-қосымша (міндетті) Сарқынды суларда сальмонелларады анықтау әдісі

10-қосымша (міндетті)

Сарқынды суларда сальмонелларады анықтау әдісі

Тазартуға дейінгі, биологиялақ тазартқаннан кейінгі, зарарсыздандырғанға дейін сарқынды суды себу сызбанұсқасы: екі еселеніп шоғырланған жиналу ортасына 100 мл тең мөлшерде себеді, 10 мл сарқынды сұйықтықты 100 мл қалыпты шоғырлану ортасына себеді, 1 мл сарқынды суды қалыпты шоғырланудың 10 мл ортасына енгізеді. Зарарсыздандырғаннан кейін сарқынды суды себу сызбанұсқасы: 500 мл сарқынды суды экспедициялық жазбаның магнийлік ортасына енгізеді; 500 мл – екі еселенген шоғырланудың басқа шоғырлану ортасының біріне енгізеді.

Егістерді 37°С температурасында 18-20 сағат бойына инкубациялайды. Келесі күні лайланған кезде оқшауланған колонияларды алатындай есеппен висмут-сульфиттік агар салынған екі шыны аяққа ілмекпен жинақталу орталарынан себеді. Жинақталу орталарын термостатта 48 сағатқа дейін өсіреді, егістер салынған шыны аяқтарды 37°С температурасында инкубациялайды және 18-24 сағаттан кейін қарайды. 24 сағаттан кейін шыны аяқтарда өсу болмаған жағдайда оларды 48 сағаттан кейін келесі қарау үшін термостатта қалдырады, ал жинақталу ортасынан висмут-сульфиттік агарды қайталап егеді. Сальмонеллалар колонияларындағы висмут-сульфиттік агарда - айналасында сұрлау металлды жылтыр бар қара дөңгелек, колония астындағы ортаның қараюын тудыратын қара ортасы бар және қара ортасы жоқ жасыл. Глюкозаның, лактозаның, сахарозаның ферменттелуін, күкірт сутегінің қалыптасуына, несепнәрдің бөлшектенуіне мүмкіндік беретін (Рессель, Олькеницкий орталары және т.б.) аралас ортадағы сальмонеллаларына тән 4-5 колонияларды әрбір шыны аяқтан алады. Аралас ортада сальмонеллаларға тән реакция табылған кезде жалпы қабылданған әдістеме бойынша күкірттің түрнұсқасын анықтау бойынша күкірттік бірегейлендіру жүргізіледі (глюкозаны ферменттейді, лактозаны, сахарозаны, несепнәрді ыдыратпайды, күкірт сутегін қалыптастырады).

11-қосымша (міндетті)

Сарқынды суларда колифагтарды анықтау тәсілі

1. Сарқынды сулардағы колифагтарды анықтау 3 көлемді тікелей себу тәсілімен жүргізіледі: тазартқанға дейін - 0,1 мл, 1 мл және 10 мл; тазартқаннан кейін – қоректік агар салынған Петри шыны аяқтарында Е.соli К₁₂ F⁺ газонында лизис аймақтарын (түйіндіктерді) одан әрі есепке алу арқылы бір сынаманың 10 мл алынады. Бақылау үшін қоректік агардағы Е.соli К₁₂ F⁺ таза газоны бар шыны аяқтар пайдаланылады.

2. Талдауды жүргізу.

Талдауды жүргізгенге дейін 24 сағат қалғанда қоректік агармен таянатын Е.соli К₁₂ F⁺ детекторлық дақылын егу қажет. Талдауды жүргізу алдында 5 мл стерильді су құбыры суындағы бактерияларды шаю керек және лайлану стандарты бойынша 1 мл-гі 10⁹ бактериялық жасушалардың шоғырлануында Е.соli дақылының тұнбасын дайындаңыз.

2 %-қ қоректік агарды ерітіп, 45°С температурасын дейін суытыңыз (Хоттингер, МПА, шабақ гидролизатында). Сынаманың 50 мл көлемін 15 минут ішінде қарқынды сілку арқылы 5 мл хлороформмен өңдеңіз және содан кейін хлороформ толығымен тұнғанға дейін сынаманы қойып қойыңыз. Зерттелетін суды 10 мл-ден 3 стерильді Петри шыны аяқтарына құйыңыз. Салқындатылған қоректік агарға 100 мл агарға 1,0 мл бактериялар шайындысы есебінен (1 мл-де 10⁹ бактериялық жасушалардың шоғырлануы) Е.соli шайындысын қосыңыз және абайлап араластырыңыз. Алынған қоспадан алдымен бос Петри шыны аяғына 15 мл құйыңыз (Е.соli газонын бақылау), содан кейін зерттелетін су құйылған барлық шыны аяқтарға құйыңыз. Шыны аяқтардың ішіндегісін (10 мл сынама мен 15 мл агар) жеңіл шайқау арқылы араластырыңыз. Шыны аяқтарды салқындау үшін бөлме температурасында қалдырыңыз, содан кейін төңкеріп, түбін жоғары қаратып, +37°С температурасында 18 сағатқа термостатқа салыңыз.

