой. 
5. Докрасить одним из дополнительных красителей. (1-2 мин) 
6. Промыть и подсушить препарат 
Грамположительные бактерии окрасились в красный цвет 
Причина 
Решение 
Мазок 
переобесцвечен 
(самая частая ошибка) 
1. Приготовить новый мазок и повторить окраску, уменьшив 
время обработки обесцвечивающим раствором 
2. Просмотреть много полей зрения в испорченном мазке. 
Иногда удается найти подходящие 
3. Если нет возможности приготовить новый мазок, полностью 
обесцветить имеющийся, тщательно промыть водой, 
высушить и повторить окраску 
Старая культура 
Окраска по Граму учитывается для суточных культур (для медленно 
растущих бактерий - через двое-трое суток). При длительном 
хранении на питательной среде наблюдается дегенарация 
муреинового слоя. Используйте культуру подходящего возраста 
Культура 
выращена 
в 
неблагоприятных условиях 
При выращивании на селективных средах может образовываться 
слишком тонкий муреиновый слой Культивируйте микроорганизм на 
полноценной среде 
Особенности 
строения 
клеточной 
стенки 
(грамвариабельные 
бактерии) 
нет 
Грамотрицательные бактерии окрасились в синий цвет 
Причина 
Решение 
Слишком густой мазок или наличие 
конгломератов 
(например, 
при 
аутоагглютинации) 
Краситель удерживается не клеточной стенкой, а за счет 
капиллярности пространств между клетками в скоплении 
1. Просмотреть много полей зрения, возможно в 
препарате есть поля зрения с нормальной 
\"густотой\" мазка 

2. Повторить приготовление препарата, взяв меньше 
культуры и приготовив мазок на большей 
площади 
3. При аутоагглютинации культуры взять для 
приготовления мазка дистиллированную воду 
Мазок плохо обесцвечен 
1. Просмотреть много полей зрения, возможно в 
препарате есть поля зрения с нормальным 
обесцвечиванием 
2. Повторить приготовление препарата и его окраску 
3. Дообесцветить имеющийся мазок 
4. Проверить 
правильность 
приготовления 
обесцвечивающего раствора. При повторении 
ошибки - заменить раствор. 
Особенности строения клеточной стенки 
(грамвариабельные бактерии) 
нет 

жүктеу/скачать 371.08 Kb.

Достарыңызбен бөлісу: