Глава 4.11. –
Отбор и обращение с овоцитами и эмбрионами лабораторных грызунов и кроликов
Кодекс здоровья наземных животных МЭБ 2019 г.
204
Статья 4.11.6.
Требования к донорам колоний животных в зависимости от микробного статуса
Следует отметить,
что требования, предъявляемые к самкам-донорам, варьируют в зависимости от
микробного статуса колонии, из которых они поступили, а именно: колонии с определённой флорой,
обычной колонии или колонии с неопределённым статусом.
Контрольные животные, находящиеся в какой-либо колонии с определенной флорой или обычной
колонии, должны подвергаться систематической проверке путём бактериологических исследований,
предпочтительно с месячной регулярностью или, как минимум, раз в три месяца. Выявление отдельных
возбудителей варьирует в зависимости от вида животных, а также от географической зоны.
Рекомендации по специфическим патогенным агентам, на предмет которых проводят исследование
лабораторных животных разных видов,
неоднократно публиковались
1
.
1.
Положение, когда микробный статус определён
a)
Животные в составе колонии, ветеринарный статус которой является определённым (Статья
4.11.1.
), представляют собой наиболее чистый источник гамет и эмбрионов, которые, будучи
получены из таких животных, могут быть признаны свободными от возбудителей.
б) Принимая во внимание, что давшие семя доноры и самки-доноры свободны от возбудителей,
диссекция репродуктивного аппарата самок и изоляция эмбрионов могут проводиться в
асептических условиях путём использования, в случае необходимости, безопасной вытяжки для
биологических работ.
в) Хотя и не обязательно проводить вымывание эмбрионов по рекомендациям, указанным во
втором параграфе Статьи 4.11.4., всё же следует подвергать эмбрионы процедуре 2-3-кратной
промывки. Промывая, эмбрионы осторожно встряхивают в среде.
г) Эмбрионы должны быть сертифицированы как происходящие из гнобиотической колонии или
микробиологически определенной в изолированной ёмкости,
что снимает необходимость
обращения к процедурам управления отдельными рисками (Статья 4.11.4) для удаления
патогенных агентов. Импортирующим учреждениям следует рассматривать вопрос
карантинирования приёмных самок.
2.
Обычные условия
a)
Колонии с обычным микробным статусом соответствуют закрытым колониям, ветеринарное
состояние которых подвергается регулярному контролю (Статья 4.11.1.). Животные могут быть
подвержены разным возбудителям, что может привести к заражению, сопровождающемуся
выделением антител, или появлением клинических признаков, при этом патогенные агенты, от
которых требуется защита в какой-либо колонии, должны быть хорошо известны.
б) Репродуктивный аппарат (матка, маточные трубы или яичники) должны извлекаться в
отдельное место перед отправкой в лабораторию по работе с эмбрионами.
Эта операция
должна проводиться техниками, не входящими в состав персонала лаборатории, а если это
невозможно – следует, как минимум, сменить защитную одежду при переходе из помещений.
Если животные должны подвергаться манипуляциям в лаборатории, репродуктивные аппараты
разрезают в безопасной биологической вытяжке для недопущения распространения
возбудителей по лаборатории.
в) После отбора репродуктивного аппарата, взятие эмбрионов должно осуществляться в
асептических условиях. Учитывая патогенный агент, о присутствии которого в колонии известно,
эмбрионы должны подвергаться манипуляциям в соответствии с процедурами управления
риском, в частности, теми, что касаются промывки, как они описаны в Статье 4.11.4. и
Руководстве IETS
2
.
г) Эмбрионы,
полученные от животных, обладающих антителами, или показывающих другие
признаки контаминации специфическими патогенными агентами, должны поступать в новую
колонию с обязательным проходом через систему карантинирования и путём использования
приёмных самок с определенным микробным статусом. Карантинирование также рекомендуется
в случае сомнения в ветеринарном состоянии колонии или самок-доноров. В некоторых
ситуациях, когда эмбрионы могут подвергаться угрозе бактериальной инфекции, перед
отправкой их на криоконсервацию, или в период между размораживанием и помещением в
контейнеры их помещают в культуру на 24 часа, в среду, содержащую подходящие антибиотики.
д) Если учреждение-получатель решает провести карантин приёмных самок и новорождённых до
момента подтверждения их ветеринарного статуса, следует вести поиск патогенных агентов, от
которых
требуется защита, у приёмных самок по окончании кормления молоком; их потомство
вводят в колонию только в случае благоприятных результатов.
Глава 4.11. –
Отбор и обращение с овоцитами и эмбрионами лабораторных грызунов и кроликов
Кодекс здоровья наземных животных МЭБ 2019 г.
205
3.
Неопределённый микробный статус
a)
Эмбрионы, которые получены от животных, выращенных на свободе, или происходят из
колоний, ветеринарное состояние которых не известно, должны пройти процедуры управления
риском, как они описаны в Статье 4.11.4. и Руководстве IETS
2
. Эти процедуры близки тем, что
рекомендуются для эмбрионов, отбираемых у фермерских животных (см. Главы 4.8. и 4.9.
Наземного кодекса). В идеальных условиях самцы-производители и самки-доноры должны быть
изолированы от других животных и быть подвергнуты обследованию за 15 дней до случки и в
день случки (самцы) или в момент отбора эмбрионов (самки). Также возможно вводить этих
животных в
обычную колонию, где было бы возможным с течением времени отследить факты их
ветеринарной истории для снижения строгих требований, касающихся надзора за ними и
обращения с эмбрионами.
б) При осуществлении манипуляций с донорами и тканями, полученными из репродуктивных
органов, а также при манипуляциях с эмбрионами должна использоваться безопасная
лабораторная вытяжка.
в) После отбора овоцитов или эмбрионов может потребоваться проведение аутопсии самок-
доноров для поиска отдельных болезней или возбудителей, от которых
импортирующая
страна стремится защититься. В случае необходимости, если эмбрионы были взяты путём
хирургического вмешательства, аликвотная часть жидкости промыва, полученная от каждой из
самок-доноров, или проба меланжа должны быть исследованы на
предмет специфических
патогенных агентов.
г) Эмбрионы должны подвергаться минимум 10-кратному вымыванию по протоколам, указанным в
Руководстве IETS
2
, а в случае подозрения на присутствие некоторых герпесвирусов проводят
обработку эмбрионов трипсином.
д) Замороженные эмбрионы должны сохраняться в экспортирующей лаборатории до завершения
анализов проб из колоний, образцов тканей или жидкостей, а также до формирования пакета
документов для обоснования сертификата, который составляется и подписывается
ветеринаром учреждения.
е) По поступлении в
импортирующую страну эмбрионы должны быть пересажены приемным
самкам, которым они предназначены, с использованием системы карантина. Приемных самок
подвергают
обследованию в сроки, отвечающие известным инкубационным периодам тех
болезней, от которых импортирующая страна стремится защититься. Кроме этого, контролю
следует подвергать приёмных самок после пересадки и их потомство в возрасте 12 недель
перед заселением в репродуктивные колонии за пределами карантинного отделения.
Статья 4.11.7.
Достарыңызбен бөлісу: