Раздел ЦИТОЛОГИЯ
ЛПЗ № 3: Морфология клеток
Цель занятия:
-
Ознакомиться со структурой клетки
-
Научиться различать структуры с помощью светового микроскопа.
Задания:
-
Изучить препарат «Растительные клетки кожицы лука» рассмотреть их и зарисовать при большом увеличении;
-
Изучить препарат «Нейроны спинномозгового узла», рассмотреть нейроциты и зарисовать их при большом увеличении;
-
Изучить препарат «Аппарат Гольджи» под большим увеличением микроскопа, найти и обозначить локализацию пластинчатого комплекса;
-
Изучить электронограммы и обозначить структуры.
Рис. 1 Растительные клетки кожицы лука. Ув.40:
Рис. 3 Аппарат Гольджи Ув. 40:
Рис.4 Фибробласт выйной связки Электронограмма.18000(по Россу):
1 -
2 –
3 –
4 –
5 –
6 –
7 - коллагеновые фибриллы; 8 - эластиновые фибриллы
Рис. 5 Плазматическая клетка селезенки крысы. Электронограмма 30000 (по Ю.И.Афанасьеву, кафедра гистологии I ММИ):
1 –
2 –
3 –
Рис. 6 Десмосомы:часть клеток шиповатого слоя кожи живота человека. Электронограмма. 40 000 (по И.Н.Михайлову и Л.Н.Михайловой):
1 -
2 -
3 –
4 –
5 –
6 –
Рис. 7 Макрофаг. Электронограмма макрофага
из лимфатического узла. 13 000 (по И.Б.Токину):
1 –
2 -
3 –
4 –
5 –
6 -
Рис. 8 Плазматическая клетка селезенки крысы. Электронограмма 30000
(по Ю.И.Афанасьеву, кафедра гистологии I ММИ):
1 –
2 –
3 –
4 –
Рис.9 Десмосомы:часть клеток шиповатого слоя кожи живота человека. Электронограмма. 40 000 (по И.Н.Михайлову и Л.Н.Михайловой):
1 –
2 –
3 –
4 –
5 -
Рис. 10 Соединения эпителиоцитов по типу "замка"
Электронограмма клеток мерцательного эпителия бронха. 21 500
(по Ю.Н.Королеву; кафедра гистологии I ММИ):
1 –
2 –
3 –
4 –
Рис. 11 Различные контакты эпителиоцитов (апикальная часть клеток желчного пузыря) Эпителий слизистой оболочки желчного пузыря собаки. Электронограмма 16 000(по Джонсону с соавторами):
1 –
2 –
3 –
4 –
5 –
6 –
Рис. 12 Микроворсинки (щеточная каемка) Апикальная часть клетки проксимального отдела нефрона. Электронограмма. 124 000 (по В.В.Королеву, кафедра гистологии I ММИ):
1 –
2 -
ЛПЗ № 4: НЕПОСТОЯННЫЕ КЛЕТОЧНЫЕ ВКЛЮЧЕНИЯ
Цель занятия:
-
Ознакомиться с клеточными включениями и методами их окраски
-
Научиться определять эти структуры под микроскопом
-
Уметь дать определение этим включениям
Жиры обычно окрашивают жирорастворимыми красителями. К ним относятся суданы.
Гликоген – это сильно разветвленный сложный полисахарид синтезируемый из глюкозы. Он накапливается в гепатоцитах печени., волокнах поперечнополосатой мускулатуры, хряще и других. Гликоген под воздействием ферментов расщепляется на моносахариды. Гликоген хорошо растворяется в воде и поэтому фиксируют его в специальных фиксаторах. Лучшим оказался фиксатор, предложенный А.Л. Шабадашем (спирт, азотнокислая медь, азотнокислый кальций, формалин).
