Ч а с т ь I главный редактор
жүктеу/скачать 7.68 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Материалы и методы исследования
| 72
Ветеринария пуску в торговые сети, в связи с чем целью настоящего исследо- вания является проведение пищевого мониторинга с целью вы- явления Listeria monocytogenes в поступающих в торговые сети образцах рыбы. Материалы и методы исследования В исследовании использовали следующие среды: Бульон Фразера полуконцентрированный (225 мл), Бульон Фразера в пробирках (10мл), Хромогенный Агар Listeria пo Оттавиани и Агости (ALOA), Оксфорд агар, Палкам агар, скошенный Мя- сопептонный агар (МПА), 10% щелочной раствор уксуснокис- лого свинца, 1% спиртовой раствор фенолфталеина, децинор- мальный раствор едкого натра, 5% раствор сернокислой меди, 0,2% спиртовой раствор бензидина, 1-% раствор перекиси во- дорода. Так же были использованы: автоматический анализатор Vidas, тест-система APIListeria, одноразовая посуда для микро- биологических исследований (чашки Петри, градуированные пипетки, бактериологическая петля, пастеровские пипетки), дозаторы, лабораторные весы, бокс ламинарный 2 класса точ- ности, термостат на 25 °C, 30 °C, 37 °C. [4] Исследование и мониторинг проводились на базе ветери- нарной лаборатории в течение 2015–2020 гг. Для этого были отобраны 5 образцов рыбы из торговой сети различных тор- говых марок. Отбор образцов отбирали в соответствии с ГОСТ 31339–2006 «Рыба, нерыбные объекты и продукция из них. Пра- вила приемки и методы отбора проб», [3]. ГОСТ 31904–2012 «Продукты пищевые. Методы отбора проб для микробиологи- ческих испытаний». В исследовании проведены: органолептический и физи- ко-химический анализы в соответствии с ГОСТ «7631–2008 Рыба, нерыбные объекты и продукция из них. Методы опре- деления органолептических и физических показателей», ми- кробиологический анализ в соответствии с ГОСТ 32031–2012 «Продукты пищевые. Методы выявления бактерий Listeria monocytogenes (с Поправкой)» рыбы, реализуемой в торговой сети. Исследованию были подвергнуты экземпляры живой, ох- лажденной и мороженой промысловой рыбы. Всего за исследу- емый период было проанализировано 713 проб. Из них свежая рыба — 168 экз., охлажденная рыба — 183 экз., мороженая рыба — 362 экз. Из 5 исследуемых образцов рыбы с каждого делали фарш и 25 г высевали в 225 мл Бульона Фразера полуконцентриро- ванного, инкубировали 24 ч при температуре 30 °C. Культуры для вторичного обогащения пересевали в среды для селектив- ного обогащения по 0,1 см3 в 10 мл Бульона Фразера и на Хро- могенный Агар Listeria пo Оттавиани и Агости (ALOA) и инку- бировали 48 ч при температуре 37 °C. После культивирования из пробирок с помощью бактери- ологической петли пересевали на плотные питательные среды хромогенный Агар Listeria пo Оттавиани и Агости (ALOA), Палкам агар и Оксфорд агар для получения изолированных ко- лоний. Чашки с посевами культивировали 24–48 ч при темпера- туре 37 °C вверх дном. На среде ALOA через 24 ч в образце 5 выросли бактерии вида L. monocytogenes в виде сине-зеленых колоний, окруженные не- прозрачным ореолом (типичные колонии), на чашках других 4-х образцов роста замечено не было (рис. 1). На среде PALCAM-агар через 24 ч инкубирования на чашке образца 5 листерии мелкие, серовато-зеленые или оливко- во-зеленые колонии с черным ореолом, диаметром 0,5–1,0 мм, иногда с черным центром, на чашках других 4-х образцов роста не выявлен (рис. 2). На Оксфордском агаре листерии, на чашке образца 5, выра- щенные в течение 24 ч, мелкие (1 мм), сероватые, окруженные черным ореолом. Через 48 ч — более темные, около 2 мм в ди- аметре, с черным ореолом и углубленным центром, на чашках других 4-х образцов роста замечено не было (рис. 3). Культуры окрашивали по Граму и микроскопировали (рис. 4). После того как на чашках выросли типичные колонии L. Monocytogenes проводится биохимическое подтверждение, оно может быть выполнено с использованием коммерческих Рис. жүктеу/скачать 7.68 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|