https://t.me/medical_community_kze
Механизм и техника окраски по Граму. Химический состав, строение клеточной
стенки грамотрицательных и грамположительных бактерий.Химический состав,
строение клеточной стенки грамотрицательных и грамположительных бактерий.
Окраска по Граму основана на различиях в строении клеточной стенки прокариот.
Грамположительные бактерии имеют толстую, прочную, просто устроенную стенку (толщина более
50 нм) Основным компонентом клеточной стенки этих бактерий является многослойный
пептидогликан (муреин), построенный их остатком N-ацетил мурамовой кислоты. Прочность
линейному полимеру придают поперечные тетрапептидные сшивки,
соединяющие отдельные слои
пептидогликана. С петидогликаном клеточной стенки грамположительных бактерий ковалентно
связаны тейхоевые или липотейхоевые кислоты (от греч. teichos - стенка), молекулы которых
представляют собой цепи из 8-50
остатков глицерола и рибитола, соединенных фосфатными
мостиками. Молекулы тейхоевых кислот являются рецепторами адгезии (адгезинами),
специфическими антигенами многих бактерий. С пептидогликаном могут быть связаны белки (А, М,
Т, R и др.), которые располагаются снаружи также кластерами. Эти белки являются антифагинами,
репелентами фагоцитоза, рецепторами для антител. Смесь S.aureus и E.coli
Грамотрицательные бактерии содержат очень небольшое количество пептидогликана, не
имеющего поперечных сшивок. Над слоем муреина располагается периплазматическое пространство,
играющее важную роль в обменных процесса (периплазматические ферменты) Далее располагается
наружная
мембрана, которая имеет строение, характерное для биологических мембран. Внешний
листок наружной мембраны содержит липополисахарид (ЛПС), состоящий из трех компонентов:
липида А, стержневой (базисной) части,
или ядра, и полисахаридной цепи, образованной
повторяющимися олигосахаридными последовательностями.
Основной краситель интенсивно связывается муреиновым слоем.
Поскольку этот слой у
грамотрицательных бактерий очень тонкий и экранируется внешней мембраной, эти микроорганизмы
сорбируют
значительно меньше красителя, чем грамположительные.
Йод образует с красителем и муреином сложный комплекс, который труднее вымывается
обесцвечивающими растворами. Дифференцирующие растворы
вымывают весь краситель из
клеточной стенки грамотрицательных бактерий, в то время, как грамположительные
еще содержат
достаточное количество красителя.
Дополнительный краситель докрашивает обесцвеченные грамотрицательные бактерии в
контрасный цвет.
"Классический" метод