Жалпы медицина факультетінің 2 курс студенттеріне арналған жалпы микробиология бойынша соөж және тәжірибелік сабақтарды



жүктеу/скачать 415.99 Kb.
бет29/31
Дата30.10.2023
өлшемі415.99 Kb.
#481947
түріСабақ
1   ...   23   24   25   26   27   28   29   30   31
метод. пособие -Жалпы микробиология каз

Бейтараптау реакциясының қойылуы
Демонстрация:

  1. Сарысудағы анатоксин мен антитоксиннің титрін анықтау

  2. Антитоксиндік сарысу титрін анатоксин титрі бойынша анықтау

  3. in vitro бейтараптау реакциясы

Флокуляция реакциясы
Анатоксин титрін антитоксикалық сарысуда анықтау



№

пробирка№
Ингредиенты

1

2

3

4

5

1

Дифт. антитокалық сарысу(титр 200 АЕ 1 мл.)

0,16

0,18

0,2

0,22

0,24

2

Дифтерияның анатоксині

2,0

2,0

2,0

2,0

2,0




Сулы монша 40-45% 15 мин-қа

Нәтижесі










Қолшатыр тір




1,0 – 200
0,22 – х
0,22 мл – 44 АЕ бар.
Антитоксикалық сарысу–АЕ өлшенеді, – антитоксикалық бірлікте,
Анатоксин - ИЕ – имуногенді бірлік


Анатоксин титрін антитоксикалық сарысуда анықтау


№

пробирка№
Ингредиенты

1

2

3

4

1

Дифт.анатоксин (титр 40 ИЕ 1 мл.)

1,0

1,0

1,0

1,0

2

Дифтерийная
анатокс. сарысу мл-ден

0,1

0,08

0,04

0,02

Сулы монша 40-45% 15 мин-қа

Нәтижесі







Қол шатыр тәрізді



1,0 – 40


0,04 – х
0,2 мл. құрамында – 40 АЕ



in vitro жағдайында бейтараптау реакциясы
Ботулиндік токсинді биологиялық әдіспен анықтау

№

пробирка№
Ингредиенттер

1



2

3

4

5

1

Қан,фильтрат

1,0

1,0

1,0

1,0

1,0

2

Ботулизмге қарсы сарысу(типтік)

1,0
А

1,0
В

1,0
Е

1,0
F

1,0
орташа




Инкубация 37о-20мин




0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Тышқандарға құрсақішілік енгізеді.




2 тышқан

2 тышқан

2 тышқан

2 тышқан

2 тышқан

Нәтижесі

живые

гибель
мышей

гибель
мышей



гибель
мышей



гибель
мышей

Қорытындысы: зерттелінген материалда табылған токсин, А типіне жатады, себебі 1 пробиркада бейтараптану реакциясы актитоксикалық сарысу А типі бойынша жүрді.


Тақырыбы: Иммундыфлюоресцентті реакцияның қойылуы, ҰИФР төте, жанама) Радиоиммунды, иммуноферментті анализдер. Бактерияларды иммобилизациялау реакциясы. Полимеразды тізбектік реакция.
ИММУНДЫФЛЮОРЕСЦЕНТТІ РЕАКЦИЯ ИФР - ТӨТЕ
Жүргізі қадамдары:

  1. Төте әдіс кезінде құрамында зерттелетін микроорганизм (АГ) бар препарат дайындалады.

  2. Сұйық фиксатормен (ацетон) бекітіледі (фиксацияланады).

  3. Спецификалық люминесцентті сарысумен өңдейді.

  4. Артық сарысуды шайып тастайды.

  5. Препаратты құрғатып, люменисцентті микроскопта қарайды.

  6. Реакция оң нәтижелі болса антиген жарқырап көрінеді.

  7. Бұл реакция 1-2 сағаттың ішінле микробтың антигендерді анықтауға мүмкіндік береді.

  8. Бұл әдіс өте қарапайым, жоғары-спецификалық, көптеген әртүрлі люминесцентті сарысулар жиынтығын қажет етпейді.



ИФР - ЖАНАМА
Жүргізу қадамдары:

  1. Жанама әдісте зерттелінетін микроорганизмі бар (АГ) препарат дайындалады.

