Методическое пособие к малому практикуму по биохимии и молекулярной биологии
Работа 16. Анаэробное окисление углеводов
жүктеу/скачать 1.21 Mb. Pdf көрінісі
|
| Работа 16. Анаэробное окисление углеводов
Распад углеводов в организме происходит двумя путями: дихотоми- ческим и апотомическим. В первом случае гексоза (фруктозо-1,6-дифос- фат) распадается на две фосфорилированные фосфотриозы с последующим образованием пировиноградной кислоты. Во втором (пентозный цикл) - идет образование пентоз, гептоз, тетроз, триоз. Дихотомический распад способствует освобождению и накоплению энергии. Апотомический ис- пользуется в основном для процессов биосинтеза. Дихотомический распад может происходить в анаэробных и аэроб- ных условиях. При анаэробном превращении углеводов исходным продук- том может служить глюкоза (гликолиз) или гликоген (гликогенолиз) и за- канчивается оно образованием молочной кислоты. При этом часть энергии накапливается в двух молекулах АТФ, другая часть выделяется в виде теп- ла. Гликолиз и гликогенолиз позволяют выполнять работу в условиях не- достаточного снабжения кислородом. В клетках микроорганизмов анаэробный распад глюкозы (брожение) заканчивается образованием различных продуктов: этилового спирта, ук- сусной, пропионовой, масляной и других кислот, ацетона и т.д. 1 . С п и р т о в о е б р о ж е н и е – процесс распада глюкозы под влияни- ем ферментов дрожжей с выделением углекислого газа и этилового спирта. До стадии образования пировиноградной кислоты (ПВК) спиртовое бро- жение протекает так же, как и гликолиз. Затем ПВК последовательно де- карбоксилируется, и образовавшийся ацетальдегид восстанавливается в этиловый спирт. Ход исследования Растереть в ступке 0,5 г дрожжей, прибавляя в нее порциями 10 мл 5 %-ного раствора глюкозы. Полученную массу вносят в бродильную трубку так, чтобы заполнить закрытое колено и ставят в термостат при температуре 37ºС на один час. По истечении времени вынуть трубку, отме- E о С к C o / С к = E о / Е к , отсюда C о = , Е к 44 тить скопление газа в закрытом колене и проделать качественные реакции на углекислый газ и этиловый спирт. Обнаружение углекислого газа: в бродильную трубку налить до кра- ев 10%-ный раствор едкого натра. Закрыть отверстие трубки большим пальцем и несколько раз перевернуть ее, перемешивая содержимое. Угле- кислый газ поглощается щелочью, создавая вакуум, и палец присасывается к отверстию трубки. Качественная реакция на этиловый спирт: отфильтровать 3–4 мл жидкости из бродильной трубки, добавить несколько капель реактива Лю- голя до появления желтой окраски и слегка нагреть. Выпадает желтоватый осадок йодоформа и ощущается его характерный запах. 2 .Молочно - кис лое брожение – в процессе прокисания молока под действием микроорганизмов происходит анаэробный распад углеводов молока. Одним из продуктов брожения является молочная кислота. Ход исследования К 5 каплям кислой сыворотки молока добавляют 10 капель фенолята железа (реактива Уффельмана). В присутствии молочной кислоты фиоле- товая окраска жидкости переходит в желто-зеленую, обусловленную обра- зованием молочнокислого железа. Проанализировать результаты, полученные в эксперименте. Напи- сать уравнения реакций. жүктеу/скачать 1.21 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|