Для гистохимического выявления гликогена применяется реакция Шиффа с фуксинсернистой кислотой после окисления периодатами натрия или калия. Метод основан на окислительном расщеплении 1,2 – гликоля гликогена на альдегиды. Контролем реакции является предварительная обработка материала в амилазе слюны.
Для определения нуклеиновых кислот в качестве фиксатора обычно используется жидкость (смесь) Карнуа. Окрашивание срезов производится методами Браше и Эйнарсона. При использовании метода Браше срезы обрабатываются двумя основными красителями метиловым зеленым и пиронином. При этом метиловый зеленый окрашивает ДНК, локализованные в хроматиде ядра, а пиронин соединяется с РНК, находящейся как в ядре, так и в цитоплазме. Таким образом, одновременно окрашиваются обе нуклеиновые кислоты.
При использовании метода Эйнарсона (1951) красителем является галлоцианин, который взаимодействуя с хромовокалиевыми квасцами, образует краплак-катион. При низших значениях среды (рН=0,8-1,75) краситель связывается с нуклеиновыми кислотами. Эта реакция считается высокоспецифичной и поэтому применяется для количественного анализа нуклеиновых кислот. Основным недостатком метода является невозможность визуальной дифференцировки ДНК и РНК.
Для выявления белков, содержащих три важнейших аминокислоты – тирозин, триптофан, гистидин применяется метод тетразониевого азосочетания по Даниели (1947). Он основан на двух реакциях, следующих одна за другой. Первая реакция азосочетания происходит между тетразосоединением и аминокислотами. Затем свободная диазогруппа реагирует амино- и оксигруппами. В результате получается окраска серо-голубого цвета разной интенсивности.
В гистохимии белков можно применять метод сулема – бромфеноловый синий. Он был предложен Деррамом (1950) для определения белка при хромотографии на бумаге. В настоящее время его модификация используется для гистохимического выявления общего белка. Установлено, что на препаратах количество связанного красителя пропорционально количеству белка в соответствии с законом Ламберта – Бера.
Задание:
-
Рассмотреть препарат «Включения гликогена в печени» и обозначить включения гликогена в гепатоцитах;
-
Рассмотреть препарат «Нуклеиновые кислоты в нейронах спинального ганглия», найти включения ДНК и РНК в ядрах и ядрышках нейронов;
-
Рассмотреть препарат «Включения липидов в клетках коры надпочечников» в виде мелких капелек;
-
Ознакомиться с электронограммами включений.
Рис. 13 Включения гликогена в печени крысы
до и после кормления животного:
Рис. 14 Нуклеиновые кислоты в нейронах спинального ганглия. Ув. 40х:
Рис. 15 Включения липидов в клетках коры надпочечников Ув. 40х:
Рис. 16 Адипоцит бурой жировой ткани
Клетка бурой жировой ткани новорожденного крысенка
(по Ю.И.Афанасьеву и Е.Д. Колодезниковой, кафедра гистологии I ММИ):
1 – ;
2 – ;
3 – .
ЛПЗ №5: ДЕЛЕНИЕ КЛЕТОК
Цель занятия:
-
Усвоить способы деления клетки
-
Изучить структуры ответственные за деление клетки
-
Выяснить биологическое значение различных способов деления клетки.
Задания:
-
Изучить препарат «Растительные клетки кожицы лука» рассмотреть их и зарисовать при большом увеличении;
-
Изучить препарат «Нейроны спинномозгового узла», рассмотреть нейроциты и зарисовать их при большом увеличении;
-
Изучить препарат «Центросомы в делящихся яйцах лошадиной аскариды» при большом увеличении, сделать обозначения.
