Хроматографическое изучение экстрактов василька шероховатого в сравнении с достоверными образцами веществ-свидетелей показало присутствие в них кофейной, феруловой, п-кумаровой, коричной, хлорогеновой и салициловой кислот. Причем доминирующей фенолкарбоновой кислотой является кофейная кислота.
Определение количественного содержания ФКК в 40 и 70% этанольных экстрактах из надземной части василька шероховатого проведено двумя методами. При этом было установлено, что максимальное количество ФКК извлекается 70% этанолом. Содержание ФКК в надземной части василька шероховатого (экстрагент – 70% этанол) в пересчёте на кофейную кислоту составило 4,9±0,5% прямым спектрофотометрическим методом и 1,6±0,5% – экстракционно-спектрофотометрическим методом.
Сущность второй методики, разработанной В.М. Косман и И.Г. Зенкевичем [5], заключается в избирательной экстракции одной из групп указанных веществ органическим растворителем при определенном значении pH водного слоя, при котором одна группа соединений находится преимущественно в протонированной форме, лучше растворимой в органическом экстрагенте, а вторая – в виде солей, лучше растворимых в воде. Авторами работы установлено, что при pH 2,0±0,1 кофейная кислота на 93–94% переходит в слой органического растворителя, тогда как рутин приблизительно на 85% остается в водном слое. Указанные условия признаны оптимальными для разделения соединений этих групп.
Принципиальным недостатком первого метода являются невысокая избирательность и точность, так как в данной области спектра могут поглощать и другие группы веществ, в частности, флавоноиды, что приводит к завышенным данным по содержанию ФКК.
Полученные данные позволяют сделать вывод о рациональности количественного определения суммы ФКК в надземной части василька шероховатого экстракционно-спектрофотометрическим методом.
Этот метод был использован для изучения динамики накопления ФКК в надземной части василька шероховатого, произрастающего на территориях Томской и Кемеровской областей в течение вегетационного периода 2006 г. Из данных, представленных на рисунке 1, следует, что максимальное содержание ФКК наблюдается в период массового цветения растения (1,67±0,04%), что характерно для большинства представителей семейства астровых. На основании полученных результатов можно рекомендовать заготовку надземной части василька шероховатого в фазе массового цветения.
Изучение содержания ФКК в различных органах надземной части василька шероховатого, собранной в фазе цветения, показало, что максимальное содержание веществ наблюдается в листьях (1,83±0,04%), несколько ниже во всей надземной части (рис. 2).
|
|
Рис. 1. Сезонная динамика содержания ФКК в зависимости от фазы развития надземной части василька шероховатого (1 фаза вегетации; 2 фаза бутонизации; 3 фаза массового цветения; 4 фаза плодоношения)
|
Рис. 2. Содержание ФФК в различных органах надземной части василька шероховатого, собранной в фазе массового цветения (1 листья; 2 надземная часть;
3 цветочные корзинки; 4 стебли)
|
Чтобы расширить представление о содержании ФКК в объекте нашего исследования, было проведено определение их в надземной части василька шероховатого из 9 мест произрастания (табл. 1) и в зависимости от года сбора сырья (место сбора – с. Заварзино Томского района) – с 2003 по 2007 г. (табл. 2). Содержание ФКК колеблется в интервале – от 1,3 до 2,0%, что свидетельствует о незначительном различии в содержании этой группы веществ в васильке шероховатом, произрастающем на территориях Томской и Кемеровской областей. Однако содержание ФКК в сырье, собранном в одном месте, в течение двух последних лет стабильно, а при хранении более двух лет – резко уменьшается (табл. 2).
Таблица 1. Определение содержания ФКК в надземной части василька шероховатого в зависимости от места произрастания растения (2006–2007 гг.)
№,
п/п
|
Место сбора
|
Содержание ФКК
в пересчете на кофейную кислоту, %
|
1
|
с. Заварзино, Томская обл. (луг у леса)
|
1,50±0,04
|
2
|
с. Петрово, Томская обл. (опушка леса)
|
1,80±0,04
|
3
|
с. Межениновка, Томская обл. (опушка леса)
|
1.82±0,05
|
4
|
г. Калтан, Кемеровская обл. (луг у соснового леса)
|
2,18±0,03
|
5
|
Новобалохоновка, Кемеровская обл. (луг у осинового леса)
|
1,36±0,04
|
6
|
с. Новотроицк, Томская обл. (березовый лес)
|
1,67±0,04
|
7
|
с. Нащеково, Шегарский район Томской области (луг у леса)
|
2,14±0,05
|
8
|
с. Уртам, Шегарский район Томской области (опушка леса)
|
1,34±0,04
|
9
|
Лагерный сад, окрестности г. Томска
|
1,38±0,04
|
Таблица 2. Определение содержания ФКК в надземной части василька шероховатого в зависимости от года сбора растения (место сбора – с. Заварзино, Томский район)
№,
п/п
|
Год сбора
|
Срок хранения сырья
до определения содержания ФКК
|
Содержание ФКК
в пересчете на кофейную кислоту, %
|
1
|
2003
|
4 года
|
0,55±0,04
|
2
|
2004
|
3 года
|
0,74±0,05
|
3
|
2005
|
2 года
|
0,87±0,05
|
4
|
2006
|
1 год
|
1,49±0,04
|
5
|
2007
|
три месяца
|
1,67±0,04
|
Достарыңызбен бөлісу: |