4.6.
Х
РОМАТОГРАФИЯ
О
СНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫ И КЛАССИФИКАЦИЯ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИХ МЕТОДОВ
.
Хроматографический метод анализа впервые был применен русским ботаником М. С. Цветом в 1903 г.
для разделения хлорофиллов и других растительных пигментов. Разделение пигментов М. С. Цвет проводил в
стеклянной колонке (трубке), наполненной сухим твердым
адсорбентом (CaCO
3
). Первым этапом
процесса разделения была экстракция пигментов из растительных материалов органическим растворителем.
Полученный экстракт вводили в колонку, которую затем промывали (элюировали) органическим
растворителем. Компоненты экстракта перемещались по колонке с различной скоростью, образуя отдельные
окрашенные кольца. После полного разделения компонентов влажный адсорбент извлекали из колонки,
полученный столбик разрезали на отдельные полосы, экстрагировали вещество, упаривали и исследовали
остаток.
Современные хроматографические методы разделения имеют очень большие возможности и считаются
классическими методами разделения органических и неорганических веществ. Эти методы позволяют разделять
органические соединения, имеющие сходные структуры, и неорганические соединения с близкими
химическими свойствами.
Хроматографические методы широко применяют в различных отраслях науки и техники, в том числе в
биохимии и молекулярной биологии. Хроматографические методы используются для решения следующих
задач:
• разделение сложных смесей неорганических и органических веществ;
• выделение индивидуальных веществ (белков, углеводов, витаминов, ферментов, липидов, аминокислот,
органических кислот, антибиотиков и др.) из сложных смесей;
• очистка индивидуальных веществ от примесей;
• концентрирование веществ из сильно разбавленных растворов, и др.
Хроматография основана на распределении компонентов смесей веществ между двумя
несмешивающимися фазами - неподвижной и подвижной. В качестве неподвижной фазы используют твердое
вещество или жидкость, нанесенную на твердый инертный носитель. Подвижной фазой служит газ или
жидкость, которые содержат смесь разделяемых веществ. В зависимости от природы содержащей вещество
фазы различают газовую (ГХ) и жидкостную (ЖХ) хроматографии. Различие в природе носителя удваивает
каждый класс - в результате получаем 4 основных типа хроматографии - газовую твердофазную (ГТХ) и
Достарыңызбен бөлісу: |