- - Жасушалар культурасының митоздық индексі жоғары болады.
- Сондықтан жасушалар культурасын тері (фибробласттар), сүйек кемігі, эмбриональды ұлпалардан, хорионнан, амниондық сұйық жасушаларынан алуға болады.
- Ең ыңғайлы объект- қан лимфоциттері.
- кариотиптеу;
- дифференциальды бояу;
- флюоресценттік гибридизациялау (FISH әдісі).
- спектроскопиялық талдау
- экспресс әдістер;
- - Х жыныс хромотинін анықтау,
- - дабыл таяқшасын анықтау,
- - У хроматинді люминестенттік әдіспен зерттеу
Шеткі қан лимфоциттерінің дақылдарын алу жолымен цитогенетикалық препарат дайындау - 1-талап.
- Бұл үшін 1-2 мл веноздық қанды алып, эритроциттерден бөліп алып, фитогемагглютинині (ФГА) бар қоректік ортаны қосып 3 күн (72 сағ) 37 С –та инкубациялайды (культивирование).
- 2-талап.
- Бөліну ұршығын бұзатын колхицинді (колцемид) қолданып, жасушалық бөлінуді метафаза сатысында тоқтату.
- Колхицинді инкубациялау аяқталуға 2-3 сағ қалғанда қосады, хромосомалар колхициннің әсерінен қысқарып, тығыздалып, бір бірінен жеңіл ажырайды.
Цитогенетикалық әдіс этаптары - 3-талап.
- Жақсы метафазалық пластинкалар алу үшін жасушаларды Са хлориды не натрий цитратыын қолдану арқылы гипотонизация жүргізілдеді.
- Гипотоникалық ертіндіде жасушалар ісініп, ядролық қабығы бұзылады, хромосома аралық байланыстар бұзылып, хромосомалар цитоплазмада еркін жүзіп жүреді.
Цитогенетикалық әдіс сатылары - Жасушалар суспензиясын метанол және сірке қышқылының (3:1) қоспасымен бекітеді(фиксация), ол суспензияны центрифугалап, фиксаторды қайта ауыстырады.
- Осы суспензияны заттық шыныға тамызғанда метафазалық пластинка жайылып, хромосомалар жеке жеке жатады. Фиксатор кепкенде жасушалар шыныға жақсы бекінеді.
Достарыңызбен бөлісу: |
