Тестируемые продукты разделили на 3 группы: -
колбасные продукты;
-
шоколадные изделия;
-
соки с мякотью
Нумерация наименований продуктов с компаниями-изготовителями, представленная в таблице 1, соответствует дорожкам в электрофорезном геле, описанном ниже.
Таблица 1. Название и изготовитель продукта
№
|
Название и изготовитель продукта
|
1
|
Колбаса «Докторская Кулагер» фирмы «Апрель»
|
2
|
Колбаса «Докторская Апрель» фирмы «Апрель»
|
3
|
Колбаса «Докторская» фирмы «Тулпар»
|
4
|
Колбаса «Докторская» фирмы «Халал ЕТ»
|
5
|
Колбаса «Докторская» фирмы «Дедов»
|
6
|
Колбаса «Докторская» фирмы «Рахат»
|
7
|
Колбаса «Оптималь Докторская» фирмы «Schirnhofer»
|
8
|
Шоколад «Alpen Gold, ООО Крафт Фудс Рус»
|
9
|
Шоколад «Nestle Classic, ОАО КОР»
|
10
|
Шоколад «На здоровье, КФ Рахат»
|
11
|
Шоколад «Kinder Chocolate Maxi, Ferrero oHG mbH»
|
12
|
Шоколад «Milky Way, ООО Марс»
|
13
|
Шоколад «Конфета шоколадная Рахат, КФ Рахат»
|
14
|
Сок «5+» мультифрукт ООО «Компания ДигиДон»
|
15
|
Сок «Мой» мультифрукт ОАО «АПК Придонье»
|
16
|
Сок «Добрый» абрикосовый ЗАО «МУЛТОН»
|
17
|
Сок «Piko» персиковый ТОО «Фудмастер-Асептик»
|
18
|
Сок «ФС» пер-ябл ОАО «ЭКЗ Лебедянский»
|
19
|
Сок «DA-DA» абрикос ТОО «RG Brands Kazakhstan»
|
20
|
Сок «Садочек» абрикос ООО «Сандора»
|
21
|
Сок «Gracio» персик АО «RG Brands»
|
22
|
Сок «Palma» абрикос «Раимбек Боттлерс»
|
23
|
Сок «Juicy» персик «Раимбек Боттлерс»
|
24
|
ОКО (дорожка не содержащая ДНК)
|
25
|
ПКО (ДНК генома сои: 400, 120 п.н.).
|
26
|
ПКО (ДНК генома кукурузы: 540, 120 п.н.).
|
Выделение ДНК из описанных продуктов осуществляли с применением комплекта «ДНК-сорб-С», амплификацию, при помощи трех тест-систем: «ПЛАНТ-СКРИН», «Терминатор NOS» и «ГМ соя 40-3-2», электрофоретический анализ, с помощью комплекта «ЭФ вариант 300», анализ результатов проводили в компьютерной системе Totallab.
Для скрининга на наличие ГМИ начальные эксперименты ставили с тест-системой «ПЛАНТ-СКРИН». После выделения ДНК из всех тестируемых образцов, ставили реакции амплификации в соответствующем режиме. Число циклов составляло 42. По окончании ПЦР, продукты амплификации анализировали процедурой электрофореза в агарозном геле. Применяли положительный и отрицательный контрольный образцы (ПКО и ОКО соответственно). Для достоверности полученных результатов эксперимент повторяли по три раза с каждым образцом. Фотография электрофореза представлена на Рис. 1.
Рис. 1. Электрофореграмма ДНК, амплифицированных с применением тест-системы «ПЛАНТ-СКРИН»
На рисунке выявляются полосы ДНК, выделенных из 6 сортов колбасных изделий: «Докторская Кулагер», «Докторская Апрель», «Докторская Тулпар», «Докторская Халал», «Докторская Дедов», «Докторская Рахат».
Также положительный результат показывают соки: «5+», «Piko», «Фруктовый сад», «DA-DA». Размер фрагментов составляет 400 п.н., что соответствует длине амплифицированных фрагментов генома сои. В остальных продуктах в данной тест-системе искомые ГМИ не выявлены.
