Инструкция по применению Наборы реагентов для определения соматических мутаций в онкогенах для лабораторных исследований in vitro с использованием пцр в реальном времени на оборудовании Rotor-Gene с функцией hrm
жүктеу/скачать 3.31 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
- МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
- ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
Состав набораНаборы реагентов для определения соматических мутаций в онкогенах для лабораторных исследований in vitro с использованием ПЦР в реальном времени на оборудовании Rotor-Gene с функцией HRM Набор лабораторных реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF «BRAF RGQ PCR Kit (24)»
Общие сведения Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF «BRAF RGQ PCR Kit (24)» представляет собой готовый к применению набор для выявления мутаций в онкогене BRAF (кодон V600E) методом ПЦР в реальном времени на приборе Rotor-Gene Q. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF «BRAF RGQ PCR Kit (24)» позволяет выявлять следующие мутации в сравнении с контрольной геномной ДНК дикого типа: V600E common (GAG)* V600E complex (GAA) and V600D (GAT) ** V600K (AAG) *** Используемые методы обладают высокой избирательностью и в зависимости от общего количества ДНК в образце, позволяют выявлять невысокий процент мутантной ДНК на фоне геномной ДНК дикого типа. Чувствительность и селективность набора реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF «BRAF RGQ PCR Kit (24)» намного выше по сравнению с такими технологиями как секвенирование. * чувствительность – достигает 1,27% ** определяет мутации, но не различает их между собой *** обнаружение данной мутации зависит от достаточного копий V600K. 300 копий V600K наблюдается, когда значение порогового цикла достигает CT 34.7
Пользователь должен всегда обращать внимание на следующее: Пользуйтесь стерильными наконечниками с фильтрами для дозаторов и следите за тем, чтобы дозаторы были откалиброваны в соответствии с инструкциями производителя. Храните образцы, положительные контроли и экстрагированную ДНК из образцов отдельно от других реактивов. Добавляйте их в реакционную смесь также на отдельном рабочем участке. Перед началом анализа тщательно размораживайте все компоненты при комнатной температуре (15–25°C). После размораживания перемешайте компоненты (переворачивая каждую пробирку по 10 раз) и кратковременно центрифугируйте. Проявляйте крайнюю осторожность, чтобы избежать загрязнения ПЦР синтетическим контрольным материалом. Мы рекомендуем использовать отдельные специально для этого предназначенные дозаторы для приготовления реакционных смесей и добавления матричной ДНК. Приготовление и раскапывание реакционных смесей должно производиться в отдельном помещении в ламинаре, где не производится раскапывание образцов. Пробирки Rotor-Gene Q не должны открываться по окончании ПЦР-анализа. Информация по технике безопасности Работая с реактивами, всегда надевайте подходящий лабораторный халат, одноразовые перчатки и защитные очки. Весь химический и биологический материал должен считаться потенциально опасным. Пробы являются потенциальным источником инфекции, и с ними следует обращаться соответствующим образом. Утилизируйте отходы проб и анализов в соответствии установленным правилам.
Оборудование и реактивы, приобретаемые отдельно При работе с реактивами всегда надевайте лабораторный халат, одноразовые перчатки и защитные очки. За дополнительными сведениями обращайтесь к соответствующим паспортам безопасности (MSDS), имеющимся у поставщика продукта. Набор реагентов для выделения ДНК (см. «Выделение ДНК») Специальные регулируемые дозаторы для приготовления мастер-микса для ПЦР Специальные регулируемые дозаторы для добавления геномной ДНК* Стерильные наконечники с фильтрами для пипеток Настольная центрифуга* с ротором для 2-мл реакционных пробирок Прибор Rotor-Gene Q 5plex HRM* или Rotor-Gene Q серии 6* с каналами флуоресценции для Cycling Green and Cycling Yellow Программное обеспечение для Rotor-Gene Q версия 2.0.2 Стрипованные пробирки и колпачки, 0,1 мл, для использования с 72-гнездным ротором (№ по каталогу 981103 или 981106) Стерильные микроцентрифужные пробирки для приготовления мастер - миксов.
|