-
Изучить препарат «Амитоз в эпителии мочевого пузыря»
Рис. 17 Растительные клетки кожицы лука. Ув 40х:
1-
2-
3-
Рис. 18 Нейроны спинномозгового узла. Ув. 40:
Рис. 19 Центросомы в делящихся яйцах лошадиной аскариды Ув. 40х:
Рис. 20 Амитоз в эпителии мочевого пузыря в 40х:
РАЗДЕЛ «ЭМБРИОЛОГИЯ»
ЛПЗ № 6: ПОЛОВЫЕ КЛЕТКИ
Цель занятия:
-
Усвоить отличительные особенности половых клеток от соматических клеток
-
Изучить процессы сперматогенеза и оогенеза
-
Выяснить биологическое значение мейоза.
Задания:
-
На препарате «Сперматозоиды петуха» при малом увеличении найти скопление спермиев, затем рассмотреть их при большом увеличении;
-
Изучить препарат «Семенник барана» при большом увеличении и отметить на рисунке его структуры;
-
Просмотреть препарат «Яичник млекопитающих» и выбрать фолликулы, в которых видна яйцеклетка с ядром и другие структуры, последовательно отражающие этапы роста ооцита и перестройку окружающих его оболочек;
-
Заполнить таблицу «Отличия процесса спермиогенеза от процессов оогенеза» рисовать схему яичника и семенников, в которых отражены все стадии развития фолликулов и спермиев;
-
Дополните рисунки 9,13.
Рис. 21 Сперматозоид млекопитающих (по С.Л. Кузнецову):
Рис. 22 Строение сперматозоида:
1-
2-
3-
4-
5-
6-
7-
8-
9-
9-
10-
11-
12-
Рис.23 Семенники хряка Ув. 10х:
Рис. 24 Семенники хряка. Ув. 40х:
Рис. 25 Строение яичника крольчихи. Ув. 40х:
Рис. 26 Строение яйцеклетки:
Таблица 2. Отличие процессов спермиогенеза от оогенеза
|
Спермиогенез
|
Оогенез
|
Начало
генеза
|
|
|
Периоды
Развития
|
|
|
Количество развивающихся клеток из одного (й) клетки
|
|
|
Размеры
|
|
|
ЛПЗ № 7: РАЗВИТИЕ ЛАНЦЕТНИКА И АМФИБИЙ
Цель занятия:
-
Изучить периоды эмбриогенеза и ознакомиться с основными эмбриологическими терминами на примере ланцетника
-
Сравнить развитие ланцетника и амфибии
-
Распознавать зародыши на ранних стадиях эмбриогенеза – оплодотворения, дробления, гаструлы.
Задания: По муляжам, плакатам и демонстрационными препаратам разобрать следующие вопросы:
-
Заполнить таблицы «Классификация типов яйцеклеток»;
-
Заполнить таблицу «Классификация типов дробления»;
-
Заполнить таблицу типы и строение бластул, гаструла; типы гаструляции;
-
Зарисовать этапы эмбрионального развития ланцетника;
-
Решить ситуационные задачи.
Таблица 3. Классификация яйцеклеток
Название
|
Описание
|
Принадлежность
|
по количеству желтковых включений
|
Алецитальные
|
|
|
Олиголецитальные
|
|
|
Полилецитальные
|
|
|
по распределению желтковых включений в цитоплазме яйцеклетки
|
Изолецитальные
|
|
|
Центролецитальные
|
|
|
Мезолецитальные
|
|
|
Телолецитальные
|
|
|
Таблица 4. Классификация типов дробления
Название
|
Описание
|
Принадлежность
|
По полноте деления зиготы
|
Полное
|
|
|
Неполное
|
|
|
По размерам образующихся бластомеров
|
Равномерное
|
|
|
Неравномерное
|
|
|
Временным интервалам между делениями
|
Синхронное
|
|
|
Асинхронное
|
|
|
Таблица 5 Способы образования гаструл
Название
|
Описание
|
Принадлежность
|
Инвагинации
(впячивание)
|
|
|
Эпиболия
(обрастание)
|
|
|
Иммиграция (выселение)
|
|
|
Деляминация
(расслоение)
|
|
|
Достарыңызбен бөлісу: |