C A A C G T G C A G 5′ - Секвенстелген гельді астынан үстіге қарай оқиды (5′-тен 3′).
- Максам және Гильберттің химиялық әдісі
- Фосфодиэфирлік қатынасына қажет 3’-ОН группасы ddNTPs жок.
- 4 түрлі реакция әртүрлі ddNTPs қоспасымен
- Осы 4 қоспа гельдің 4 түрлі колонкасында электрофорез жүргізіледі
- Гельдің нәтижелері астынан үстіге қарай оқылады
- Мультициклдық молекулар, олар абсорцияланып және флуоресцент шамдарын ерекше сәулеұзындыктарында шығарады.
- Секвенирдеу әдістерінде нуклеотидтермен ковалентті байланысады.
- Мысалы, флуоресцин мен родамин туындылары.
- Праймер бояғышы, флуоресцентті бояғыш коньюгантты нуклеотидттерден тұрады, секвенс тізбегінің 5′ ұшын таңбалайды.
- Секвенсттің терминатор бояғышы молекуласы ковалентті дидеоксинуклетидпен байланысады және тізбектің 3′ ұшын таңбалайды.
|