3. Нәтижелерді есептеу

12-қосымша

Құбырларды дезинфекциялау кезінде хлорлы судың қажетті мөлшері

100 п.м-ге құбырдың диаметріне байланысты 50 мг/л мөлшерімен хлорлы судың литрдегі қажетті мөлшері
№	Ерітіндінің шоғырлануы, %	Белсенді хлордың болуы, г/л	Д, мм	50	100	150	200	250	300	350	400	450	500	600	700	800	900	1000	1100
			көлем, м3	0,2	0,78	1,7	3,13	4,9	7,1	9,6	12,5	15,9	19,6	28,3	38,5	50,2	63,5	78,5	101
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14	15	16	17	18	19	20
1	0,1	1		10	39	85	157	245	355	480	623	795	980	1415	1925	2510	3175	3925	5655
2	0,2	2		5	19,5	42,5	78,5	122	177	240	312	397	490	708	963	1255	1587	1963	2828
3	0,3	3		3,3	13	28,3	52,3	82	118	160	207	265	327	472	642	837	1058	1308	1885
4	0,4	4		2,5	9,8	21	39	61	89	120	156	199	245	354	481	628	794	981	1414
5	0,5	5		2	8	17	31	49	71	96	125	159	196	283	385	502	635	785	1131
6	0,6	6		1,7	6,5	14	26	41	59	80	104	133	163	236	321	418	529	654	943
7	0,7	7		1,42	5,6	12	22	35	51	69	89	114	140	202	275	359	454	561	808
8	0,8	8		1,25	5	10,6	20	31	44	60	78	99	123	177	241	314	397	491	707
9	0,9	9		1,1	4	9,4	27	27	39	53	69	88	109	157	214	279	353	436	628
10	1,0	10		1	3,9	8,5	15,7	24,5	35,5	46	62	80	98	142	193	251	318	393	565
11	2,0	20		0,5	2	4,3	7,9	12	18	24	31	40	49	71	96	126	159	196,3	283
12	3,0	30		0,3	1,3	2,8	5,2	8,2	12	16	21	27	33	47	64	84	106	131	189
13	4,0	40		0,2	1	2,1	3,9	6,1	9	12	16	20	25	35	48	63	79	98	141
14	5,0	50		0,2	0,8	1,7	3,1	4,9	7,1	9,6	12,5	16	20	28	39	50	64	79	113
15	6,0	60		0,17	0,7	1,4	2,6	4,1	6	8	10	13	16	24	32	42	53	65	94,3
16	7,0	70		0,14	0,6	1,2	2,2	3,5	5,1	7	9	11,4	14	20,2	28	36	45	56	81
17	8,0	80		0,12	0,5	1,1	2	3,1	4,4	6	8	10	12	18	24	31	40	49	71
18	9,0	90		0,11	0,4	0,9	1,7	2,7	3,9	5	7	9	11	16	21	28	35	43	63
19	10,0	100		0,1	0,4	0,8	1,6	2,5	3,6	4,8	6,2	8	10	14	19	25	32	39	57
20	0,1	1		20	78	170	314	490	710	930	1246	1530	1960	2830	3850	5020	6350	7850	11310
21	0,2	2		10	39	85	157	244	354	480	623	795	980	1415	1925	2610	3175	3926	5656
22	0,3	3		6,6	26	58,6	105	164	236	320	414	530	654	944	1282	1674	2116	2616	3770
23	0,4	4		5,0	20	42	78	122	178	240	312	398	490	708	962	1256	1588	1962	2828
24	0,5	5		4,0	16	34	62	98	142	192	250	318	392	566	770	1004	1230	1570	2262
25	0,6	6		3,4	13	28	52	82	118	160	208	266	326	472	642	836	1058	1308	1886
26	0,7	7		2,8	11	24	44	70	102	138	170	228	280	404	550	718	908	1122	1616
27	0,8	8		2,5	10	21	40	62	88	120	136	198	246	354	482	628	794	982	1714
28	0,9	9		2,2	8	19	34	54	78	106	138	176	218	314	428	558	706	872	1256
29	1,0	10		2	7,8	17	31	49	71	96	124	160	196	284	386	502	636	786	1130
30	2,0	20		1	4	8,6	16	24	36	48	62	80	98	142	192	252	318	392	566
31	3,0	30		0,6	2,6	5,6	10	16	24	32	42	54	66	94	128	168	212	262	377
32	4,0	40		0,4	2	4,2	8	12	18	24	32	40	50	70	96	126	158	196	243
33	5,0	50		0,4	1,6	3,4	6,8	10	14	19	25	32	40	56	78	100	128	157	226
34	6,0	60		0,34	1,4	2,8	5,2	8	12	16	20	26	32	48	64	84	106	131	193
35	7,0	70		0,28	1,2	2,4	4,4	7	10	14	18	23	28	40	56	72	90	112	162
36	8,0	80		0,24	1,0	2,2	4	6,2	9	12	16	20	24	36	48	62	80	98	171
37	9,0	90		0,22	0,8	0,9	3,4	5,4	7,8	10	14	18	22	32	42	56	70	87	126
38	10,0	100		0,2	0,8	1,7	3,2	5	7,2	9,6	12,4	16	20	28	39	50	64	79	113

жүктеу/скачать 1.26 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: