Оценка возможности использования хромоскопии с конго красным для диагностики инвазии

Григорян Т.М., Лен. Обл. ГУЗ «Детская клиническая больница», главный врач –Окунев А.Ю., г. Санкт-Петербург, Россия. Милейко В.Е., ООО «Синтана СМ», директор - доцент Иванова С.Ю., г. Санкт-Петербург, Россия.

Обычно хромоскопия с индикатором-красителем Kонго красным (C.I. 22120) применяется для оценки кислотопродуцирующей функции желудка [1], а для диагностики НР используются другие методы: неинвазивные [2-4] и инвазивные [2,5]. Часть из них построена на использовании кислотно-основных индикаторов [5-7]. Для оценки уреазной активности биоптата обычно используют индикаторы с цветовым переходом в нейтралной и слабо щелочной среде [8]. При оценке уреазной активности по содержанию аммиака водухе, цветовые переходы происходят в кислой среде [8-11], причем один из неинвазивных методов использует обесцвечивание Крезолового красного [11] при переходе из кислой среды в слабо-кислую (pH 0,5-2,5). В этих кинетических методиках [8-11] используются довольно существенные количества карбамида, который гидролизуется уреазой НР главным образом в желудке.

Как видно из кинетических зависимостей, полученных по методике ГЕЛИК-тест [10], у пациента с инвазией НР гидролиз дозы карбамида проходит за 10-20 минут. В ходе этого процесса в желудке создается газовоздушная среда, обогащенная существенным количеством аммиака. Выделившийся аммиак постепенно реагирует с соляной кислотой непосредственно на слизистой желудка и, часть кислоты в зоне реакции нейтрализуется. Причем процесс этот протекает во времени. Если слизистая покрыта раствором Конго красного, а в ней превалирует кислотопродуцирование, то она остается окрашенной в синий цвет. Те зоны слизистой, где гидролиз аммиака идет особенно интенсивно, обесцвечиваются в первую очередь, тем более, что места инвазии НР имеют нейтральную среду и до воздействия порции карбамида [12].

Задача исследования состояла в том, что бы получить экспериментальное подтверждение возможности визуализации этого процесса в ходе плановой хромогастроскопии.

Для исследования были выбраны десять пациентов страдающих гастродуоденальной паталогией с повышенной секрецией соляной кислоты. Эзофагогастродуоденоcкопия проводилась на аппаратуре “Olimpys” GIF XP-20. Для хромогастроскопии использовали 0,2% раствор Конго красного, содеоржащий дополнительно карбамид в концентрации 10%. До выполнения эндоскопического обследования у пациента измеряли содержание аммиака в воздухе ротовой полости [9] индикаторными трубками ИТМ-12эо с электромеханической непрерывной аспирацией в течение 7 минут. До хромоскопического обследования у пациента брали биоптат антрального отдела на оценку уреазной активности с использованием сухого уреазного ультраэкспресс-теста HELPIL [8,9] ООО “Синтана СМ”. Затем проводили хромогастроскопию, дополненную нагрузочным тестом на уреазную активность, благодаря присутствию карбамида в растворе индикатора. В ходе хромогастроскопии из места наиболее быстрого обесцвечивания слизистой антрального отдела желудка, предположительно соответствующей зоне максимальной инвазии НР, брали биоптат и оценивали его уреазную активность HELPIL-тестом. Через 2-3 минуты после завершения эндоскопического обследования у пациента исследовали содержание аммиака в воздухе ротовой полости [10], как описано выше.

По результатам диагностических исследований у девяти пациентов был обнаружен НР. Результаты по АЭРОТЕСТ [9], ГЕЛИК-тест [10] и HELPIL-тест [7,8] не расходились между собой. У одного из пациентов в ходе исследования ни одним из приведенных выше методов НР обнаружен не был. Характер и скорость обесцвечивания (из синего в красный) Конго красного на слизистой желудка у этого пациента существенно отличалась от других. У трех из девяти пациентов обесцвечивание происходило медленно. У остальных пациентов быстро происходило зональное обесцвечивание индикатора на слизистой желудка быстро распространяющееся на весь антральный отдел желудка. Последнее позволяет судить о том, что предлогаемый хромогастроскопический подход позволяет оценить степень инвазии НР интегрально, а не только ее наличие.

В результате исследования установлено, что создание хромоскопической методики интегральной оценки инвазии НР и выявление зон для прицельной биопсии с использованием соляно кислого комплекса Конго красного (pH перехода от 3,0 до 5,2) возможно. Дополнительно установлено, что наличие в биоптате следов Конго красного, как и в случае использования двух индикаторов совместно [6], не мешает использованию в уреазном тесте в качестве индикатора Бромтимолового синего.

1. 
   Т.М. Григорян, В.Е. Иванова Роль хромоскопии в диагностики гастродуоденальной патологии у детей // Второй Российско-Японский симпозиум по эндоскопии пищеварительного тракта, 9 февраля 2000, Москва с. 20.
   
2. 
   Хеликобактериоз в хирургической гастроэнтерологии.// Л.В.Поташов, В.П. Морозов, В.М. Савранский и др. - СПб:Судостроение, 1999.-143 с.
   
3. 
   Корниенко Е.А., Милейко В.Е.,Самокиш В.А. и др. Неинвазивные методы диагностики инфекции, вызванной Helicobacter pylori. // Педиатрия, 1999, №1, с.37-41.
   
4. 
   Philips M. US Pat. 5,848,975 29.09.1997.//Breath test for helicobacter pylori. 15.12.1998.
   
5. 
   Григорьев П.Я., Исаков В.А., Розенталь В.М. и др., Авт. св. СССР № 1564192 //Способ определения Campylobacter pyloridis при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. 18.04.1988.
   
6. 
   Р. F.W. Jackson US Pat. 5,439,801 14.02.1994. //Test composition for the rapid detection of helicobacter pylori in gastric biopsy tissue. 08.08.1995.
   
7. 
   Корниенко Е.А., Гольбиц С.В.,Милейко В.Е. и др. О диагностике инфекции Helicobacter pylori у детей.//Российский вестник перинатологии и педиатрии, 1998, №5, с 34.
   
8. 
   Корниенко Е.А, Григорян Т.М., Милейко В.Е. Комплекс методик для диагностики инвазии Helicobacter pylori.// Сб. Всероссийской конференции с международным участием «Новое в экологии и безопасности жизнедеятельности», СПб,1997,т. Ш, с.432-438.
   
9. 
   Жебрун А.Б., Сафонова Н.В., Довгаль С.Г и др. RU 2091796. 27.09.97.//Способ диагностики хеликобактериоза.28.05.93.
   
10. 
    Корниенко Е.А., Милейко В.Е., RU 2100010 C 01. 20.02.1996.// Способ неинвазивной диагностики хеликобактериоза ин виво. 27.12.1997.
    
11. 
    Ito Masaharu, Matsunobu kunitoshi, Uno Masanori, Kanemaki Susumu, Kobashi Kyoichi. US Pat. 5719052 11.01.1996// Simple examination method of infection with Helicobacter pylori and device therefor. 17.02.1998. - Japan Pat. 07289289 pub. 07.11.1995. Appl. 06089515, filing 27.04.1994.
    
12. 
    В.Т. Ивашкин Helicobacter pylori: биологические характеристики, патогенез, перспективы эрадикации.// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колонопрактологии, 1997, № 1, с. 21-23.