Следуя рекомендациям «Инструкции АмплиСенс–50-R», при получении отрицательного результата в указанной тест-системе «ПЛАНТ-СКРИН», необходимо исследуемые продукты проверить с комплектом реагентов «Терминатор NOS», а при получении положительного результата – «ГМ соя 40-3-2». Все исследуемые объекты тестировали в описанных системах.
Процедуру выделения ДНК проводили без изменений. С указанными образцами ставили ПЦР с использованием тест-системы «Терминатор NOS» в соответствующем режиме с количеством циклов амплификации 42. По окончании реакций проводили детекцию продуктов в электрофорезном геле. Результаты электрофореза приведены на
Рис. 2.
Рис. 2. Электрофореграмма ДНК, амплифицированных с применением тест-системы «Терминатор NOS».
Анализ картины электрофореза показал наличие фрагмента ДНК, соответствующего ПКО данной тест-системы (180 п.н.) только в образцах шоколадных изделий. Среди них: шоколад «Alpen Gold», «Nestle Classic», «Kinder Chocolate Maxi». В остальных образцах в данной тест-системе ГМИ не были выявлены.
Согласно «Инструкции по применению тест-системы «АмплиСенс ПЛАНТ-СКРИН»» при получении положительного результата в данной тест-системе рекомендуется изучение исследуемых продуктов с помощью набора реактивов «ГМ соя 40-3-2».
Процедуру выделения ДНК также проводили без изменений. Реакции амплификации проводили с применением тест-системы «ГМ соя 40-3-2», с целью выявления фрагментов генетически модифицированной сои.
Результат электрофореза представлен на Рис. 3.
Рис. 3. Электрофореграмма ДНК, амплифицированных с применением тест-системы «ГМ соя 40-3-2».
В данной тест-системе положительные результаты, соответствующие размерам фрагментов 274 п.н., показали следующие образцы: колбасы «Докторская Тулпар», «Докторская Апрель» и «Оптималь Докторская».
Из шоколадных изделий искомые фрагменты ДНК обнаружили в шоколаде «На здоровье».
Соки содержащие ГМ-компоненты: «Piko», «Фруктовый сад» и «Садочек».
Кроме того, колбаса «Докторская Тулпар», колбаса «Докторская Апрель», соки «Piko» и «Фруктовый сад», показали положительный результат и в тест-системе «ПЛАНТ-СКРИН», что указывает на наличие в этих продуктах двух различных линий генетически модифицированной сои.
В остальных протестированных продуктах в данной тест-системе, искомые ГМИ не были выявлены.
Полученные результаты свидетельствуют об использовании в производстве пищевых продуктов генетически модифицированных ингредиентов, а также доказывают необходимость проведения подобных исследований в дальнейшем, с целью выявления ГМО в продуктах питания.
Дальнейшие исследования предполагают расширение спектра изучаемых продуктов, увеличение количества тест-систем с целью выявления различных генетически модифицированных ингредиентов, а также определение в выявленных фрагментах ДНК последовательности нуклеотидов.
На основании полученных результатов можно сделать следующие выводы:
-
Обнаружены ГМО с применением скрининговой тест-системы «ПЛАНТ-СКРИН» в шести колбасных продуктах: «Докторская Кулагер», «Докторская Апрель», «Докторская Тулпар», «Докторская Халал», «Докторская Дедов», «Докторская Рахат». А так же четырех соках: «5+», «Piko», «Фруктовый сад», «DA-DA». В шоколадных изделиях таковых не выявлено.
-
С использованием тест-системы «Терминатор NOS» обнаружены фрагменты ДНК трансгенной кукурузы в гомогенатах плиточного шоколада «Alpen Gold», «Nestle Classic», «Kinder Chocolate Maxi». В остальных тестируемых образцах, искомых компонентов не выявлено.
-
Обнаружены компоненты трангенной сои при анализе с тест-системой «ГМ соя 40-3-2» в ДНК, выделенной из колбас «Докторская Тулпар», «Докторская Апрель», «Оптималь Докторская», шоколада «На здоровье», соков «Piko», «Фруктовый сад» и «Садочек».
Достарыңызбен бөлісу: |