  2. Сұйық фиксатормен фиксациялайды.

  3. Қоянның спецификалық сарысуымен өңдейді.

  4. Препаратты шаяды

  5. Қоянның глобулиндеріне қарсы люминесцияланатын антиглобулинді сарысумен өңдейді.

  6. Тағы да шаяды.

  7. Препаратты кептіріп, және оны люминесцентті микроскопта қарайды.

  8. Реакция оң болған жағдайда антиген мен антидене комплекс түзіп, жарқырау көрінеді.

  9. Бұл әдіс әр түрлі көптеген қоян глобулиніне қарсы люминесценттік антиглобулинді сарысулардың жиынтығын қажет етпейді.

РАДИОИММУННДЫ АНАЛИЗ


Жүргізу қадамдары:

  1. Спецификалық антиген полистиролды планшеттің ойшығында адсорбцияланады.

  2. Адамның зерттелінеін сарысуымен инкубациялайды

  3. Байланыспаған иммуноглабулиндерді шайып тастайды.

  4. Байланысқан иммуноглабулиндерді радиоактивті изотоптармен (J 125)таңдалған антиглобулинді сарысу көмегімен анықтайды

  5. Антиген мен антидене сәйкес келген жағдайда комплекс түзіледі. Олардың саны гамма немесе В-есептеудің көмегімен анықталады.



ИММУНДЫ ФЕРМЕНТТІ ТАЛДАУ (ИФТ)
Жүргізу қадамдары:
1.Қойылу мақсаты. Қажетті жабдықтарды толығымен атау. ИФТ әр түрлі антигендерге қарсы антиденелерді анықтауға мүмкіндік береді.
2. Спецификалық антиген арнайы полистерол планшет ойықшаларына адсорбцияланады. Сынақталатын адамның сарысуымен бірге 30 минутқа инкубацияланады. 30 минутқа инкубацияланады.
3. Байланыспаған иммундыглобулиндерді шайып тастайды.
4. Байланысқан иммундыглобулиндерді алдын ала пероксидаза ферментімен өңделген антиглобулиндік сарысумен анықтайды. 30 минут инкубациялайды.
5. Субстрат (сутектің пероксиді) және индикатор (диамин бензидин) қосады, олар боялу деңгейіне қарай ферменттік белсенділігін бағалауға мүмкіндік береді. Боялу деңгейін (дәрежесін) визуалды немесе спектрофотометрдің көмегімен бағалауға болады. Боялу қарқындылығы (дәрежесі) антигенге байланысқан антиденеге пропорционалды. Нәтижелерін талдап, тұжырым жасаңыз. Реакция механизмін түсіндіріңіз.


Постановка реакции иммобилизации бактерий


Студенттердің жұмысы
Жасбдықталуы

  1. Ойшығы бар зат әйнекшесі – топқа 1 дана

  2. Покровные стекла – 2 студентке 1 дана

  3. Пробиркадағы сарысу – 2 студентке 1 дана

  4. Сенная палочка или протей в жидкой среде из термостата – 1 на 2-х студентов



Жүргізу қадамдары:

  1. Зат әйнекшесіне бір тамшы микробтық дақылдан тамызу.

(сол жақта –тәжірибелік, оң жақта-бақылау).

  1. Бақылау бөлігіне антифагеллярлы сарысуды 1:25 – 1:50 қатынасындай тамшы тамызу.

  2. Тәжірибелік бөлігіне физиологиялық ерітіндіні тура сондай қатынаста тамызу.

  3. Тамшыны әйнек таяқшамен араластыру

  4. Аздап қыздыру.

  5. 3-5 мин кейін «ілінген» тамшылы және «езілген» тамшылы препарат дайындау.

  6. Микроскопиялау

  7. Тәжіриблік бөлігінде бактериялар қозғалғыштығын сақтайды, ал бақылауда бактериялар қозғалыссыз.




жүктеу/скачать 415.99 Kb.

Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   23   24   25   26   27   28   29   30   31



©dereksiz.org 2024
әкімшілігінің қараңыз
    Басты бет